采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺的方法技术

本发明专利技术公开了一种采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺的方法，包括以下步骤：步骤1：取饲料样品，加入到缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理后再经过离心处理，取离心处理后的上清液少量；步骤2：将上清液加入到SLE柱后，静置2～4分钟；步骤3：采用二元洗脱剂对SLE柱洗脱至少两次，接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺的洗脱液。本发明专利技术的目的在于提供一种分离效率高、操作简单的采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及动物饲料的检测领域，特别是一种采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺的方法。
技术介绍
样品前处理是分析检测过程的关键环节，是浓缩被测定的痕量组分，提高方法的灵敏度，及除去对分析系统有干扰的物质的重要手段。萃取是从样品集体中分离出目标化合物的一项技术，是样品预处理中最重要的方法之一。目前，液液萃取仍然是应用最广泛的样品制备方法之一，但是，传统的液液萃取的操作繁琐费时、有机溶剂消耗量大，而且容易出现乳化现象的缺陷，使得在实际应用中具有一定的局限性。1998年，科学家提出了在传统的液液萃取的基础上，利用一种具有吸附性和较大的比表面积的惰性多空填料作为介质，建立的一种新型高效样品的制备方法-介质液液萃取(supported liquid extraction简称SLE)，SLE萃取技术就是选用一种多孔性惰性材料-煅烧硅藻土作为介质，取代分液漏斗，增大了两相接触时的作用面积，实现高效、快速的萃取过程。当水溶液样品加样到固定的聚丙烯注射管中的煅烧硅藻土上后，经过一定时间(一般分为几分钟)，水相溶液以一层薄薄的液膜形式分布在填料表面，之后，将有机溶剂从柱管上端加入，当互不相溶的两相在硅藻土表面接触的同时萃取立即发生，最后萃取液在重力作用下流出，必要情况下，可以施加较小的压力，而水相保留在介质中。盛接的流出液直接将溶剂吹干，复溶后，即可用于下一步分析检测。现有的国标和现有公开的文献并未涉及动物饲料中的莱克多巴胺的分离方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种分离效率高、操作简单的采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺的方法。本专利技术的技术方案为：一种采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺的方法，包括以下步骤：步骤1：取饲料样品，加入到缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理后再经过离心处理，取离心处理后的上清液少量；所述的饲料样品为1g，缓冲溶液为5ml，步骤2中所取的上清液为0.5ml；步骤2：将上清液加入到SLE柱后，静置2～4分钟；步骤3：采用二元洗脱剂对SLE柱洗脱至少两次，，每次洗脱时所用的洗脱剂为0.5ml，接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺的洗脱液；其中，所述的缓冲溶液为：Ph范围为8.0～10.0的氨水-氯化铵缓冲液，所述的二元洗脱剂为异丁醇和乙酸甲酯的混合物，其中异丁醇和乙酸甲酯的重量比为0.5～1:1。在上述的采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺的方法中，所述的步骤1中，漩涡混合器混合处理的时间为0.5～1.5分钟。在上述的采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺的方法中，所述的步骤1中，所述的离心处理的具体操作为：将经混合处理的溶液在离心机中以9000～11000转/分钟的速度离心0.5～1.5分钟。在上述的采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺的方法中，所述的SLE柱为奥秘山东科技有限公司生产的介质液液萃取SLE柱。本专利技术的有益效果如下：采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺分离效率高，本专利技术的缓冲溶液能够有效的分离样品中的莱克多巴胺，二元洗脱剂对莱克多巴胺有特别优异的萃取效果，可以应用于以96孔板结构为代表的高通量体系。经过检测，本专利技术的方案的萃取率为：93.6％。具体实施方式下面结合具体实施方式，对本专利技术的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制。实施例1步骤1：取饲料样品1g，加入到5ml的缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理处理1分钟后再经过离心处理，取离心处理后的上清液0.5ml；离心处理的转速为10000转/分钟，离心时间1分钟。所述的缓冲溶液为：ph为9.0的氨水-氯化铵缓冲液。步骤2：将上清液加入到SLE柱后，静置3分钟；步骤3：采用二元洗脱剂对SLE柱洗脱2次，接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺的洗脱液；每次消耗的洗脱剂为0.5ml，所述的二元洗脱剂为异丁醇和乙酸甲酯的混合物，异丁醇和乙酸甲酯的重量比为0.8:1。实施例2步骤1：取饲料样品1g，加入到5ml的缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理处理1分钟后再经过离心处理，取离心处理后的上清液0.5ml；离心处理的转速为10000转/分钟，离心时间1分钟。所述的缓冲溶液为：ph为8.0的氨水-氯化铵缓冲液。步骤2：将上清液加入到SLE柱后，静置4分钟；步骤3：采用二元洗脱剂对SLE柱洗脱2次，接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺的洗脱液；每次消耗的洗脱剂为0.5ml，所述的二元洗脱剂为异丁醇和乙酸甲酯的混合物，异丁醇和乙酸甲酯的重量比为1:1。实施例3步骤1：取饲料样品1g，加入到5ml的缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理处理1分钟后再经过离心处理，取离心处理后的上清液0.5ml；离心处理的转速为10000转/分钟，离心时间1分钟。所述的缓冲溶液为：ph为10.0的氨水-氯化铵缓冲液。步骤2：将上清液加入到SLE柱后，静置4分钟；步骤3：采用二元洗脱剂对SLE柱洗脱2次，接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺的洗脱液；每次消耗的洗脱剂为0.5ml，所述的二元洗脱剂为异丁醇和乙酸甲酯的混合物，异丁醇和乙酸甲酯的重量比为0.5:1。标准样的制备称取莱克多巴胺标准品(纯度≥99％)0.1000g，置于100ml容量瓶中，用重量比为0.8:1的异丁醇和乙酸甲酯的混合物的溶剂溶解定容，其浓度为1000μg/ml；取上述浓度为1000μg/ml的莱克多巴胺溶液于100ml容量瓶中，配制成为0.100μg/ml、0.200μg/ml、0.500μg/ml、1.000μg/ml、2.000μg/ml的标准样。对比例1与实施例1大体相同，不同的地方在于，步骤3中，洗脱剂为异丁醇与乙酸乙酯的混合物，其体积比为40:60。分析：检测方法具体为：仪器：LC-2010型高效液相色谱仪(日本岛津)色谱柱：C18柱，150mm*3.9mmID柱温：室温流动相：0.05％磷酸水溶液：苯胺＝40:60(体积比)；检测器：UV检测器；检测波长：226nm；进样量：50μL以0.100μg/ml、0.200μg/ml、0.500μg/ml、1.000μg/ml、2.000μg/ml的标准样进行测试，回归方程为Y＝667X，R2＝0.9998，X为待测物浓度，Y为峰面积。以实施例1所萃取的样品为待测样品，待测样品的具体组分为70wt％玉米、30wt％蛋白质饲料，其中蛋白质饲料由豆粕、棉粕和菜粕组成，所述豆粕、棉粕和菜粕的重量比为4︰本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：取饲料样品，加入到缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理后再经过离心处理，取离心处理后的上清液少量；所述的饲料样品为1g，缓冲溶液为5ml，步骤2中所取的上清液为0.5ml；步骤2：将上清液加入到SLE柱后，静置2～4分钟；步骤3：采用二元洗脱剂对SLE柱洗脱至少两次，每次洗脱时所用的洗脱剂为0.5ml，接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺的洗脱液；其中，所述的缓冲溶液为：Ph范围为8.0～10.0的氨水‑氯化铵缓冲液，所述的二元洗脱剂为异丁醇和乙酸甲酯的混合物，其中异丁醇和乙酸甲酯的重量比为0.5～1:1。

【技术特征摘要】
1.一种采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：取饲料样品，加入到缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理后再经过离心处
理，取离心处理后的上清液少量；所述的饲料样品为1g，缓冲溶液为5ml，步骤2中所取
的上清液为0.5ml；
步骤2：将上清液加入到SLE柱后，静置2～4分钟；
步骤3：采用二元洗脱剂对SLE柱洗脱至少两次，每次洗脱时所用的洗脱剂为0.5ml，
接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺的洗脱液；
其中，所述的缓冲溶液为：Ph范围为8.0～10.0的氨水-氯化铵缓冲液，所述的二元
洗脱剂为异丁醇和乙酸甲酯的混合物，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈学松，张云平，赖秀梅，陈启钊，郭振旺，
申请(专利权)人：广西壮族自治区梧州食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：广西;45