微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条及其制备方法和用途，其特征在于：包括底板，在底板上方从左端到右端依次设有样品吸收垫、结合垫、层析膜和吸水纸，所述样品吸收垫的右端压贴住结合垫的左端，结合垫的右端压贴住层析膜的左端，所述吸水纸的左端压贴住层析膜的右端，构成侧向层析检测结构；所述层析膜上从左到右制备有检测线和质控线；结合垫由聚酯纤维膜和设置在该聚酯纤维膜上标记了不同配体的多种荧光微球构成，层析膜由硝酸纤维膜及设置在该硝酸纤维膜上包含可特异结合靶标物质的不同配体的多条检测线构成。本发明专利技术可以同时对多种微量标靶物质进行多重联检，各显示结果之间无交叉反应，相互独立，显著提高了检测的灵敏度和准确性，操作快速简便，在生物检测、疾病的早期诊断和治疗有着重要的意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，适用于微量靶标物质的荧光检测。属于生物检测
。
技术介绍
目前在微量靶标物质检测中，常用到高效液相色谱法、化学发光法、酶联免疫分析及侧向和渗滤层析等方法。其中，高效液相色谱法、化学发光法及酶联免疫法技术虽然准确可靠，但是操作过程复杂，耗时长，需特殊设备和专业人员，不易在基层医疗机构和现场普及。而侧向层析法操作简单快速、成本低，只需肉眼检测或简单仪器便可判读结果可作为疾病或违禁添加物检测的初步筛检方法。侧向层析技术常见的标记物有胶体金、胶体硒、乳胶、明胶等，其中运用最普遍且成功的标记物是胶体金，但胶体金免疫层析法灵敏度不高，受背景影响大，尤其是在检测全血或含色素的标本时，胶体金和血液的红色背景相近，容易对结果判读造成干扰。而且，胶体金试纸条市场已经趋向成熟与饱和，国内企业总体产能已经超过全球市场需求，基础科研领域没有获得质上的突破，出现大量的同质化科研课题，多种新技术都未能成功大规模应用。另外，虽然新标记和材料技术已崭露头角，但技术应用还不够成熟，无法大规模应用，有很些技术难题还有待继续研究攻克。
技术实现思路
本专利技术的目的之一，是为了提供微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条，它利用层析和荧光检测原理，通过制成条状结构，可随时携带对样品进行检测。 本专利技术的目的之二，是为了提供微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条的制备方法。 本专利技术的目的之二，是为了提供微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条的用途。 本专利技术的目的之一可以通过以下技术方案达到: 微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条，其结构特点在于:包括底板，在底板上方从左端到右端依次设有样品吸收垫、结合垫、层析膜和吸水纸，所述样品吸收垫的右端压贴住结合垫的左端，结合垫的右端压贴住层析膜的左端，所述吸水纸的左端压贴住层析膜的右端，构成侧向层析检测结构；所述层析膜上从左到右制备有检测线和质控线；结合垫由聚酯纤维膜和设置在该聚酯纤维膜上标记了不同配体的多种荧光微球构成，层析膜由硝酸纤维膜及设置在该硝酸纤维膜上包含可特异结合靶标物质的不同配体的多条检测线构成。 本专利技术的目的之一还可以通过以下技术方案达到: 进一步地，所述检测线的数量可以大于二条；所述底板可以采用不吸水性的PVC材料制成。 进一步地，所述荧光微球的粒径为20-400nm、激发波长为350-505nm、发射波长为440_515nmo 本专利技术能经激发光源如便携式验钞笔，紫外灯等激发荧光微球后直接通过肉眼或检测仪器判读定性结果，且各显示结果之间无交叉反应，相互独立。具有结构简单、灵敏度高和使用方便的特点。 本专利技术的目的之二可以通过以下技术方案达到: 微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条的制备方法，其特征在于包括以下步骤: I)制备结合垫；将不同微量靶标物质的特异配体通过物理吸附或化学偶联的方式标记在不同荧光微球上，制备标记了不同配体的多种荧光微球，并按比例将其喷涂在聚酯纤维膜上，制得结合垫； 2)制备层析膜，将可特异结合靶标物质的不同配体喷涂到硝酸纤维膜上制成多条检测线，同时,将抗配体的抗体包被成质控线,制成层析膜； 3)按规格准备好底板、样品吸收垫和吸水纸； 4)按规格在底板上依次搭接样品吸收垫、结合垫、层析膜及吸水纸，并按规格剪切宽度，制成微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条。 本专利技术的目的之二还可以通过以下技术方案达到: 进一步地，所述检测条上的配体为同一配体或不同配体对的夹心模式，用于检测样品中的靶标物质。 进一步地，在层析过程中，若样品中含有待测靶标物质，靶标物质与荧光微球结合进行配体反应，形成“荧光微球-配体-靶标物质”三体复合物。 进一步地，层析进行到层析膜时，检测线包被的另一或同一特异性配体可捕获包含靶标物质的三体复合物，进一步形成“荧光微球-配体-靶标物质-包被配体”双配体夹心复合物。 本专利技术的目的之三可以通过以下技术方案达到: 微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条的用途，其特征在于:用于对样品的微量靶标物质的荧光检测，检测方法包括以下步骤: I)往检测条的样品吸收垫上加入待测样本，反应5_20min ； 2)通过激发光源照射层析膜表层，在质控线和检测线上的荧光微球经激发光源激发后，可直接肉眼观察或采用侧向层析荧光检测系统检测质控线和检测线上是否发出荧光条带，由此判读结果: 2-)若检测线和质控线出现荧光条带，判定为样品阳性反应； 2-2)若检测线出现荧光条带，质控线无显示，则判定为结果无效，需更换新检测条从步骤I)开始； 2-3)若检测线和质控线均无荧光条带显示，判定为结果无效，需更换新检测条从步骤I)开始。 本专利技术的目的之三还可以通过以下技术方案达到: 进一步地，所述激发光源可以为验钞笔，或紫外灯。 进一步地，所述侧向层析荧光检测系统为可以检测荧光微球发射波长的检测设备。 本专利技术具有如下突出的有益效果: 1、本专利技术基于双配体夹心模式对微量靶标物质进行多重联检，通过将不同靶标物质特异性配体分别标记在不同荧光微球上并按比例喷涂在结合垫上，再在不同检测线上包被针对不同靶标物质的(同一或另一)特异性配体，以及在质控制线上包被针对微球上标记配体的抗体，制备成微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条，在采用荧光微球提高检测灵敏度的同时，可同时对多种微量标靶物质进行联检，检测对象灵活性高，且各显示结果之间无交叉反应，相互独立，显著提高了检测的灵敏度和准确性，同时节约检测样本，实现微量样本多指标高灵敏性联合检测。 2、本专利技术检测条为体积小的条状结构，携带方便，在需要对样品进行检测时，只需往检测条的样品吸收垫上加入待测样本,反应5-20min ;经激发光源照射激发后，可直接肉眼观察或采用侧向层析荧光检测系统检测质控线和检测线是否有荧光条带出现，可对结果进行判读，操作快速简便，显示结果之间无交叉反应，准确性好，在生物检测、疾病的早期诊断和治疗有着重要的意义。 【附图说明】 图1为是本专利技术检测条的结构图。 图2是本专利技术内部结构图。 图3-图9是具体实施例1的检测结果示意图。 图10-图15是具体实施例2的检测结果示意图。 【具体实施方式】 以下结合附图及实施例对本专利技术作进一步的详细描述: 具体实施例1: 参照图1和图2，本实施例涉及的微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条，包括底板I，在底板I上方从左端到右端依次设有样品吸收垫2、结合垫3、层析膜4和吸水纸5，所述样品吸收垫2的右端压贴住结合垫3的左端，结合垫3的右端压贴住层析膜4的左端，所述吸水纸5的左端压贴住层析膜4的右端，构成侧向层析检测结构；所述层析膜4上从左到右制备有检测线4-1和质控线4-2 ;结合垫3由聚酯纤维膜和设置在该聚酯纤维膜上标记了不同配体的多种荧光微球构成，层析膜4由硝酸纤维膜及设置在该硝酸纤维膜上包含可特异结合靶标物质的不同配体的多条检测线构成。 本实施例中:所述检测线4-1的数量大于二条；所述底板I采用不吸水性的PVC材料制成。所述荧光微球的粒径为20-400nm、激发波长为350_505nm、发射波长为440_51本文档来自技高网...

【技术保护点】
微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条，其特征在于：包括底板（1），在底板（1）上方从左端到右端依次设有样品吸收垫（2）、结合垫（3）、层析膜（4）和吸水纸（5），所述样品吸收垫（2）的右端压贴住结合垫（3）的左端，结合垫（3）的右端压贴住层析膜（4）的左端，所述吸水纸（5）的左端压贴住层析膜（4）的右端，构成侧向层析检测结构；所述层析膜（4）上从左到右制备有检测线（4‑1）和质控线（4‑2）；结合垫（3）由聚酯纤维膜和设置在该聚酯纤维膜上标记了不同配体的多种荧光微球构成，层析膜（4）由硝酸纤维膜及设置在该硝酸纤维膜上包含可特异结合靶标物质的不同配体的多条检测线构成。

【技术特征摘要】
1.微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条，其特征在于:包括底板(1)，在底板(I)上方从左端到右端依次设有样品吸收垫(2)、结合垫(3)、层析膜(4)和吸水纸(5)，所述样品吸收垫(2)的右端压贴住结合垫(3)的左端，结合垫(3)的右端压贴住层析膜(4)的左端，所述吸水纸(5)的左端压贴住层析膜(4)的右端，构成侧向层析检测结构；所述层析膜(4)上从左到右制备有检测线(4-1)和质控线(4-2);结合垫(3)由聚酯纤维膜和设置在该聚酯纤维膜上标记了不同配体的多种荧光微球构成，层析膜(4)由硝酸纤维膜及设置在该硝酸纤维膜上包含可特异结合靶标物质的不同配体的多条检测线构成。2.根据权利要求1所述的微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条，其特征在于:所述检测线(4-1)的数量大于二条；所述底板(I)采用不吸水性的PVC材料制成。3.根据权利要求1或2所述的微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条，其特征在于:所述荧光微球的粒径为20-400nm、激发波长为350_505nm、发射波长为440-515nm。4.微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条的制备方法，其特征在于包括以下步骤: 1)制备结合垫；将不同微量靶标物质的特异配体通过物理吸附或化学偶联的方式标记在不同荧光微球上，制备标记了不同配体的多种荧光微球，并按比例将其喷涂在聚酯纤维膜上，制得结合垫； 2)制备层析膜，将可特异结合靶标物质的不同配体喷涂到硝酸纤维膜上制成多条检测线，同时，将抗配体的抗体包被成质控线，制成层析膜； 3)按规格准备好底板、样品吸收垫和吸水纸； 4)按规格在底板上依次搭接样品吸收垫、结合垫、层析膜及吸水纸，并按规格剪切宽度，制成微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条。5.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘庆军，刘华锋，刘伟敬，吴平，吴显劲，彭浩晟，罗辉，
申请(专利权)人：广东医学院附属医院，
类型：发明
国别省市：广东;44