【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及鸽Ⅰ型副粘病毒免疫分析
，尤其涉及检测鸽Ⅰ型副粘病毒的胶体金免疫层析试纸条及制备方法。
技术介绍
鸽I型副粘病毒（Pigeon Paramyxovirus 1, PPMV-Ⅰ） 病又称鸽瘟或鸽新城疫，是一种由禽I型副粘病毒（Avian Paramyxovirus 1, PMV-Ⅰ） 引起的、流行于鸽群的高度接触性急性传染病，PPMV-Ⅰ引起鸽群突然发病，迅速蔓延，临床症状上与鸡新城疫嗜神经速发株引起的十分类似，主要临床特点是肠炎、下痢和神经症状，尤以嗜神经速发型为多见，发病率和死亡率都很高。鸽I型副粘病毒对不同品种、不同年龄的鸽都有感染性，传播迅速，死亡率高。在自然条件下，肉鸽、信鸽和赛鸽等各类鸽子均可感染发病；而且不同年龄的鸽子都可感染，发病率可高达80%~90%以上，死亡率因鸽子的年龄、品种及其免疫状况和饲养管理状况不同而有很大差异，为20%~80%之间，平均30%~50%，乳鸽感染后，死亡率可达60%~80%，处于孵化期的种胚感染后可全部死亡。成年鸽感染后，呈慢性经过，无明显的死亡高峰，最后因采食困难、消瘦衰竭死亡。该病的发生无明显的季节性。一年四季均可发生，但多以秋冬、冬春多发。该病与新城疫一样，通过空气中的尘埃、污染的器具、饲料和饮水传播，潜伏期1~10d，一般1~6d。鸽新城疫病其传播迅速、发病率高，发病后死亡率较高，给养鸽业造成的影响和危害巨大，是养鸽业的重点防控的传染病之一。 鸽I型副粘病毒病一般通过临床症状和剖检病变可作出初步诊断，单要确诊...
【技术保护点】
检测鸽Ⅰ型副粘病毒的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于：它包括PVC胶板（1）、硝酸纤维素膜（2）、胶体金结合垫（3）、样品垫（4）和吸水垫（5）；所述PVC胶板（1）的一端粘附有所述样品垫（4），其另一端粘附有所述吸水垫（5），其中部依次粘附有所述胶体金结合垫（3）、所述硝酸纤维素膜（2）；所述胶体金结合垫（3）的一端与所述样品垫（4）相粘附，其另一端与所述硝酸纤维素膜（2）相粘附，该硝酸纤维素膜（2）与所述吸水垫（5）相粘附；所述胶体金结合垫（3）包被了带有抗鸽Ⅰ型副粘病毒F蛋白单克隆抗体的胶体金标记蛋白；所述硝酸纤维素膜（2）上沿样品流动方向依次设有检测线（6）、质控线（7）。
【技术特征摘要】
1.检测鸽Ⅰ型副粘病毒的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于：它包括PVC胶板（1）、硝酸纤维素膜（2）、胶体金结合垫（3）、样品垫（4）和吸水垫（5）；所述PVC胶板（1）的一端粘附有所述样品垫（4），其另一端粘附有所述吸水垫（5），其中部依次粘附有所述胶体金结合垫（3）、所述硝酸纤维素膜（2）；所述胶体金结合垫（3）的一端与所述样品垫（4）相粘附，其另一端与所述硝酸纤维素膜（2）相粘附，该硝酸纤维素膜（2）与所述吸水垫（5）相粘附；所述胶体金结合垫（3）包被了带有抗鸽Ⅰ型副粘病毒F蛋白单克隆抗体的胶体金标记蛋白；所述硝酸纤维素膜（2）上沿样品流动方向依次设有检测线（6）、质控线（7）。
2.如权利要求1所述的检测鸽Ⅰ型副粘病毒的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于：所述检测线（6）为以线形包被纯化的抗鸽Ⅰ型副粘病毒F蛋白单克隆抗体。
3.如权利要求1所述的检测鸽Ⅰ型副粘病毒的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于：所述质控线（7）为以线形包被纯化的羊抗鼠抗体。
4.如权利要求1所述的检测鸽Ⅰ型副粘病毒的胶体金免疫层析试纸条的制备方法，包括以下步骤：
⑴免疫抗原的制备：
把鸽Ⅰ型副粘病毒F基因片段连接到PGEX-4T-1原核表达载体中，经IPTG诱导和分析，F蛋白在大肠杆菌BL21中得到高效表达，提取包涵体蛋白作为免疫抗原；
⑵抗体的制备：
将抗鸽Ⅰ型副粘病毒F蛋白免疫BALB/C小鼠按照常规的单克隆抗体制备技术制备抗鸽Ⅰ型副粘病毒F蛋白单克隆抗体，并进行纯化，即得纯化后的抗鸽Ⅰ型副粘病毒F蛋白单克隆抗体；
⑶将硝酸纤维素膜（2）粘附于PVC胶板（1）的中部；
⑷将所述纯化后的抗鸽Ⅰ型副粘病毒F蛋白单克隆抗体涂到硝酸纤维素膜（2）上，包被所述硝酸纤维素膜（2）的一个区域，得到检测线（6）；
⑸将纯化的羊抗鼠抗体包被所述硝酸纤维素膜（2）的另一个区域，得到质控线（7）；
...
【专利技术属性】
技术研发人员：贺泂杰，时永杰，杨明，张茜，贺奋义，郭慧琳，朱新强，张登基，曾玉峰，周磊，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃;62
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