同时检测引起苹果牛眼果腐病的4种病原菌的实时荧光PCR引物探针组合及方法技术

本发明专利技术提供一种用于同时检测引起苹果牛眼果腐病的4种病原菌的实时荧光PCR引物探针组合，所述引物探针组合的序列分别如SEQ ID No.1-6所示。本发明专利技术还基于所述引物探针组合建立了同时检测引起苹果牛眼果腐病的4种病原菌的实时荧光PCR方法，可实现对引起苹果牛眼果腐病的4种病原菌的检测。本发明专利技术的实时荧光PCR引物探针组合及检测方法特异性好、通量高、快速，提高了检测效率，为引起苹果牛眼果腐病的4种病原菌的检测提供了更有效的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术设及分子生物学检测技术，具体地说，设及一种同时检测引起苹果牛眼果 腐病的4种病原菌的实时巧光PCR引物探针组合及方法。
技术介绍
苹果牛眼果腐病度uirs-eyerotofapple)是我国关注的进境水果真菌病害， 病原菌包括Neofabraeamalicorticis、N.perennans、N.a化a和N.kienholzii运 4 个种， 其中N.malicodicis(异名：Peziculamalicodicis)被列入我国进境植物检疫性有害生 物名录中。苹果牛眼果腐病是苹果和梨重要的采后病害，难W防控，不仅为害果实，导致严 重的采后损失，而且可侵害枝条、树干，导致树势衰弱、幼树死亡。其在世界范围内广泛分 布，但尚未在我国发现。该病一旦传入我国，在我国苹果产区扩散、定殖的可能性很大，将对 我国苹果生产造成严重威胁，十分必要加大口岸检疫力度，严防该病菌的传入。然而，苹果 牛眼果腐病菌相似的形态特征和生理特性使运些病原菌的区分非常困难，要求鉴定者必须 具备丰富的真菌分类学基础与经验。加之传统检验方法周期长，不符合进境水果快速通关 的要求，使其成为进境水果真本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同时检测引起苹果牛眼果腐病的4种病原菌的实时荧光PCR引物探针组合，该引物探针组合包括以下引物：Neo F：5′‑CCCTCGGTGGGGCAAAG‑3′；Neo R：5′‑CCAACTCGGCGGCTTCC‑3′；MAL‑P：FAM‑TCATCATCATTTTCATCATC‑MGB；PER‑P：CY5‑CGCGTATCGCAACATCATCATTTTCATCAT‑BHQ2；ALB‑P：NED‑AAGATGTTCAACCCCTCCCTCGCGTA‑BHQ1；KIE‑P：HEX‑TGACCACTTGATGATCTC‑MGB；其中，FAM、CY5、NED、HEX为荧光基团，MGB、BHQ1、B...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王卫芳，林惠娇，胡学难，何日荣，
申请(专利权)人：广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心，中华人民共和国黄埔出入境检验检疫局，
类型：发明
国别省市：广东;44