本发明专利技术是在加拿大深度抽吸条件下，采用超高效液相色谱-串联质谱联用法测定烟草特有亚硝胺（简称TSNAs），属于一种烟草特有亚硝胺检测方法。本方法是在加拿大深度抽吸条件下抽吸卷烟后，往捕集卷烟烟气总粒相物的滤片中加入含内标物的乙酸铵水溶液，超声提取后，取1~2mL萃取液过0.22微米的有机滤膜，用UPLC-MS/MS仪分析TSNAs，根据组分峰和同位素内标物峰的面积比定量。本发明专利技术的检测方法可用于加拿大深度抽吸条件下检测烤烟型和混合型卷烟主流烟气中的TSNAs，具有前处理简单、定量准确、仪器分析速度快、检出限低、样品处理通量高等优点。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术是在加拿大深度抽吸条件下，采用超高效液相色谱-串联质谱联用法测定烟草特有亚硝胺（简称TSNAs），属于一种烟草特有亚硝胺检测方法。本方法是在加拿大深度抽吸条件下抽吸卷烟后，往捕集卷烟烟气总粒相物的滤片中加入含内标物的乙酸铵水溶液，超声提取后，取1~2mL萃取液过0.22微米的有机滤膜，用UPLC-MS/MS仪分析TSNAs，根据组分峰和同位素内标物峰的面积比定量。本专利技术的检测方法可用于加拿大深度抽吸条件下检测烤烟型和混合型卷烟主流烟气中的TSNAs，具有前处理简单、定量准确、仪器分析速度快、检出限低、样品处理通量高等优点。【专利说明】
本专利技术属于分析化学
，涉及一种简单高效灵敏的烟草特有亚硝胺检测方 法，具体涉及。
技术介绍
烟草特有亚硝胺（TSNAs)是烟草中N-亚硝胺含量最丰富的一类亚硝胺物质，只存 在于烟草、烟草制品和卷烟烟气中，TSNAs的含量对正确评价吸烟对健康的危害具有重要意 义。国际癌症研究署（IARC)对加拿大政府名单中有害成分的毒性评价结果表明，4-(N-甲 基-N-亚硝胺）-1- (3-吡啶基）-丁酮（NNK)和N-亚硝基去甲基烟碱（NNN)纯化学成分为 可疑的人体致癌成分。为了减少烟草特有亚硝胺对吸烟者和被动吸烟者健康可能的伤害， 控制它们在烟草及烟草制品中的含量，已成为一项重要的课题。因此，准确测定烟草及烟 草制品中的TSNAs，有助于为正确评价吸烟对健康的危害、推动低危害卷烟的研发提供可靠 的依据。目前研究较为深入的TSNAs是N-亚硝基去甲基烟碱（NNN)、N-亚硝基假木贼碱 (NAB)、N-亚硝基新烟草碱（NAT)和4- (N-甲基-N-亚硝胺）-1- (3-吡啶基）-丁酮（NNK)。 气相色谱法1973年就被应用于烟草特有亚硝胺的分析，目前使用的TSNAs测试方 法主要依据GB/T23228-2008规定的GC-TEA法，该方法规定了卷烟主流烟气总粒相物中烟 草特有亚硝胺的测定。其主要特点是每个样品需要捕集20支卷烟的总粒相物，分3次萃取， 装填活化的碱性氧化铝柱，每个样品分析时间近30min，每日进样量不能超过8个。因此，存 在前处理复杂、溶剂消耗量大、分析时间长、TEA检测器不能区分TSNAs和共流出的亚硝胺 类化合物、死体积大、检出限高等问题，不适于大批量样品的准确测试。 毛友安等在中国专利文献CN1616962A中提到一种液相色谱-串联质谱检测烟草 特有亚硝胺的方法。该方法的主要特点是捕集20支卷烟的总粒相物，使用三甲基 13C3标记 咔啡因作内标，用柠檬酸-磷酸盐缓冲溶液和环己烷对滤片振荡共提取，N2保护下浓缩有 机相提取液，加盐酸酸化，相分离后往水相加碱溶液中和，将水相过反相键合固相萃取柱， 最后浓缩。该方法因采用三甲基 13C3标记咔啡因作内标，故对检测的目标化合物选择性不 强；有机相和水相萃取溶剂各需30mL，溶剂消耗大；用有机相和水相振荡共提取，反萃过程 的泡沫形成会引起损失和误差；盐酸酸化、氢氧化钠中和、相分离、浓缩等导致前处理复杂； 每个样品分析时间近30min，每日进样量受到限制。 用机器抽吸测试烟气释放量始于20世纪30年代，1936年Bradford首次提出 35mL/puff的抽吸容量。1969年，在德国标准局（DIN)的倡议下成立了烟草及烟草制品国 际标准化组织，该组织最早开展的工作之一就是建议使用"抽吸容量为35mL，抽吸持续时间 为2s，抽吸频率为lmin"的抽吸参数。 1988年，ISO提议制定全球统一的抽吸模式，并委托C0RESTA开展必要的研究。 C0RESTA先后开展了一系列全面的研究，并于1991提出了 ISO模式修订。目前世界各国广 泛使用的IS04387:2000是IS04387:1991的修订版本，是各地区和国家制定相关政策和法 规的基础，但也有个别国家和地区使用其它抽吸模式，比加拿大抽吸模式，具体参数见表1。 表1 ISO和加拿大抽吸模式参数 【权利要求】1. 一种加拿大深度抽吸条件下烟草特有亚硝胺检测方法，其特征在于包括以下的步 骤： 步骤（1)，用1张剑桥滤片收集2~3支样品卷烟主流烟气总粒相物； 步骤（2)，将步骤（1)得到的的滤片放入50mL锥形瓶中，加入l(Tl5mL含内标的 0. 1、. 2mol/L的乙酸铵水溶液，然后在温度3(T40°C、功率3(T40W的条件下，超声萃取 25?30min，再静置5?7min，得到萃取液； 步骤（3)，将步骤（2)得到的萃取液过0. 22 μ m的有机滤膜，滤液进入液相色谱-串联 质谱联用仪，选择离子扫描检测，同位素内标法定量。2. 根据权利要求1所述的加拿大深度抽吸条件下烟草特有亚硝胺检测方法，其特征在 于步骤（3)中的液相色谱条件如下： 色谱柱：C18柱，1. 7 μ m，2. 1 X 100mm ;流动相A :甲醇；流动相B :0· 1?0· 2%的v/v甲酸 水溶液；流速：〇. 2?0. 4mL/min ;柱温：5(T60° C ;进样量：4?6 μ L ; 洗脱程序如下：根据权利要求1所述的加拿大深度抽吸条件下烟草特有亚硝胺检测方法，其特征在于 步骤（3)中的质谱条件如下： 离子化模式：电喷雾；扫描模式：正离子；喷雾电压：450(T5500V;离子源温度： 550?650°C ;Gasl:50MPa ;Gas2 :70MPa ;DP :35V。3. 根据权利要求1所述的烟草特有亚硝胺检测方法，其特征在于步骤（3)中的质谱检 测参数如下：根据权利要求1所述的加拿大深度抽吸条件下烟草特有亚硝胺检测方法，其特征在 于：所述的样品卷烟的类型为烤烟型或混合型。4. 根据权利要求1所述的加拿大深度抽吸条件下烟草特有亚硝胺检测方法，其特征在 于：所述的样品卷烟是经过在温度22°C ± 1°C和相对湿度60±2%条件下平衡48h处理的。【文档编号】G01N30/88GK104122357SQ201410348978【公开日】2014年10月29日 申请日期:2014年7月22日 优先权日:2014年7月22日 【专利技术者】张凤梅, 朱瑞芝, 司晓喜, 何沛, 张涛, 刘春波, 向能军, 申钦鹏, 王昆淼, 杨光宇, 刘志华 申请人:云南中烟工业有限责任公司本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种加拿大深度抽吸条件下烟草特有亚硝胺检测方法，其特征在于包括以下的步骤：步骤（1），用1张剑桥滤片收集2~3支样品卷烟主流烟气总粒相物；步骤（2），将步骤（1）得到的的滤片放入50mL锥形瓶中，加入10~15mL含内标的0.1~0.2mol/L的乙酸铵水溶液，然后在温度30~40℃、功率30~40W的条件下，超声萃取25~30min，再静置5~7min，得到萃取液；步骤（3），将步骤（2）得到的萃取液过0.22μm的有机滤膜，滤液进入液相色谱‑串联质谱联用仪，选择离子扫描检测，同位素内标法定量。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张凤梅，朱瑞芝，司晓喜，何沛，张涛，刘春波，向能军，申钦鹏，王昆淼，杨光宇，刘志华，
申请(专利权)人：云南中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：云南;53
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。