本发明专利技术提供了一种瑞氏-吉姆萨复合染液，它是由下述配比的原料制备而成：瑞氏染粉15-17重量份、吉姆萨染粉3-4重量份、甘油33-35体积份、甲醇5000体积份。本发明专利技术还提供了该复合染液的制备方法和用途。本发明专利技术的瑞氏-吉姆萨复合染液对人源及动物细胞染色快速、染色效果好，而且本发明专利技术复合染液配方简单、配制成本低，染色时操作简单，利于推广。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种生物试剂，特别是和用途。
技术介绍
细胞染色是组织学、胚胎学、病理学、科研教学中最基本的技术手段，良好的染色效果是细胞形态学观察准确的首要条件。瑞氏(Wright)染液、吉姆萨(Giemsa)染液是细胞检查的常规染色液，但单独使用效果均不够理想，其中，瑞氏染液对细胞质成分染色较好，但对细胞核的着色效果差；吉姆萨染液对细胞核着色较好，但对细胞浆及细胞膜和其中的中性颗粒染色欠佳。为了克服瑞氏染液、吉姆萨染液染色存在的缺点，研究者开发了同时含有瑞氏染料和吉姆萨染料的复合染液配方，并在临床实践中取得了一定的应用。但目前报道的瑞氏-吉姆萨复合染液仍存在缺陷，要么染色时间长、染色效果差；要么复合染液配方复杂，成本高。开发成本低廉、染色效果好、使用方便的瑞氏-吉姆萨复合染液，对临床、科研教学具有重要的实际意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种成本低廉、染色效果好、使用方便的瑞氏-吉姆萨复合染液。本专利技术提供了一种瑞氏-吉姆萨复合染液，它是由下述配比的原料制备而成:瑞氏染粉15-17重量份、吉姆萨染粉3-4重量份、甘油33_35体积份、甲醇5000体积份。其中，所述重量份/体积份与g/ml相对应。其中，所述甲醇为分析纯。其中，它是由下述配比的原料制备而成:瑞氏染粉15重量份、吉姆萨染粉3重量份、甘油33体积份、甲醇5000体积份。其中，它是由下述方法制备而成的:a、称取各配比的原料；b、将瑞氏染粉、吉姆萨染粉、甘油混合，研磨2小时，然后37°C放置12-16小时，研磨15-20分钟；c、加500体积份甲醇，继续研磨15分钟后放置15-20分钟，取出上层染液；d、重复步骤c多次，至甲醇总用量为5000体积份；e、将步骤c、d得到的上层染液在室温下，密封避光保存5天，每天早晚各振摇2分钟；再密封避光保存半月，过滤后即可。本专利技术提供了一种复合染液的制备方法，它包括如下步骤:a、称取下述配比的原料:瑞氏染粉15-17重量份、吉姆萨染粉3_4重量份、甘油33-35体积份、甲醇5000体积份；b、将瑞氏染粉、吉姆萨染粉、甘油混合，研磨2小时，然后37°C放置12-16小时，研磨15-20分钟；c、加500体积份甲醇，继续研磨15分钟后放置15-20分钟，取出上层染液；d、重复步骤c多次，至甲醇总用量为5000体积份；e、将步骤c、d得到的上层染液在室温下，密封避光保存5天，每天早晚各振摇2分钟；再密封避光保存半月，过滤后即可。其中，步骤(a)中，所述甲醇为分析纯。其中，步骤(a)中，所述原料为瑞氏染粉15重量份、吉姆萨染粉3重量份、甘油33体积份、甲醇5000体积份。本专利技术还提供了上述复合染液在细胞染色中的用途。其中，所述细胞是指人源细胞和/或动物细胞。其中，所述细胞染色是指对血涂片和骨髓涂片的染色。本专利技术的瑞氏-吉姆萨复合染液，以瑞氏染料和吉姆萨染料为主要原料通过研磨配制而成，可有效地应用于细胞染色，尤其是应用于血液和骨髓细胞涂片。使用本专利技术染液能呈现出清晰的细胞染色效果，使细胞的胞质、颗粒、胞核等均获得满意的染色效果，染出的细胞分辨率好；而且本专利技术复合染液染色快速、染液配方简单、配制成本低，染色时操作简单，利于推广。目前报道的瑞氏-吉姆萨复合染液多是对人源细胞进行染色检测，并未考虑动物细胞染色效果。专利技术人在研究过程中发现，市售的瑞氏-吉姆萨染色液(购买自珠海贝索)虽然对人源细胞有效染色，但对动物细胞着色困难、染色效果差。本专利技术染液不但可以对人源细胞有效染色，而且对动物细胞染色效果好，满足了动物试验研究中对动物骨髓及血液涂片的染色需求，可有效的应用于临床、教学及动物试验检验。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的【具体实施方式】，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。【附图说明】图1本专利技术复合染液的成熟指数(RA)图2对照染液的大鼠骨髓涂片(1000倍视野)。图3对照染液的犬骨髓涂片(400倍视野)。图4本专利技术染液的大鼠骨髓涂片，正常骨髓象，4A为400倍视野，4B为1000倍视野。图5本专利技术染液的大鼠骨髓涂片，淋巴瘤骨髓浸润(1000倍视野)。【具体实施方式】下面以实施例作进一步说明，但本专利技术不局限于这些实施例。本专利技术所用的试剂、仪器如下:瑞氏染粉、吉姆萨染粉:RS_Sigma ;甲醇(AR级)、甘油:成都市科龙化工试剂厂；显微镜:奥林巴斯显微镜(OLYMPUS BX51)。实施例1本专利技术复合染液的制备1、染液配方瑞氏染粉15g、吉姆萨染粉3g/甘油33mL/甲醇5000mL。2、制备方法取瑞氏染粉15g、吉姆萨染粉3g，甘油33mL，置洁净研钵中研磨2小时后37°C过夜放置15.5小时；取出后，研磨15-20分钟后，加500mL甲醇，研磨片刻后放置15-20分钟，吸出上层染液；再在研钵中加500mL甲醇，继续研磨15分钟后放置15_20分钟，吸出上层染液；如此连续多次共用甲醇(分析纯)5000ml ；将得到的所有上层染液收集于棕色玻璃瓶中密封保存，室温放置，每天早晚各振摇2分钟，共5天，再存放半月，过滤后即可使用，配制后可长期保存。3、检测指标本专利技术的瑞氏-吉姆萨复合染液的成熟指数(RA)为(A640± 10nm/A520±5nm)=1.4±0.I。实施例2本专利技术复合染液的制备1、染液配方瑞氏染粉17g、吉姆萨染粉4g、甘油35mL、甲醇5000mL。2、制备方法及检测指标同实施例1。以下用试验例的方式说明本专利技术的有益效果:试验例1本专利技术染液对动物骨髓涂片的染色一、试验材料本专利技术染液:依据实施例1方法制备的复合染液；对照染液:市售的瑞氏-吉姆萨染色液(厂家:珠海贝索批号:415016有效期:2017-1-29)；骨髓涂片:大鼠涂片、犬涂片。二、染色方法1、加入I液(本专利技术染液或对照染液):在涂片上滴加I液，以染液覆盖整个细胞膜为度，静置0.5?1分钟。2、加II液(PBS缓冲液):滴加等量的II液，用洗耳球吹气混匀，染色即可。三、染色结果对照染液对骨髓涂片的染色结果见图2-3，其中图2为1000倍视野下的大鼠骨髓涂片；图3为400倍视野下的犬骨髓涂片。本专利技术染液对骨髓涂片的染色结果见图4-5，其中图4为正常骨髓象的大鼠骨髓涂片，图5为淋巴瘤骨髓浸润的大鼠骨髓涂片。由图2、图3可见，对照染液对动物骨髓涂片染色效果不佳:涂片细胞受色整体泛蓝，导致镜下辨认困难，从而影响细胞观察，即使调整染液与磷酸盐缓冲液(II液)的比例亦不能解决；而且用对照染液染色时细胞不易着色，加长染色时间亦不能加强染色效果，染色过程耗时长，易导致染料沉渣附着于涂片上。由图4、图5可见，使用本专利技术染液染色时，可在短时间内使涂片细胞受色均匀，不同颜色分辨清晰，红细胞染粉红色，有核细胞核质分明，细胞核染紫红色，染色质和副染色质清晰，粗细松紧可辨，呈现出清晰的细胞染色效果。而且对同样的涂片，对照染液染色10-20分钟效果仍不理想，用本专利技术染液染色5分钟就可达到良好的染色效果。可见，本专利技术染液本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种瑞氏‑吉姆萨复合染液，其特征在于：它是由下述配比的原料制备而成：瑞氏染粉15‑17重量份、吉姆萨染粉3‑4重量份、甘油33‑35体积份、甲醇5000体积份。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘斌，魏新玉，赵璐君，
申请(专利权)人：成都华西海圻医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51
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