一种豆干中二乙基黄的快速提取和检测方法技术

本发明专利技术公开了一种豆干中二乙基黄的快速提取和检测方法，涉及食品检测技术领域。包括下述步骤：确定二乙基黄特征拉曼峰990±3cm-1；绘制二乙基黄标准曲线；称取豆干，与硅藻土混合后加入到装有纤维素膜的萃取池中，空余体积用Ottawa沙子填满，以体积浓度75-85%乙腈水溶液为萃取剂，用ASE提取二乙基黄；再蒸发浓缩萃取液至干，加乙腈溶解，离心，量取上清液，加氯化钠溶液，振荡、离心，上层清液为待测样品溶液；取待测样品溶液加金纳米溶胶和无机盐凝聚剂，摇匀，用拉曼光谱仪检测得样品拉曼光谱图；定性定量测定。本发明专利技术具有提取速度快，提取充分；操作简单；检测准确、快速、无损、成本低的特点，可有效辨别问题食品。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及食品检测

技术介绍
豆干是用大豆掺以其他原料做成的一类食品，制作工序一般包括：磨浆、除渣、煮 浆、配膏、试粉、掺膏粉、拌和定卤、包块、压块、煮熟，有的煮熟后还用栀子黄上色。一些不 法分子使用劣质的黄豆生产豆干，这样生产出来的豆干在口感和色觉上与正常豆干相差甚 远，这时厂家为了增加其卖相和口感，便使用非法添加剂和廉价的非食用色素(如二乙基 黄）等。近日新闻报道，台湾多家豆制品加工厂商生产的豆干类产品被检出含有二乙基黄。 二乙基黄是一种黄色粉末，主要用于石蜡、聚氯乙烯、石油和肥皂的着色，也用作酸碱指示 剂、非水溶液滴定用指示剂及胃液中游离盐酸的测定，吞食有毒，报道有致癌后果，可能有 不可逆后果的危险。由于二乙基黄属油溶性、着色能力强，只要添加少量就能像变魔术般， 让豆干等豆制品卖相好、口感佳，所以被商贩违法添加，给消费者带来潜在的危害和巨大的 风险，严重危害了消费者的身体健康。 目前，尚无豆干中二乙基黄的国标检测方法，国内外文献中报道食品中检测二乙 基黄的方法主要是高效液相色谱检测方法，但液相色谱仪价格昂贵，前处理和仪器操作过 程复杂、费时(大约需要2-3小时）等缺点。 拉曼光谱1928年被发现，1930年获得诺贝尔物理学奖，它普遍存在于一切分子 中，能够可靠地提供分子的结构信息，不受溶剂水等影响，随着激光光源的使用，激光拉曼 光谱已经成为重要的化合物分析手段，广泛应用于刑侦鉴定、矿物质分析等领域，1974年 FleischmannM发现的表面增强拉曼散射使痕量物质检测成为可能。表面增强拉曼光谱技 术（SERS)利用痕量分子吸附于Cu、Ag、Au等金属溶胶和电极表面，其拉曼光谱信号可增强 104~106倍，克服了常规拉曼光谱法灵敏度低的缺点。近年来随着表面增强技术、傅里叶 红外技术与表面增强拉曼光谱的结合，已开始应用于食品安全检测。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供，具 有提取速度快，提取充分；操作简单；检测准确、快速、无损、成本低的特点，适用于现场应 急检测、企业自控检测和大批量样品筛查检测等，有效辨别问题食品，保护消费者权益。本 专利技术可以用于定性分析，也可以用于定量分析。 为解决上述技术问题，本专利技术所采取的技术方案是：一种豆干中二乙基黄的快速 提取和检测方法，包括下述步骤： (1) 确定二乙基黄特征拉曼峰jgOcnT1 ±301^为二乙基黄特征拉曼峰； (2) 绘制二乙基黄标准曲线； (3) ASE对待测样品中二乙基黄的提取及待测样品溶液的制备：准确称取1. 0-2. 0g捣 碎的待测豆干，与2-4g硅藻土完全混合；将样品混合物加入到已装有纤维素膜的不锈钢萃 取池中，空余的体积用Ottawa沙子填满，然后旋上萃取池盖；以体积浓度为75%-85%的乙腈 水溶液为萃取剂，用ASE提取待测样品中的二乙基黄，得到萃取液；再旋转蒸发浓缩萃取液 至干，加入5mL乙腈溶解残渣，转移至离心管中离心，之后准确量取上清液，在上清液中加 入氯化钠溶液，振荡、离心，上层清液即为待测样品溶液； (4) 取待测样品溶液，加入纳米增强试剂和无机盐凝聚剂，摇匀后，用激光拉曼光谱仪 检测，得到样品的拉曼光谱图；所述纳米增强试剂为金纳米溶胶； (5) 定性测定：当ggOcnTiiScnT1处存在明显特征拉曼峰时，豆干中含有二乙基黄； (6) 定量测定：对样品的拉曼光谱图进行基线调整；以ggOcnTiiScnT1处的特征拉曼峰 作为定量基准峰，对二乙基黄特征拉曼峰进行归一化处理；归一化后得到的二乙基黄特征 拉曼峰强度根据二乙基黄标准曲线进行定量评估，通过下式计算出样品豆干中二乙基黄的 含量X :【主权项】1. ，其特征在于，包括下述步骤： (1) 确定二乙基黄特征拉曼峰jgOcnT1 ±301^为二乙基黄特征拉曼峰； (2) 绘制二乙基黄标准曲线； (3) ASE对待测样品中二乙基黄的提取及待测样品溶液的制备：准确称取1. 0-2.Og捣 碎的待测豆干，与2-4g硅藻土完全混合；将样品混合物加入到已装有纤维素膜的不锈钢萃 取池中，空余的体积用Ottawa沙子填满，然后旋上萃取池盖；以体积浓度为75%_85%的乙腈 水溶液为萃取剂，用ASE提取待测样品中的二乙基黄，得到萃取液；再旋转蒸发浓缩萃取液 至干，加入5mL乙腈溶解残渣，转移至离心管中离心，之后准确量取上清液，在上清液中加 入氯化钠溶液，振荡、离心，上层清液即为待测样品溶液； (4) 取待测样品溶液，加入纳米增强试剂和无机盐凝聚剂，摇匀后，用激光拉曼光谱仪 检测，得到样品的拉曼光谱图；所述纳米增强试剂为金纳米溶胶； (5) 定性测定：当ggOcnTiiScnT1处存在明显特征拉曼峰时，豆干中含有二乙基黄； (6) 定量测定：对样品的拉曼光谱图进行基线调整；以ggOcnTiiScnT1处的特征拉曼峰 作为定量基准峰，对二乙基黄特征拉曼峰进行归一化处理；归一化后得到的二乙基黄特征 拉曼峰强度根据二乙基黄标准曲线进行定量评估，通过下式计算出样品豆干中二乙基黄的 含量X:X-样品豆干中二乙基黄的含量，单位为毫克每千克； c一从二乙基黄标准曲线得到的二乙基黄含量，单位为毫克每升； V-乙腈体积，单位为毫升； m-样品豆干称量质量，单位为克。2. 根据权利要求1所述的，其特征在于， 步骤（3)中ASE设定的提取程序为：温度80°C_100°C，压强1300pSi-1500psi，用萃取剂静 态萃取5min，用池体积40%-60%的萃取剂冲洗萃取池，吹扫时间60s，循环萃取两次。3. 根据权利要求1或2所述的，其特征在 于，步骤（3)ASE对待测样品中二乙基黄的提取：准确称取1. 0-2.Og捣碎的待测豆干，与3g 硅藻土完全混合；将样品混合物加入到已装有纤维素膜的llmL不锈钢萃取池中，空余的体 积用Ottawa沙子填满，然后旋上萃取池盖；以体积浓度为80%的乙腈水溶液为萃取剂，用 ASE提取待测样品中的二乙基黄，ASE设定的提取程序为：温度80°C，压强1500psi，用萃取 剂静态萃取5min，用池体积50%的萃取剂冲洗萃取池，吹扫时间60s，循环萃取两次，得到萃 取液。4. 根据权利要求1所述的，其特征在于， 步骤（3)中得到的萃取液，在60°C下旋转蒸发浓缩至干，加入5mL乙腈溶解残渣，转移至离 心管，离心机转速10000r/min离心lmin后，准确量取0. 5mL上清液，加入0.lmL2M氯化 钠溶液，振荡30秒；10000r/min离心2min;上层清液即为待测样品溶液。5. 根据权利要求1所述的，其特征在于， 步骤（4)中所述无机盐凝聚剂为氯化钠溶液或氯化钾溶液。6. 根据权利要求5所述的，其特征在于， 步骤（4)中待测样品溶液的用量为0. 02mL，纳米增强试剂的用量为0. 50mL，无机盐凝聚剂 的用量为〇. 10mL，其中无机盐凝聚剂为质量浓度为1%的氯化钠溶液或质量浓度为1%的氯 化钾溶液。【专利摘要】本专利技术公开了，涉及食品检测
包括下述步骤：确定二乙基黄特征拉曼峰990±3cm-1；绘制二乙基黄标准曲线；称取豆干，与硅藻土混合后加入到装有纤维素膜的萃取池中，空余体积用Ottawa沙子本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种豆干中二乙基黄的快速提取和检测方法，其特征在于，包括下述步骤：（1）确定二乙基黄特征拉曼峰：990cm‑1±3cm‑1为二乙基黄特征拉曼峰；（2）绘制二乙基黄标准曲线；（3）ASE对待测样品中二乙基黄的提取及待测样品溶液的制备：准确称取1.0‑2.0g捣碎的待测豆干，与2‑4g硅藻土完全混合；将样品混合物加入到已装有纤维素膜的不锈钢萃取池中，空余的体积用Ottawa沙子填满，然后旋上萃取池盖；以体积浓度为75%‑85%的乙腈水溶液为萃取剂，用ASE提取待测样品中的二乙基黄，得到萃取液；再旋转蒸发浓缩萃取液至干，加入5mL乙腈溶解残渣，转移至离心管中离心，之后准确量取上清液，在上清液中加入氯化钠溶液，振荡、离心，上层清液即为待测样品溶液；（4）取待测样品溶液，加入纳米增强试剂和无机盐凝聚剂，摇匀后，用激光拉曼光谱仪检测，得到样品的拉曼光谱图；所述纳米增强试剂为金纳米溶胶；（5）定性测定：当990cm‑1±3cm‑1处存在明显特征拉曼峰时，豆干中含有二乙基黄；（6）定量测定：对样品的拉曼光谱图进行基线调整；以990cm‑1±3cm‑1处的特征拉曼峰作为定量基准峰，对二乙基黄特征拉曼峰进行归一化处理；归一化后得到的二乙基黄特征拉曼峰强度根据二乙基黄标准曲线进行定量评估，通过下式计算出样品豆干中二乙基黄的含量X：X—样品豆干中二乙基黄的含量，单位为毫克每千克；c—从二乙基黄标准曲线得到的二乙基黄含量，单位为毫克每升；V—乙腈体积，单位为毫升；m—样品豆干称量质量，单位为克。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李挥，蔡立鹏，张岩，张丽冰，闫正，任孟伟，李霏，盖丽娜，刘连太，张永辉，
申请(专利权)人：河北省食品检验研究院，河北大学，
类型：发明
国别省市：河北;13