利用人工合成MV5序列培育抗花叶病甘蔗品种的方法技术

一种利用人工合成MV5序列培育抗花叶病甘蔗品种的方法，包括MV5序列的人工合成、RNAi干扰载体构建、抗花叶病转基因甘蔗材料的培育和抗病转基因甘蔗的抗病性鉴定。本发明专利技术获得的植物表达载体采用了RNAi技术，使得甘蔗抗病毒育种摆脱了对抗源基因的依赖，可以有效地缩短甘蔗抗花叶病育种周期。本发明专利技术已获得的转基因植株，具有抗性广谱、抗病性好、抗性持久及生物安全性高等特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种培育甘蔗抗病品种的方法，具体涉及一种利用人工合 成MV5序列培育抗花叶病甘蔗品种的方法，属于生物。
技术介绍
甘鹿（Saccharum officinarum)是最重要的糖料作物，鹿糖占我国食 糖总产的90%以上。甘蔗花叶病是甘蔗上发生最普遍、危害最严重的一类病毒病害，它主 要破坏甘蔗叶片的叶绿体，严重制约其光合作用，从而使甘蔗的生长受到限制，造成产量 降低5% -19%、节间变短、品质变劣和品种退化。该病病原复杂，可由多种病毒引起，主 要为甘鹿花叶病毒（Sugarcane Mosaic Virus, ScMV)和高梁花叶病毒（Sorghum Mosaic Virus，SrMV)，属马铃薯Y病毒属（Potyvirus)成员，为单链正义RNA病毒，基因组结构简 单，编码10个成熟蛋白，分别为PI、HC-pro、P3、6K1、CI、6K2、VPg、NIa、Nib和CP。且该病 的侵染病毒极易分化，不同地区的分离物或株系均存在差异。在1997年已报道至少存在7 个株系，包括属于ScMV的株系ScMV-A，B，D，E和属于SrMV的株系SrMV-H，I，M本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用人工合成MV5序列培育抗花叶病甘蔗品种的方法，包括MV5序列的人工合成、RNAi干扰载体构建、抗花叶病转基因甘蔗材料的培育及抗病性鉴定；其特征在于：(1)MV5序列的人工合成：从ScMV和SrMV核酸序列中选取若干区段串联在一起，获得MV5序列，同时在正义链5′端加入Xba I和Xho I酶切位点，反义链5′端加入Cla I和Kpn I酶切位点，采用人工合成的方式，获得目的片段A，其序列如下：GATCTAGACT CGAGGCATCT CCAACATTCA GACAGATAAT GCACCACTTT AGTGATGCAGCTGAAGCGTA CATAGAGCGT AGATTTAGGC ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：高世武，郭晋隆，许莉萍，阙友雄，苏亚春，吴期滨，高世宇，林庆良，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：福建;35