用于检测前列腺基底细胞的方法技术

本发明专利技术的目的是提供一种通过搜寻在前列腺基底细胞中特异性表达的分子并分析这些分子来检测前列腺基底细胞的方法。该问题能够采用用于检测前列腺基底细胞的方法来解决，该方法的特征在于，其采用免疫组化染色使TRIM29(三重基序蛋白29)蛋白在前列腺基底细胞中的表达可视化。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术设及一种，一种用于识别前列腺基底细胞 的存在、减少和消失的方法，W及一种用于检测前列腺基底细胞的免疫组化染色试剂盒。本 专利技术使得能够可靠地检测前列腺基底细胞。本专利技术还使得能够可靠地确诊前列腺癌。
技术介绍
正常的前列腺由腺细胞和基底细胞组成，观察组织学图片，基底细胞存在于腺细 胞周围。 雄激素受体、细胞角蛋白8和细胞角蛋白18在腺细胞中特异性表达，且多数前列 腺癌表达作为该些腺细胞的标记物的雄激素受体、细胞角蛋白8、或细胞角蛋白18。因此， 前列腺癌被认为源于腺细胞。 已知基底细胞在前列腺癌中消失。因此，通过采用正常基底细胞中表达的p36或 细胞角蛋白的抗体来执行前列腺的免疫组化染色并识别基底细胞的消失，从而进行前列腺 癌的确诊。引用列表 专利文献 专利文献1 ;国际公开W02008/150512 专利文献2 ;国际公开W02005/014781 专利文献3 ;国际公开W02004/018711 专利文献4 ;国际公开W02006/080597[001U专利文献5 ;国际公开W02004/018711
技术实现思路
巧术间願 关于上述基底细胞的免疫组化染色，仅通过采用p63抗体或细胞角蛋白抗体的免 疫组化染色，有时难W确定基底细胞是否已经消失。 因此，本专利技术的目的是提供一种通过捜寻在前列腺基底细胞中特异表达的分子并 分析该些分子来检测前列腺基底细胞的方法。巧术间願的解决方秦 作为对正常前列腺组织基底细胞中特异表达的分子的大量研究的成果，本专利技术的 专利技术人已经令人惊讶地发现，S重基序蛋白29(TRIM29)在正常前列腺组织的基底细胞中 特异表达。且已经显示出，基底细胞能够通过免疫组化染色的方式使TRIM29在前列腺组织 中的表达可视化从而进行检测。 本专利技术基于W下该些发现。[001引具体而言，本专利技术设及： 一种，包括通过免疫组化染色使=重基序蛋 白29 (TRIM29)蛋白在前列腺基底细胞中的表达可视化； 根据的，包括分析前列腺的腺组织结构 的形态W及S重基序蛋白29(TRIM29)蛋白的可视化表达； 閒根据山或凹的，还包括通过免疫组化染色 使细胞角蛋白和/或p63蛋白的表达可视化； 根据巧]的，包括分析前列腺的腺组织结构 的形态W及细胞角蛋白的可视化表达和/或P63细胞的可视化表达；~中任一项的； -种用于诊断前列腺癌的方法，包括通过免疫组化染色使用TRIM29抗体或其 抗原结合片段在从受试者采集的前列腺组织中检测前列腺基底细胞的步骤； 根据的诊断方法，其中，与正常前列腺组织相比的前列腺基底细胞的减少 或消失指示前列腺癌的存在；[引TRIM29抗体或其抗原结合片段，其用在前列腺癌的诊断中； 一种用于诊断前列腺癌的诊断组合物，包含TRIM29抗体或其抗原结合片段；TRIM29抗体或其抗原结合片段在制备用于诊断前列腺癌的诊断组合物中的 用途； 山]一种用于检测前列腺基底细胞的免疫组化染色试剂盒，包含TRIM29抗体或 其抗原结合片段；W及 根据的用于检测前列腺基底细胞的免疫组化染色试剂盒，还包含细胞 角蛋白抗体或其抗原结合片段，和/或p63抗体或其抗原结合片段。TRIM29的基因被报道为与肺癌、卵巢浆液性乳头状腺癌、W及宫颈上皮内瘤样病 变有关（专利文献1~4)。还公开了一种通过检查包括TRIM29的80种mRNA来预测前列 腺癌的预后的方法（专利文献5)。然而，还未报道TRIM29在正常前列腺的基底细胞中表 达。发巧的有益效果 根据本专利技术的能够可靠地检测正常的前列腺基 底细胞，并可用于前列腺的组织学研究。该方法与所表达细胞角蛋白和/或p63的免疫组 化染色的结合能够更可靠地检测前列腺基底细胞。 根据本专利技术的，W及根据本专利技术的用于识别前列 腺基底细胞的存在、减少和消失的方法，使得能够确诊前列腺癌。该方法与所表达的细胞角 蛋白和/或p63的免疫组化染色的组合使得能够更可靠地确诊前列腺癌。【附图说明】图1是一系列显微图，其各个示出被施WTRIM29多克隆抗体或细胞角蛋白 单克隆抗体（34 0E12)的免疫组化染色的正常前列腺组织或前列腺癌组织。图2是一对显微照图，其各个示出被施WTRIM29单克隆抗体的免疫组化染 色的正常前列腺组织。图3是一对显微图，其各个示出被施WTRIM29单克隆抗体或细胞角蛋白单 克隆抗体（34 0E12)的免疫组化染色的正常前列腺组织。【具体实施方式】 根据本专利技术的包括通过免疫组化染色使=重基 序蛋白29(TRIM29)蛋白在前列腺基底细胞中的表达可视化。根据该方法，源自前列腺的表 达TRIM29的细胞能够基于其形态和蛋白表达而被确定为基底细胞。另外，该方法使得能够 通过识别前列腺的腺组织结构的形态和TRIM29蛋白的可视化表达而检测构成部分腺组织 结构的基底细胞。 具有可通过本专利技术的检测方法而检测的前列腺基底细胞的动物种类不受限制，只 要其在前列腺中具有基底细胞；并且动物种类的实例包括哺乳动物，如人、猴、狗、猫、雪貂、 牛、马、山羊、绵羊、豚鼠、仓鼠、沙鼠、小鼠或大鼠。本专利技术的检测方法还能够被用在分离的 细胞中。例如，该方法还可W被应用于包括来自任何上述哺乳动物的分离基底细胞的原代 培养细胞或传代细胞。 <前列腺〉 前列腺是男性生殖系统中的腺体且位于膀脱下方和直肠前部。前列腺由两种类型 的细胞组成；基底细胞和腺细胞。在组织学上，前列腺基底细胞存在于前列腺腺细胞的周 围。[00创（前列腺腺细胞） 前列腺腺细胞特异性地表达雄激素受体、细胞角蛋白8和细胞角蛋白18,并且大 多数前列腺癌源自于前列腺腺细胞。(前列腺基底细胞） 可W通过本专利技术的检测方法检测的前列腺基底细胞不受限制，只要该些细胞表达 TRIM29。然而，该并不排除不表达TRIM29的前列腺基底细胞的存在。 除TRIM29之外，基底细胞特异性地表达p63、细胞角蛋白5和细胞角蛋白14。p63 被认为在前列腺的发育中发挥重要作用；基底细胞的核通过使用4A4的免疫组化染色而染 色，其中4A4是一种p63单克隆抗体。细胞角蛋白5和细胞角蛋白14存在于细胞质中并通 过使用34 0E12的免疫组化染色而被染色，其中34 0E12是一种细胞角蛋白单克隆抗体。单 克隆抗体34 0E12是对除细胞角蛋白5和细胞角蛋白14W及细胞角蛋白1和细胞角蛋白 10显示出阳性反应的抗体。 <TRIM29> S重基序蛋白29(TRIM29)属于TRIM基因家族，且还称为ATDC(共济失调毛细血 管扩张症D相关蛋白）。人的TRIM29由588个氨基酸构成。TRIM29具有多个锋指基序和 亮氨酸拉链基序并与DNA结合。TRIM29被认为可能作为分化过程中的转录调节因子。已知 TRIM29与共济失调毛细血管扩张相关，且已被指出与抑制放射敏感性的功能有关。当前第1页1 2 3 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测前列腺基底细胞的方法，包括通过免疫组化染色使三重基序蛋白29(TRIM29)蛋白在前列腺基底细胞中的表达可视化。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：畠山镇次，田中伸哉，
申请(专利权)人：国立大学法人北海道大学，LSIP基金运营联合公司，
类型：发明
国别省市：日本;JP