一种获得牵牛花耐热植株的方法技术

一种获得牵牛花耐热植株的方法，（1）牵牛花播种育苗，选取健壮无病虫害的幼苗；（2）喷施诱变剂水溶液；（3）幼苗在20℃-25℃光照培养3-4天，在38℃-40℃，相对湿度80％-90％的环境培养5-7天，在20℃-25℃光照培养3-4天；（4）、选取叶片变色、萎蔫和畸形比例小于25％的植株，测定叶片中生理指标的含量，选取幼苗单株；（5）栽培幼苗，在7月中旬，测定叶片中生理指标的含量，结合田间观赏性状优良，选取最优秀的单株，花期套袋，自交结实。蒴果变黄褐色时，收获种子。本发明专利技术通过化学试剂诱变结合高温胁迫处理，获得了耐热性较强、观赏性状优良的突变体植株，且耐热性能稳定遗传给后代。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种获得牵牛花耐热突变体植株的方法，属于植物培育
技术背景 牵牛花（Pharbitis nil (Linn.) Choisy)是旋花科牵牛属一年生蔓性缠绕草本植 物，蔓生茎细长，约3~4米，全株多密被短刚毛。叶互生，全缘或具叶裂。聚伞花序腋生，1 朵至数朵。花冠喇叭样。花色鲜艳美丽。常见栽培品种有以下三类：裂叶牵牛，叶具深三裂， 花中型1朵至3朵腋生，有莹蓝、玫红或白色；圆叶牵牛，叶阔心脏形，全缘，花型小，有白、玫 红、莹蓝等色；大花牵牛，叶大柄长，具三裂，中央裂片较大，叶易长具不规则的黄白斑块，花 1朵至3朵腋生，总梗短于叶柄，花大型，花径可达10厘米以上。牵牛花管理粗放，是园林绿 化，人造景观，家庭院落美化的好材料，观赏效果非常好，需求量逐年增加，现广泛引植于世 界各地，并选育出众多园艺品种，花型变化多样，花色丰富多彩，目前栽培观赏用牵牛花品 种类型丰富，但有些牵牛花品种如大花牵牛花和裂瓣牵牛花虽然花型、花色观赏性较强，但 耐湿热性较差，夏季高温高湿时易生病枯死，培育出更多具观赏价值、耐湿热以及抗病抗旱 的新品种是牵牛花的主要育种目标，也是牵牛花得以广泛应用的前提和基础。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足，本专利技术的目的是提供一种获得牵牛花突变体植株的方 法，能够获得具有较强耐湿热性的牵牛花突变体新品系，即使在酷热和高温高湿季节也能 获得最大景观效应，提高牵牛花种植的效益。 为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下： 获得牵牛花突变体植株的方法，步骤如下： (1)牵牛花播种育苗，选取8-10片叶，生长健壮无病虫害的幼苗，打去幼苗顶尖部 分； ⑵选取的幼苗均匀喷施浓度为〇? 1-0. 15%的诱变剂水溶液（硫酸二乙酯（DES) 溶液，pH = 7))，喷施用量以每个植株全株叶面均湿润为宜； (3)把喷施诱变剂溶液的幼苗在20°C_25°C光照培养3-4天，在38°C_40°C，相对 湿度80% -90%的环境培养5-7天，在20°C-25°C光照培养生长3-4天； (4)、选取经过步骤（3)培养后叶片变色、萎蔫和畸形部分占整个幼苗植株比例小 于25%的植株，取每株幼苗都取一致或相近部位的无损伤叶片，用于生理指标的测定； 所述的生理指标是丙二醛，过氧化物酶（P0D)和游离脯氨酸的含量；以丙二醛含 量较低，而过氧化物酶（P0D)和游离脯氨酸较高为依据依次选取10-12个幼苗单株，（具 体而言是丙二醛含量低于对照5倍以上，而过氧化物酶和游离脯氨酸含量高于对照50%以 上）； (5)、选出的幼苗栽培在大田，在7月中旬，在每个植株的中上部位采取生长正常 无病害叶片，分别测定生理指标；以丙二醛含量较低，而过氧化物酶（P0D)和游离脯氨酸较 高为依据，结合田间观赏性状优良，选取3-5个最优秀的单株，花期套袋，自交结实。蒴果变 黄褐色时，收获种子；具体而言是叶片中丙二醛含量低于对照7倍以上，而过氧化物酶和游 离脯氨酸含量高于对照70 %以上。 丙二醛、过氧化物酶（P0D)和游离脯氨酸是鉴定植株抗逆性的的重要指标，耐热 性强的品种在热胁迫情况下丙二醛含量较低，而过氧化物酶（P0D)和游离脯氨酸含量较 尚。 本专利技术通过化学试剂诱变结合高温胁迫处理，获得了耐热性较强、观赏性状优良 的突变体植株，且耐热性能稳定遗传给后代，拓宽了牵牛花推广种植的时间和地域范围，增 加了商品效益。和常规育种法相比较，大大缩短了育种时间。【具体实施方式】 以下将结合实施例，对本专利技术的技术方案进行具体说明。以下实施例中所使用的 观赏牵牛花材料，大花牵牛花为市售获得。化学试剂硫酸二乙酯为市售获得。 实施例1 获得牵牛花突变体植株的方法，步骤如下： (1) 6月初牵牛花播种育苗，可以采用营养钵或花盆育苗，选取8-10片叶，生长健 壮旺盛无病虫害的幼苗600株，打去幼苗顶尖部分。 (2)组别设置：共设置6组，其中5组为实验组，另一组为对照组，每组100株； 实验组：喷施硫酸二乙酯（DES，诱变剂）溶液（pH值=7)，每组浓度分别是，A组： 0.05% ;B 组：0? 1% ;C 组：0? 15% ;D 组：0.2% ;E 组：0.25%; 对照组：喷施8-10ml清水； 实验组和对照组的喷施用量以每个植株全株叶面均湿润为宜（每株幼苗喷施量 为 8-10ml) 〇 (3)、实验结果分析：把实验组和对照组的幼苗移入20-25°C的光照培养箱内内生 长一周左右，结果如下： E浓度处理的幼苗85 %死亡，剩余幼苗植株叶片畸形或者褐变、白化不能正常生 长； D浓度处理幼苗67%死亡，30%植株叶片不同程度畸形和褐变白化； C浓度处理幼苗47%死亡，20%植株叶片不同程度畸形和褐变白化； B浓度处理幼苗35%死亡，12%植株叶片不同程度畸形和褐变白化； A浓度处理幼苗19%死亡，10%植株叶片不同程度畸形和褐变白化。 对照组幼苗生长正常。 (4)、把实验组和对照组的幼苗植株移入20°C -25°C的光照培养箱内内生长3-4 天，然后把幼苗植株移入38°C -40°C，相对湿度80 % -90 %的光照培养箱内生长5-7天（高 温期间浇水以免植株干旱致死），然后移入20-25°C的光照培养箱内内生长3-4天，对照组 有大部分幼苗叶片边缘萎蔫，有些植株枯黄，属热害现象。 (5)、在实验组的AB⑶四种浓度处理的幼苗中选取处理后白化褐变、萎蔫和畸形 部分占整个幼苗植株比列小于25%的植株，D浓度处理的植株中没有发现符合要求的植 株，同时在对照组中随机挑选无热害或热害较轻的幼苗20株，把挑选出来的每一株幼苗都 取一致或相近部位的无损伤畸形叶片，用于耐热生理指标（丙二醛，过氧化物酶（POD)和游 离脯氨酸的含量）的测定。 (6)，耐热指标测试：结果显示诱变处理的每个单株幼苗中的丙二醛都低于对照幼 苗平均值5倍以上，而过氧化物酶（P0D)和游离脯氨酸都高于对照组幼苗120%以上。在 诱变处理过的幼苗中根据丙二醛含量较低，而过氧化物酶（P0D)和游离脯氨酸较高为依据 依次选取诱变处理后的10-12个最优幼苗单株，结果显示这些单株全部出自B浓度处理和 C浓度处理的幼苗。说明诱变剂处理牵牛花幼苗的最佳浓度在0. 1-0. 15%。 (7)、诱变选出的幼苗和对照组幼苗一起栽培在大田，在7月中旬高温高湿季节来 临后，在每个植株的上部采取生长正常无病害叶片（取一致部位的叶片），分别测定丙二 醛，过氧化物酶（P0D)和游离脯氨酸的含量。根据丙二醛含量较低，而过氧化物酶（P0D)和 游离脯氨酸较高为依据，结合田间观赏性状优良，选取3-5个最优秀的突变体单株，花期套 袋，自交结实。种荚变黄褐色时，收获种子。同时对照植株也以此选取3-5个单株花期套袋， 自交结实，收获种子。 实施例2验证试验 将实验组诱变收获的植株种子（L)和对照组植株收获的种子一起播种育苗， 两种类型的植株在45-50天苗龄时各选取20株旺盛健壮生长一致的植株，放入移入 38°C -40°C，相对湿度80% -90 %的光照培养箱内生长3-4天（放入培养箱前，每个植株浇 透水，在高温胁迫期间不在浇水）。对照组植株有热害现象发生，叶片极度卷曲皱缩，有些植 株部分萎蔫枯黄，浇水后不再本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种获得牵牛花耐热植株的方法，其特征在于步骤如下：（1）牵牛花播种育苗，选取8‑10片叶，生长健壮无病虫害的幼苗，打去幼苗顶尖部分；（2）选取的幼苗均匀喷施诱变剂水溶液，喷施量以每个植株全株叶面均湿润为宜；（3）把喷施诱变剂溶液的幼苗在20℃‑25℃光照培养3‑4天，在38℃‑40℃，相对湿度80％‑90％的环境培养5‑7天，在20℃‑25℃光照培养生长3‑4天；（4）、选取经过步骤（3）培养后叶片变色、萎蔫和畸形部分占整个幼苗植株比例小于25％的植株，每株幼苗都取一致或相近部位的无损伤叶片，测定丙二醛，过氧化物酶和游离脯氨酸的含量；并根据所测定的生理指标的含量选取10‑12个幼苗单株；(5)、选出的幼苗栽培在大田，在7月中旬，在每个植株的中上部位采取生长正常无病害叶片，测定丙二醛含量、过氧化物酶和游离脯氨酸含量，根据所测定的生理指标的含量，结合田间观赏性状优良，选取3‑5个最优秀的单株，花期套袋，自交结实,蒴果变黄褐色时，收获种子。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：姚悦梅，潘跃平，毛忠良，戴忠良，王建华，吴国平，张振超，潘永飞，秦文斌，肖燕，孙春青，马志虎，孙国胜，
申请(专利权)人：镇江瑞繁农艺有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32