一种基于金核-银卫星手性组装体的赭曲霉毒素A的超灵敏检测方法技术

一种基于金核-银卫星手性组装体的赭曲霉毒素A的超灵敏检测方法，属于分析化学领域。本发明专利技术主要工艺步骤为：（1）35nm粒径的金纳米粒子的合成，（2）8nm粒径的银纳米粒子的合成，（3）金纳米粒子上适配体的修饰，（4）银纳米粒子上适配体部分互补序列的修饰，（5）金核银卫星结构的组装，（6）圆二色谱检测，建立金银手性信号叠加与赭曲霉毒素A的浓度的标准曲线。本发明专利技术提供了一种用金核银卫星结构的手性信号检测赭曲霉毒素A的方法，与传统检测方法相比成本低，灵敏度高，方便快捷，具有很好的实际应用前景。

【技术实现步骤摘要】
—种基于金核-银卫星手性组装体的赭曲霉毒素A的超灵敏检测方法
本专利技术涉及一种基于金核-银卫星手性结构组装的赭曲霉毒素A的超灵敏检测方法，属于分析化学领域。
技术介绍
赫曲霉毒素A由抚抱青霉囷株、广紫青霉囷、圆弧青霉囷株广生，在霉变谷物、词料等最常见。动物摄入霉变的饲料后，肉制品中就可能含这种毒素。赭曲霉毒素A主要对动物肝脏与肾脏有很强的毒害作用，可以引起肾脏损伤。大量的毒素也可能引起动物的肠黏膜炎症和坏死。动物试验中观察到它还存在致畸作用。 传统的赭曲霉毒素A (OTA)的检测方法主要基于仪器，如液质联用、高效液相色谱等，检测成本很高，并且对操作人员的操作技能有很高的要求。酶联免疫检测则对单克隆抗体的要求很高，而单抗的制备和筛选是一项繁重且高耗的任务。电化学和荧光等新型检测方法也逐渐被人们开发出来。电化学对样品的基质要求较高，而荧光检测需要昂贵的荧光素来制备荧光探针。所以，本专利技术提出了一种新型的、简便的、灵敏的检测方法，其基于纳米材料的自组装技术构建了具有强手性的金核银卫星纳米结构，并以此作为检测基底。 通过DNA杂交将大粒径的金纳米粒子和小粒径的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于金核‑银卫星手性组装体的赭曲霉毒素A的检测方法：（一）检测传感器的构建（1）金纳米粒子上修饰适配体OTA‑aptamer35 nm 粒径的金纳米粒子采用13 nm的金种子生长合成；35 nm 粒径的金纳米粒子离心浓缩10倍后用10mM pH7.2的磷酸盐缓冲液重悬，加入巯基化的OTA‑aptamer使得终浓度为5μM；DNA与金纳米粒子的摩尔比为300︰1，室温孵育2h后加NaCl至50mM，之后每隔1h加一次NaCl，至NaCl终浓度300mM；溶液老化24h后离心3次去除未结合的DNA，10mM Tris‑HCl重悬待用；OTA‑aptamer： 5’‑SH‑TTTTTTTTTT ...

【技术特征摘要】
1.一种基于金核-银卫星手性组装体的赭曲霉毒素A的检测方法: (一)检测传感器的构建 (1)金纳米粒子上修饰适配体OTA-aptamer . 35 nm粒径的金纳米粒子采用13 nm的金种子生长合成；35 nm粒径的金纳米粒子离心浓缩10倍后用1mM pH7.2的磷酸盐缓冲液重悬，加入巯基化的OTA-aptamer使得终浓度为5yM;DNA与金纳米粒子的摩尔比为300: 1，室温孵育2h后加NaCl至50mM，之后每隔Ih加一次NaCl，至NaCl终浓度300mM ;溶液老化24h后离心3次去除未结合的DNA，1mMTris-HCl重悬待用；OTA-aptamer: 5’ -SH-TTTTTTTTTT GATCGGGTGT GGGTGGCGTA AAGGGAGCAT CGG-3’ ； (2)银纳米粒子上修饰适配体部分互补序列OTA-C 采用硼氢化钠还原硝酸银的方法合成粒径为8nm的银纳米粒子；银纳米粒子离心浓缩10倍用1mM pH8的Tris-HCl重悬，加入OTA的巯...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐丽广，赵雪利，胥传来，匡华，马伟，刘丽强，宋珊珊，吴晓玲，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32