猪场净化疫病的方法技术

本发明专利技术公开了一种猪场净化疫病的方法，通过免疫抗体检测将猪群分为抗体阴性分群及抗体阳性分群；所述抗体阴性分群进行加强免疫接种，接种后再次检测免疫抗体，抗体阳性猪只纳入所述抗体阳性分群；采集所述抗体阳性分群中母猪分娩时仔猪脐带中的体液作为检测样本，通过PCR方法同步检测猪瘟病毒及猪伪狂犬病毒，保留猪瘟病毒及猪伪狂犬病毒均为阴性的猪只；对保留的猪只进行定期抽检与全面检测，淘汰猪瘟病毒及猪伪狂犬病毒均为阳性或其中之一为阳性猪只，以实现猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的同步净化。该方法同步净化猪瘟和猪伪狂犬病毒，效率高、应激小、操作简便。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及疾病净化领域，特别是指一种。
技术介绍
猪瘟俗称"烂肠瘟"，是由黄病毒科猪瘟病毒属的猪瘟病毒引起的一种急性、发热、 接触性传染病，具有高度传染性和致死性。猪伪狂犬病是猪群多种传染病的原发性疾病之 一。规模化猪场的猪只感染猪伪狂犬病或猪瘟直接或间接造成产房仔猪腹泻、保育猪高残 次率，中大猪呼吸道疾病等问题，导致高死亡率和高发病率，给养猪场带来巨大的经济损 失。 目前规模化猪场内，针对猪瘟和猪伪狂犬病采取分别净化的方法。针对猪瘟的净 化通常采用采集扁桃体开展猪瘟净化，随后通过基因缺失疫苗和鉴别开展猪伪狂犬病的净 化。其具体实施方案为：首先，对种猪群进行免疫接种，采集样进行检测免疫抗体，采集扁桃 体，进行猪瘟免疫荧光或套式RT-PCR或荧光定量PCR检测猪瘟病毒，检测阳性母猪，给予淘 汰。随后，针对猪伪狂犬病毒净化，即免疫结合鉴别诊断，检测到野毒阳性即淘汰，目前猪伪 狂犬病毒病毒的鉴别诊断技术灵敏度相对较低，通常需2-3年监测和阳性种猪的淘汰，最 终达到净化的目的。 由于不同的病毒具有不同的嗜性以及净化的方法。现有的不 能同步开展猪伪狂犬病和猪瘟的净化工作，需分别进行。并且，由于种猪体重大，不论采集 前腔静脉血或采集扁桃体均相对比较复杂，且应激过大易造成怀孕母猪流产，同时血样采 集需要多人协助，且需要特殊设备，采集过程相对比较费时，采集扁桃体易出现交叉污染。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提出一种，同步净化猪瘟和猪 伪狂犬病毒，效率高、应激小、操作方便。 基于上述目的本专利技术提供的，通过免疫抗体检测将猪群分为 抗体阴性分群及抗体阳性分群；所述抗体阴性分群进行加强免疫接种，接种后再次检测免 疫抗体，抗体阳性猪只纳入所述抗体阳性分群；采集所述抗体阳性分群中母猪分娩时仔猪 脐带中的体液作为检测样本，通过PCR方法同步检测猪瘟病毒及猪伪狂犬病毒，保留猪瘟 病毒及猪伪狂犬病毒均为阴性的猪只；对保留的猪只进行定期抽检与全面检测，淘汰猪瘟 病毒及猪伪狂犬病毒均为阳性或其中之一为阳性猪只，以实现猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的 同步净化。 较佳的，采集所述抗体阳性分群中母猪分娩时仔猪脐带中的体液作为检测样本， 分别提取DNA与RNA，其中提取的RNA通过套式RT-PCR方法检测猪瘟病毒；提取的DNA通 过PCR方法检测猪伪狂犬病毒。 较佳的，所述提取的DNA通过PCR方法扩增猪伪狂犬病毒的gD基因片段与gE基 因片段，经琼脂糖凝胶电泳鉴定。 较佳的，所述gD基因片段的大小为217bp，所述gE基因片段的大小为350bp。 较佳的，所述套式RT-PCR方法检测猪瘟病毒基因片段，其中外套PCR获得806bp 的基因片段，内套PCR获得基因片段大小为512bp。 可选的，所述检测样本母猪分娩时仔猪脐带中的体液为3-5mL。 较佳的，所述免疫抗体检测的是猪瘟病毒抗体、猪伪狂犬病毒gB抗体、猪圆环2型 抗体和蓝耳病毒抗体，四种免疫抗体检测全为阳性猪只纳入抗体阳性分群，存在其中一种 或以上免疫抗体阴性的猪只纳入抗体阴性分群。 较佳的，所述抗体阴性分群进行加强免疫接种，接种其检测为阴性的疫病抗体对 应的疫苗一次，接种后一个月，再次进行所述免疫抗体检测，检测阳性猪只纳入所述抗体阳 性分群，阴性猪只淘汰。 较佳的，所述定期抽检与全面检测中，每季度按20-30%抽样检测猪瘟病毒抗体、 猪伪狂犬病毒gB抗体、猪圆环2型抗体和蓝耳病毒抗体一次。 较佳的，所述定期抽检与全面检测中，每半年全部仔猪断脐带时采集脐带中体液， 通过PCR方法检测猪瘟病毒及猪伪狂犬病毒，并淘汰检测两种疫病均为阳性或其中一种为 阳性的猪只。 从上面所述可以看出，本专利技术提供的可以同步达到净化猪瘟 和猪伪狂犬病两种重要疾病，操作简便、快速、无交叉污染且应激小。减少了由于猪瘟和猪 伪狂犬病引起的损失。【附图说明】 图1为本专利技术实施例的流程示意图。【具体实施方式】 为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照 附图，对本专利技术进一步详细说明。 图1为本专利技术实施例的流程示意图。如图1所示，在本实施 例中，所述通过免疫抗体检测将猪群分为抗体阴性分群及抗体阳性分 群；所述抗体阴性分群进行加强免疫接种，接种后再次检测免疫抗体，抗体阳性猪只纳入所 述抗体阳性分群；采集所述抗体阳性分群中母猪分娩时仔猪脐带中的体液作为检测样本， 通过PCR方法同步检测猪瘟病毒及猪伪狂犬病毒，保留猪瘟病毒及猪伪狂犬病毒均为阴性 的猪只；对保留的猪只进行定期抽检与全面检测，淘汰猪瘟病毒及猪伪狂犬病毒均为阳性 或其中之一为阳性猪只，以实现猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的同步净化。可见，本实施例猪场 净化疫病的方法通过PCR方法检测猪场母猪分娩的脐带体液，同步净化猪瘟病毒和猪伪狂 犬病毒，应激小、效率高、操作方便。 实施例一：免疫抗体检测及初步分群 对全场的种猪进行一次临床外观检查，淘汰老、弱及产仔8胎以上的种猪，组成假 定健康种猪群。 采集上述假定健康种猪群的前腔静脉血分离血清，通过ELISA (酶联免疫吸附实 验）方法检测假定健康种猪群的猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒、蓝耳病的免疫抗体 (武汉科前生物有限公司研发的猪瘟病毒抗体、猪伪狂犬病毒gB抗体、猪圆环2型抗体和蓝 耳病毒抗体ELISA试剂盒）的表达，选取四种抗体均为阳性的猪只为成功免疫的猪群，纳入 抗体阳性分群。 判断标准： 猪瘟病毒：S/P (样本OD63toni值/阳性对照OD 63Qnni值）值彡0. 17,判为阳性；S/P值 < 〇. 17,判为阴性。 猪伪狂犬病毒gB抗体：S/N(样本OD630nni值/阴性对照OD 63Qnni值）值彡0. 7,判为 阴性；S/N值彡0. 6为阳性；若0. 6 < S/N值彡0. 7,为可疑，样品重新检测，如果结果相同， 则间隔两周再次采样检测。 猪圆环病毒2型抗体：样品（S-N) ΛΡ-Ν)值彡0. 16,则判为阳性；如果样品（S-N) / (P-N)值< 0. 16,则判为阴性。其中，S为样本OD63ta值；P为阳性对照OD 63_值；N为阴性 对照〇D63。?值。 蓝耳病毒抗体：样品KQ值多20,判为阳性；样品KQ值< 20,判为阴性。其中，KQ =(样本OD630nni值/阳性对照平均值）*100。 根据检测结果，将假定健康种猪群分为抗体阳性分群与抗体阴性分群，两群隔离 饲养。其中，抗体阳性分群为上述免疫抗体检测全为阳性猪只，抗体阴性分群为上述检测存 在免疫抗体阴性的猪只。 实施例二：抗体阴性分群加强免疫 根据实施例一种抗体检测结果，抗体阴性分群的猪只加强免疫接种其检测为阴性 的疫病抗体对应的疫苗一次，按照相应疫苗使用说明剂量操作。 接种相应疫苗1个月后，再次进行相应免疫抗体检测，基于实施例一判断标准，将 阴性猪只淘汰，阳性猪只纳入抗体阳性分群。[0当前第1页1 2 3 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪场净化疫病的方法，其特征在于，通过免疫抗体检测将猪群分为抗体阴性分群及抗体阳性分群；所述抗体阴性分群进行加强免疫接种，接种后再次检测免疫抗体，抗体阳性猪只纳入所述抗体阳性分群；采集所述抗体阳性分群中母猪分娩时仔猪脐带中的体液作为检测样本，通过PCR方法同步检测猪瘟病毒及猪伪狂犬病毒，保留猪瘟病毒及猪伪狂犬病毒均为阴性的猪只；对保留的猪只进行定期抽检与全面检测，淘汰猪瘟病毒及猪伪狂犬病毒均为阳性或其中之一为阳性猪只，以实现猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的同步净化。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：喻正军，李增强，王贵平，黄岚芬，李伦勇，刘清钢，
申请(专利权)人：湖南新南方养殖服务有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43