【技术实现步骤摘要】
—种通过TEAD4细胞核阳性表达情况对结直肠癌评价的方法
本专利技术涉及一种方法,具体地说,是关于一种通过TEAD4细胞核阳性表达情况对结直肠癌评价的方法。
技术介绍
结、直肠癌是我国常见的恶性肿瘤。占我国恶性肿瘤的第四位,并有上升的趋势。中国人结、直肠癌与西方人比较有3个流行病学特点:①直肠癌比结肠癌发病率高,约1.5: I ;②低位直肠癌在直肠癌中所占比例高,约占75%,大多数直肠癌可在直肠指检时触及;③青年人(<30岁)患者比例较高,约占15%。但近几十年来,随着人民生活水平的提高及饮食结构的改变,结肠癌比例亦逐渐增多。但是关于一种通过结直肠癌免疫学指标TEAD4细胞核阳性表达情况对结直肠癌患者的临床特征和预后进行评价的方法,目前还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中的不足,提供一种通过结直肠癌免疫学指标TEAD4细胞核阳性表达情况对结直肠癌患者的临床特征和预后进行评价的方法。为实现上述目的,本专利技术采取的技术方案是:一种通过TEAD4细胞核阳性表达情况对结直肠癌评价的方法,包括如下步骤:(I)、制成肿瘤组织蜡块;(2)、根据HE染色确定步骤(I)所得的蜡块中肿瘤组织的位置,选取其中的肿瘤组织的中央部位制成组织芯片;(3)、对步骤⑵所得的组织芯片、阳性对照和阴性对照进行免疫组织化学染色;其中所述的阳性对照使用已证实为阳性组织的肿瘤细胞组织制成的组织芯片;所述的阴性对照使用相同的组织芯片;(4)、组织芯片常规脱蜡、水化;(5)、微波抗原修复;(6)、灭活内源性过氧化物酶;(7)、封闭非特异性蛋白;(8)、滴加一抗T ...
【技术保护点】
一种通过TEAD4细胞核阳性表达情况对结直肠癌评价的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)、制成肿瘤组织蜡块;(2)、根据HE染色确定步骤(1)所得的蜡块中肿瘤组织的位置,选取其中的肿瘤组织的中央部位制成组织芯片;(3)、对步骤(2)所得的组织芯片、阳性对照和阴性对照进行免疫组织化学染色;其中所述的阳性对照使用已证实为阳性组织的肿瘤细胞组织制成的组织芯片;所述的阴性对照使用相同的组织芯片;(4)、组织芯片常规脱蜡、水化;(5)、微波抗原修复;(6)、灭活内源性过氧化物酶;(7)、封闭非特异性蛋白;(8)、滴加一抗TEAD4一抗用5%的牛血清白蛋白水溶液按1:50稀释,至于湿盒里4℃孵育过夜;阴性对照中以PBS缓冲液代替一抗;(9)、复温45分钟;(10)、滴加二抗;(11)、DAB显色;(12)、苏木素复染;(13)、脱水和透明;(14)、封片;(15)、结果分析:阳性信号为棕黄色颗粒,用徕卡光学显微镜在200倍放大倍数下,对上述所得的每个组织位点拍摄五张图片,记录图片中TEAD4阳性染色细胞核的颜色强度;若没有棕黄色着染的细胞核,则免疫评分为0分;若阳性染色细胞核的强度为浅棕色,则免 ...
【技术特征摘要】
1.一种通过TEAD4细胞核阳性表达情况对结直肠癌评价的方法,其特征在于,包括如下步骤: (1)、制成肿瘤组织蜡块; (2)、根据HE染色确定步骤(1)所得的蜡块中肿瘤组织的位置,选取其中的肿瘤组织的中央部位制成组织芯片; (3)、对步骤(2)所得的组织芯片、阳性对照和阴性对照进行免疫组织化学染色;其中所述的阳性对照使用已证实为阳性组织的肿瘤细胞组织制成的组织芯片;所述的阴性对照使用相同的组织芯片; (4)、组织芯片常规脱蜡、水化; (5)、微波抗原修复; (6)、灭活内源性过氧化物酶; (7)、封闭非特异性蛋白; (8)、滴加一抗 TEAD4 一抗用5%的牛血清白蛋白水溶液按1:50稀释,至于湿盒里4°C孵育过夜;阴性对照中以PBS缓冲液代替一抗; (9)、复温45分钟; (10)、滴加二抗; (11)、DAB显色; (12)、苏木素复染; (13)、脱水和透明; (14)、封片; (15)、结果分析: 阳性信号为棕黄色颗粒,用徕卡光学显微镜在200倍放大倍数下,对上述所得的每个组织位点拍摄五张图片,记录图片中TEAD4阳性染色细胞核的颜色强度; 若没有棕黄色着染的细胞核,则免疫评分为O分; 若阳性染色细胞核的强度为浅棕色,则免疫评分为I 分; 若阳性染色细胞核的强度为中度棕色,则免疫评分为2分; 若阳性染色细胞核的强度为深棕色,则免疫评分为3分; (16)、根据步骤(15)所得的...
【专利技术属性】
技术研发人员:崔龙,刘云,刘辰莹,王光辉,
申请(专利权)人:上海交通大学医学院附属新华医院,
类型:发明
国别省市:上海;31
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