一种转移因子溶液及其制备方法技术

本发明专利技术属于生物制药技术领域，具体的说是一种转移因子溶液及其制备方法。具体，动物脾脏与NaCl溶液按重量比为1∶1.3-1.4的混合经反复冻融后调节pH值至6.2～7.2，再经过滤，即为转移因子溶液。采用本发明专利技术方法利于提高转移因子溶液有效成分的含量、提高产品收率、增加药物的稳定性和安全性。

【技术实现步骤摘要】
一种转移因子溶液及其制备方法
本专利技术属于生物制药
，具体的说是一种转移因子溶液及其制备方法。
技术介绍
转移因子溶液是一种天然双向免疫调节剂，是目前治疗免疫功能低下、缺陷等相关疾病的理想药物。转移因子溶液系用健康猪或牛脾脏为原料，经去脂肪、细胞破碎、透析或超滤制成的分子量小于6000道尔顿的多肽、氨基酸和多核苷酸混合物的溶液。但，现有技术制得的转移因子溶液中多肽、游离氨基酸、核苷酸的含量较低，高分子物质含量相对较高，转移因子溶液的收率较低。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种转移因子溶液及其制备方法。为实现上述目的，本专利技术采用技术方案为：一种转移因子溶液，动物脾脏与NaCl溶液按重量比为1:1.3-1.4的混合经反复冻融后调节PH值至6.2～7.2，再经过滤，即为转移因子溶液。进一步的说，动物脾脏与NaCl溶液按重量比为1:1.3-1.4的混合，混合后磨匀获得的匀浆液经反复冻融处理4-6次，冻融后用HCL溶液，调匀浆液PH值3.5～4.5，而后离心收集上清液，上清液再经NaOH溶液调节PH值至6.2～7.2，最后过滤，即得转移因子溶液。所述反复冻融处理是将匀浆液在-25±3℃冷冻48-56小时，而后在20-25℃的循环水中融化，作为一次冻融处理，按照此冻融条件反复冻融3-4次；而后再以下述另一冻融条件反复冻融1-2次，另一冻融条件为将匀浆液在-25±3℃冷冻12-18小时，而后在20-25℃的循环水中融化。所述动物脾脏为猪或牛的脾脏。所述动物脾脏与NaCl溶液按重量比为1:1.3-1.4的混合，混合后加入胶体磨机中磨1～2分钟，即得匀浆液；其中，胶体磨的缝隙5～10um。一种转移因子溶液的制备方法，动物脾脏与NaCl溶液按重量比为1:1.3-1.4的混合经反复冻融后调节PH值至6.2～7.2，再经过滤，即为转移因子溶液。进一步的说，动物脾脏与NaCl溶液按重量比为1:1.3-1.4的混合，混合后磨匀获得的匀浆液经反复冻融处理5-6次，冻融后用HCL溶液，调匀浆液PH值3.5～4.5，而后离心收集上清液，上清液再经NaOH溶液调节PH值至6.2～7.2，最后过滤，即得转移因子溶液。所述反复冻融处理是将匀浆液在-25±3℃冷冻48-56小时，而后在20-25℃的循环水中融化，作为一次冻融处理，按照此冻融条件反复冻融3-4次；而后再以下述另一冻融条件反复冻融2-3次，另一冻融条件为将匀浆液在-25±3℃冷冻12-18小时，而后在20-25℃的循环水中融化。所述动物脾脏与NaCl溶液按重量比为1:1.3-1.4的混合，混合后加入胶体磨机中磨1～2分钟，即得匀浆液；其中，胶体磨的缝隙5～10um。所述PH值3.5～4.5的匀浆液在2000-2500转/分钟的速度离心20-30分钟，收集上清液，上清液再经NaOH溶液调节PH值至6.2～7.2，调节PH值后过滤，过滤后滤液再经中空纤维柱超滤滤液即得转移因子溶液；其中，中空纤维柱超滤压力控制在0.1-0.2Mpa。本专利技术所具有的优点：本专利技术所获得的转移因子溶液有效成分的含量高，主要技术指标多肽：≥6mg/ml，核苷酸：≥170μg/ml(以D－核糖计)，高于标准的2倍。高分子物质低于3％(标准为5％)。同时采用本专利技术方法利于提高转移因子溶液有效成分的含量、提高产品收率、增加药物的稳定性和安全性。附图说明图1为本专利技术实施例提供的工艺流程图。具体实施方式实施例1转移因子溶液的制备方法(参见图1)：将融化后的猪脾脏用纯化水冲洗，去除脂肪，剪去结缔组织，置入绞肉机内绞碎，绞碎(2-3mm)后待用。绞碎后脾脏与0.9％NaCl(W/V)(W/V，质量体积比)溶液按重量比为1:1.3的混合，混合后加入至胶体磨机中磨1～2分钟，即得匀浆液，其中，胶体磨的缝隙5～10um。匀浆液经反复冻融处理5次，冻融后用2mol/L的HCL溶液调匀浆液PH值4.0，而后以2000转/分钟的速度离心30分钟，收集上清液，上清液再经2mol/L的NaOH溶液调节PH值至7.0，调节PH值后过滤，过滤后滤液再经中空纤维柱超滤，滤液即得转移因子溶液，所得转移因子溶液分装，送入-25±3℃低温冷冻保存。其中，中空纤维柱超滤压力控制在0.1-0.2Mpa。所述反复冻融处理是将匀浆液在-25±3℃冷冻48小时，而后在20℃的循环水中融化，作为一次冻融处理，按照此冻融条件反复冻融4次；而后再以下述另一冻融条件反复冻融1次，另一冻融条件为将匀浆液在-25±3℃冷冻18小时，而后在20℃的循环水中融化。通过上述制备所得的转移因子溶液有效成分的含量高，主要技术指标多肽：≥6mg/ml，核苷酸：≥170μg/ml(以D－核糖计)，高于标准(标准为多肽：≥1.5mg/ml，核苷酸(以D－核糖计)：≥50μg/ml)的3倍以上。高分子物质低于3％(标准为不得过5％)。细胞活力测定玫瑰花结百分率≥15％(标准为玫瑰花结百分率≥10％)；每毫升含游离氨基酸的量大于2.5mg(标准规定不得少于2mg)。实施例2转移因子溶液的制备方法(参见图1)：将融化后的猪脾脏用纯化水冲洗，去除脂肪，剪去结缔组织，置入绞肉机内绞碎，绞碎后待用。绞碎后脾脏与0.9％NaCl溶液按重量比为1:1.4的混合，混合后加入至胶体磨机中磨1～2分钟，即得匀浆液。其中，胶体磨的缝隙5～10um。匀浆液经反复冻融处理5次，冻融后用2mol/L的HCL溶液调匀浆液PH值4.0，而后以2500转/分钟的速度离心20分钟，收集上清液，上清液再经2mol/L的NaOH溶液调节PH值至7.0，调节PH值后过滤，过滤后滤液再经中空纤维柱超滤(压力控制在0.1-0.2Mpa)，滤液即得转移因子溶液，所得转移因子溶液分装，送入-25±3℃低温冷冻保存。其中，中空纤维柱超滤压力控制在0.1-0.2Mpa。所述反复冻融处理是将匀浆液在-25±3℃冷冻56小时，而后在25℃的循环水中融化，作为一次冻融处理，按照此冻融条件反复冻融3次；而后再以下述另一冻融条件反复冻融2次，另一冻融条件为将匀浆液在-25±3℃冷冻12小时，而后在25℃的循环水中融化。通过上述制备所得的转移因子溶液有效成分的含量高，主要技术指标多肽：≥6mg/ml，核苷酸：≥170μg/ml(以D－核糖计)，高于标准(标准为多肽：≥1.5mg/ml，核苷酸(以D－核糖计)：≥50μg/ml)的3倍以上。高分子物质低于3％(标准为不得过5％)。细胞活力测定玫瑰花结百分率≥15％(标准为玫瑰花结百分率≥10％)；每毫升含游离氨基酸的量大于2.5mg(标准规定不得少于2mg)。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种转移因子溶液，其特征在于：动物脾脏与NaCl溶液按重量比为1:1.3‑1.4的混合经反复冻融后调节PH值至6.2～7.2，再经过滤，即为转移因子溶液。

【技术特征摘要】
1.一种转移因子溶液，其特征在于：动物脾脏与NaCl溶液按重量比为1:1.3-1.4的混合，混合后磨匀，获得的匀浆液经反复冻融处理4-6次，冻融后用HCl溶液，调匀浆液pH值3.5～4.5，而后离心收集上清液，上清液再经NaOH溶液调节pH值至6.2～7.2，最后过滤，即得转移因子溶液；所述反复冻融处理是将匀浆液在-25±3℃冷冻48-56小时，而后在20-25℃的循环水中融化，作为一次冻融处理，按照此冻融条件反复冻融3-4次；而后再以下述另一冻融条件反复冻融1-2次，另一冻融条件为将匀浆液在-25±3℃冷冻12-18小时，而后在20-25℃的循环水中融化。2.按权利要求1所述的转移因子溶液，其特征在于：所述动物脾脏为猪或牛的脾脏。3.按权利要求1所述的转移因子溶液，其特征在于：所述动物脾脏与NaCl溶液按重量比为1:1.3-1.4的混合，混合后加入胶体磨机中磨1～2分钟，即得匀浆液。4.一种权利要求1所述的转移因子溶液的制备方法，其特征在于：动物脾脏与NaCl溶液按重量比为1:1.3-1.4...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾天亮，郑桂荣，梁爱葵，
申请(专利权)人：辽宁天医生物制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁;21