一种获得羽衣甘蓝耐寒植株的方法技术

本发明专利技术涉及一种获得羽衣甘蓝耐寒植株的方法，步骤如下：播种育苗，选取8-10片叶、生长健壮旺盛无病虫害的幼苗；喷施诱变剂溶液；幼苗15-20℃光照培养一周，重复喷施诱变剂溶液；1-5℃光照培养10-12天，然后15-20℃的光照培养3-4天；选取褐变、萎蔫和畸形部分小的植株叶片，根据测定的抗寒生理指标，选取幼苗单株；将选出的幼苗露地栽培，在田间自然越冬，在一年中最冷的时候，采集植株叶片，根据测定的抗寒生理指标选取最优秀的突变体单株，花期套袋，自交结实，种荚变黄褐色时，收获种子。获得观赏性状优良、抗寒性较强的突变体植株，且突变体植株的抗寒性能稳定遗传给后代，拓宽了羽衣甘蓝推广种植的地域范围。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种获得羽衣甘蓝耐寒突变体植株的方法，属于植物培育
技术背景 观赏羽衣甘蓝（Brassicaoleraceavar.acephalaf.tricolorHort.)是十字花 科芸薹属甘蓝种的一个变种，原产欧洲地中海至北海沿岸，两年生草本植物，观叶为主，其 叶片形态美观多变，心叶色彩绚丽如花，园艺品种形态多样。在华东地区观赏羽衣甘蓝是 深秋、冬季和早春观赏的首选花卉，具有较高的观赏价值和经济效益。在北方广大地区，羽 衣甘蓝只能秋季和春季观赏栽培，冬季的低温和冰冻是羽衣甘蓝在北方栽培的主要障碍， 尤其是皱叶品种的羽衣甘蓝耐寒性相对较差，在冬季低温来临时冻害严重，制约了品种的 进一步推广应用。因此获得耐寒性较强的羽衣甘蓝品种，扩大羽衣甘蓝推广种植地区和延 长观赏时间，是很有必要性的。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足，本专利技术的目的是提供一种获得具有较强抗寒性、观赏 性状优良的羽衣甘蓝植株的方法，该方法能显著缩短培育时间，获得的耐寒植株新品系能 扩大羽衣甘蓝种植区域。 为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下： 获得羽衣甘蓝耐寒植株的方法，步骤为： (1)、羽衣甘蓝播种育苗，然后选取8-10片叶、生长健壮旺盛无病虫害的幼苗； (2)、选取的幼苗均匀喷施浓度为0.1-0. 15%，pH值=7的硫酸二乙酯溶液进行初 次诱变，每株幼苗喷施量为8-10mL ;(3)、把喷施硫酸二乙酯溶液的幼苗移入15_20°C的光照培养箱内内生长一周，重 复步骤（2)的喷施步骤；(4)、把喷施过两次诱变剂溶液的幼苗植株移入1-5°C的光照培养箱内生长10-12 天，然后移入15-20°C的光照培养箱内内生长3-4天； (5)、选取褐变、萎蔫和畸形部分占整个幼苗植株比列小于25%的植株，取每一株 幼苗上部位一致或相近的无损伤叶片，用于抗寒生理指标的测定，测定叶片内丙二醛，过氧 化物酶和游离脯氨酸的含量，选取12-15个幼苗单株，要求丙二醛含量低，而过氧化物酶和 游离脯氨酸含量高；（具体而言是丙二醛含量低于对照组5倍以上，而过氧化物酶和游离脯 氨酸含量高于对照组50%以上）； (6)将选出的幼苗露地栽培，在田间自然越冬，在一年中最冷的时候，在每个植株 的心叶部位采取叶片（取一致或相近部位的叶片），测定丙二醛、过氧化物酶和游离脯氨酸 的含量；选取3-5个最优秀的突变体单株，花期套袋，自交结实。种荚变黄褐色时，收获种 子；选择突变体单株的依据是叶片中丙二醛含量低，而过氧化物酶和游离脯氨酸含量高，结 合田间观赏性状优良；（具体而言是丙二醛含量低于对照7倍以上，而过氧化物酶和游离脯 氨酸含量高于对照70%以上）； (7)上述植株收获的种子和对照一起播种育苗，在75-80天苗龄时选取旺盛健壮 生长一致的植株，放入-10~-5°C的低温光照培养箱内处理3-4天，后移入5_10°C的光照 培养箱内内生长一周左右，没有冻害现象发生，对照植株有不同程度的冻害发生。选取每个 植株心叶部位的叶片（取一致或相近部位的叶片），测定丙二醛，过氧化物酶和游离脯氨酸 的含量。结果显示诱变植株丙二醛含量低于对照植株10倍以上，而诱变植株的过氧化物酶 (P0D)和游离脯氨酸分别比对照的植株增加120%和95%以上。 专利技术人通过化学试剂（硫酸二乙酯）诱变结合低温处理，获得观赏性状优良、抗寒 性较强的突变体植株，且突变体植株的抗寒性能稳定遗传给后代，拓宽了羽衣甘蓝推广种 植的地域范围。 丙二醛、过氧化物酶（P0D)和游离脯氨酸是鉴定植株抗寒性的重要指标，耐寒性 强的品种在低温条件下植株体内的丙二醛含量较低，而过氧化物酶（P0D)和游离脯氨酸含 量较高。本专利技术通过生理指标测定和田间观察品比及耐寒性鉴定，证实本专利技术获得的观赏 羽衣甘蓝新株系比常规育种获得新品种耐寒性大大提高。【具体实施方式】 以下将结合实施例具体说明本专利技术的技术方案，在以下实施例中所使用的观赏羽 衣甘蓝材料，红色皱叶羽衣甘蓝为经市售获得，化学试剂硫酸二乙酯为市售获得。 实施例1 获得羽衣甘蓝耐寒植株的方法，步骤如下： (1)、8月初羽衣甘蓝播种育苗，可以采用营养钵或花盆育苗（既方便处理幼苗，又 能保证足够的营养生长空间），选取8-10片叶，生长健壮旺盛无病虫害的幼苗600株。 (2)组别设置：共设置6组，其中5组为实验组，另一组为对照组，每组100株； 实验组：喷施硫酸二乙酯（DES，诱变剂）溶液（pH值=7)，每组浓度分别是，A组： 0.05% ;B 组：0? 1% ;C 组：0? 15% ;D 组：0.2% ;E 组：0.25%; 对照组：喷施8-10ml清水； 实验组和对照组的喷施用量以每个植株全株叶面均湿润为宜（每株幼苗喷施量 为 8-10ml) 〇 (3)、把实验组和对照组的幼苗移入15-20°C的光照培养箱内内生长一周左右。观 察发现实验组E浓度处理的幼苗65%死亡，剩余幼苗多数植株叶片畸形；D浓度处理的幼苗 52%死亡，20%植株叶片畸形；C浓度处理幼苗37%死亡，14%植株叶片畸形；B浓度处理幼 苗24%死亡，9%植株叶片畸形；A浓度处理幼苗11 %死亡，5%植株叶片畸形。对照幼苗生 长正常。 (4)、重复步骤（2)。(5)、把经过步骤（2)第二次喷施的实验组和对照组的植株移入1_5°C的光照培养 箱内生长10-12天，然后移入15-20°C的当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
获得羽衣甘蓝耐寒植株的方法，其特征在于步骤如下：（1）、羽衣甘蓝播种育苗，然后选取8‑10片叶、生长健壮旺盛无病虫害的幼苗；（2）、选取的幼苗均匀喷施诱变剂水溶液进行初次诱变，每株幼苗喷施量为8‑10mL；（3）、把喷施诱变剂溶液的幼苗移入15‑20℃的光照培养箱内生长一周，重复步骤（2）的喷施步骤；（4）、把喷施过两次诱变剂溶液的幼苗植株移入1‑5℃的光照培养箱内生长10‑12天，然后移入15‑20℃的光照培养箱内生长3‑4天；（5）、选取褐变、萎蔫和畸形部分占整个幼苗植株比列小于25％的植株，取每一株幼苗上部位一致或相近的无损伤叶片，用于抗寒生理指标的测定，根据叶片内丙二醛，过氧化物酶和游离脯氨酸的含量，选取12‑15个幼苗单株，备用；（6）将选出的幼苗露地栽培，在田间自然越冬，在一年中最冷的时候，在每个植株的心叶部位采集叶片，根据测定的丙二醛、过氧化物酶和游离脯氨酸的含量选取3‑5个最优秀的突变体单株，花期套袋，自交结实，种荚变黄褐色时，收获种子。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：姚悦梅，戴忠良，王建华，潘跃平，吴国平，毛忠良，潘永飞，张振超，秦文斌，肖燕，孙春青，马志虎，孙国胜，
申请(专利权)人：镇江瑞繁农艺有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32