一种提高土人参发芽率的实验方法技术

本发明专利技术提供了一种提高土人参发芽率的实验方法。本发明专利技术包括：A不同培养基配方影响的实验步骤：1对外植体表面消毒；2采用培养条件光照强度2000lx，12h/d，温度为25℃准备培养；3采用正交设计法对外植体进行培养实验；4记录每种试剂配比方案的出芽结果，挑选出最优结果的试剂配比方案，作为最佳培养基配方结论；B不同温度影响的实验步骤：1外植体准备工作；2培养皿准备工作；3将种子均匀放在培养皿中的滤纸上，培养期间保持滤纸湿润，一但滤纸发黄，应及时更换新滤纸；4将盛有种子的培养皿放置于不同环境的场地内；5每天记录每种温度环境下的出芽结果，总结出芽规律，挑选出最优结果的温度条件，作为最佳培养温度结论。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于实验
，涉及一种针对土人参发芽的实验，特别是一种提高土 人参发芽率的实验方法。
技术介绍
土人参为马齿觅科土人参属一年生直立草本植物，又称人参菜，护兰，板叶参等。 原产南美洲，我国华南一带均有栽培或为野生。土人参性味归经：甘，平；另外，《滇南本草》 记录土人参药性："甘，寒"；《南宁市药物志》："甘，平，无毒。"入脾、肺二经。其主要功能是 补中益气、润肺生津、治脾虚劳倦、止咳、泄泻，肺劳咳痰带血，眩晕潮热，盗汗自汗。根和种 子入药可用于气虚乏力、体虚发汗、肺燥咳嗽、月经不调，带下；叶入药可通乳汁、消肿痛。其 顶端嫩芽是常食用的野菜，具有很高的营养价值和一定的药用功效。 现有的种子萌发和幼苗生长的方法存在出芽率低，培育方式不科学等问题，由此 急需进行科学性的研宄实验，以获得更优的萌芽培育方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有的技术存在上述问题，提出了一种利用正交设计法，以 使外植体在不同试剂配方及温度环境中形成出芽比较，以便总结出最佳出芽方案的提高土 人参发芽率的实验方法。 本专利技术的目的可通过下列技术方案来实现：， 包括以下步骤： A、不同培养基配方影响的实验步骤： 1、对外植体进行表面消毒： 1)、取外植体的种子、嫩茎或叶片，在超净工作台以无菌水洗干净后； 2)、外植体用体积分数为75%的乙醇浸泡30s，再放入体积分数为2. 5%NaClO溶 液中浸泡15min; 3)、最后外植体用无菌水漂洗5至6次，作为诱导用材料； 2、将消毒后的外植体放入培养基（MS)中，采用培养条件光照强度为20001x，12h/ d，培养温度为25°C准备培养； 3、采用正交设计法对外植体进行如下培养实验： 1)、取一单位培养基（MS)不添加任何培养试剂作为对照标本； 2)、采用6 -苄基腺嘌呤（6-BA)与a-萘乙酸（NAA)两种试剂相混合配制，对不 同单位培养基（MS)添加不同配比方案形成正交实验； 3)、每单位培养基（MS)中接种10粒外植体，每种配比方案接种10个单位培养基 (MS)； 4、经过一段时间的培养，记录每种试剂配比方案的出芽结果，并挑选出最优结果 的试剂配比方案，作为最佳培养基配方结论；B、不同温度影响的实验步骤： 1、外植体准备工作： 先将纯净的种子用冷开水浸泡一段时间，去除漂浮在水面上的种子，取下沉的种 子做温度发芽试验； 2、培养皿准备工作： 在培养皿底部垫一干净的滤纸，该滤纸用冷开水浸湿； 3、将100粒种子均匀放在培养皿中的滤纸上，培养期间保持滤纸湿润，一但滤纸 发黄，应及时更换新滤纸，防止细菌滋生； 4、将盛有种子的培养皿放置于不同环境的场地内： 1)、培养皿放入塑料大棚里，在自然环境中进行培养，作为对照标本；2)、培养皿放入不同温度的恒温箱里，在特定环境中进行培养； 5、经过一段时间的培养，每天记录每种温度环境下的出芽结果，总结出芽规律，并 挑选出最优结果的温度条件，作为最佳培养温度结论。 本提高土人参发芽率的实验方法，A、不同培养基配方影响的实验以6 -苄基腺 嗓吟（6-BA) 0?lmg/L、0. 5mg/L、I. 0mg/L、2.Omg/L4 个浓度和a-蔡乙酸（NAA) 0?lmg/L、 0. 5mg/L、l. 0mg/L、2.Omg/L4个浓度进行配比。正交试验设计是研宄多因素多水平的又一 种设计方法，它是根据正交性从全面试验中挑选出部分有代表性的点进行试验，这些有代 表性的点具备了"均匀分散，齐整可比"的特点，正交试验设计是分式析因设计的主要方法， 是一种高效率、快速、经济的实验设计方法。正交试验设计法具体就是使用已经造好了的表 格一正交表L16 (45)-来安排试验并进行数据分析的一种方法。B、不同温度影响的实验中将种子放在塑料大棚里，温度5~31°C;自然散射光，光 照强度0~132001x之间。将种子放在22. 5°C恒温箱，光照20001x，12小时光照和12小时 黑暗交替处理。将种子放在25°C恒温箱，光照20001X，12小时光照和12小时黑暗交替处 理。将种子放在27. 5°C恒温箱，光照20001x，12小时光照和12小时黑暗交替处理。 在上述的提高土人参发芽率的实验方法中，在不同培养基配方影响的实验中，不 同试剂配比方案对外植体产生不同程度的愈伤组织诱导，该愈伤组织上分化出丛生芽，记 录每种试剂配比方案的愈伤组织诱导率，同时记录相应愈伤组织诱导率下的丛生芽效果， 挑选出最优效果的试剂配比方案，作为最佳培养基配方结论。 在上述的提高土人参发芽率的实验方法中，所述愈伤组织诱导率（％) =(产生 愈伤组织的种子数+发芽的种子数）X100%。 在上述的提高土人参发芽率的实验方法中，所述培养基（MS)的pH值为5. 4~ 6. 0,所述培养基（MS)于121°C、0.IlmPa的条件下灭菌20min。 在上述的提高土人参发芽率的实验方法中，所述正交设计法使用正交表L16(45)进 行数据的填写记录。将正交试验选择的水平组合列成表格，称为正交表。 在上述的提高土人参发芽率的实验方法中，在不同温度影响的实验中恒温环境采 用无菌培养，以使发芽率高且发芽整齐。 在上述的提高土人参发芽率的实验方法中，在不同温度影响的实验中将种子跟细 河沙均匀混合，以使播种方便。 与现有技术相比，本提高土人参发芽率的实验方法利用正交设计法，以使外植体 在不同试剂配方中形成出芽比较，同时研宄在不同试剂配方中愈伤组织诱导率对出芽的影 响，还在不同温度环境中形成出芽比较，以便总结出试剂配方、愈伤组织诱导率及温度三者 配合的最佳出芽方案。【具体实施方式】 以下是本专利技术的具体实施例，对本专利技术的技术方案作进一步的描述，但本专利技术并当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提高土人参发芽率的实验方法，其特征在于，包括以下步骤：A、不同培养基配方影响的实验步骤：1、对外植体进行表面消毒：1)、取外植体的种子、嫩茎或叶片，在超净工作台以无菌水洗干净后；2)、外植体用体积分数为75％的乙醇浸泡30s，再放入体积分数为2.5％NaClO溶液中浸泡15min；3)、最后外植体用无菌水漂洗5至6次，作为诱导用材料；2、将消毒后的外植体放入培养基中，采用培养条件光照强度为2000lx，12h/d，培养温度为25℃准备培养；3、采用正交设计法对外植体进行如下培养实验：1)、取一单位培养基不添加任何培养试剂作为对照标本；2)、采用6－苄基腺嘌呤与α－萘乙酸两种试剂相混合配制，对不同单位培养基添加不同配比方案形成正交实验；3)、每单位培养基中接种10粒外植体，每种配比方案接种10个单位培养基；4、经过一段时间的培养，记录每种试剂配比方案的出芽结果，并挑选出最优结果的试剂配比方案，作为最佳培养基配方结论；B、不同温度影响的实验步骤：1、外植体准备工作：先将纯净的种子用冷开水浸泡一段时间，去除漂浮在水面上的种子，取下沉的种子做温度发芽试验；2、培养皿准备工作：在培养皿底部垫一干净的滤纸，该滤纸用冷开水浸湿；3、将100粒种子均匀放在培养皿中的滤纸上，培养期间保持滤纸湿润，一但滤纸发黄，应及时更换新滤纸，防止细菌滋生；4、将盛有种子的培养皿放置于不同环境的场地内：1)、培养皿放入塑料大棚里，在自然环境中进行培养，作为对照标本；2)、培养皿放入不同温度的恒温箱里，在特定环境中进行培养；5、经过一段时间的培养，每天记录每种温度环境下的出芽结果，总结出芽规律，并挑选出最优结果的温度条件，作为最佳培养温度结论。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王钢，沈海琦，王玲，张洁慧，张妮，
申请(专利权)人：嘉兴职业技术学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33