本发明专利技术涉及包含经修饰的白蛋白结合结构域以改善治疗性分子的药代动力学性质的组合物和方法。经修饰的肽显示减小的免疫原性和/或改善的溶解度。具体地，提供了用于增强蛋白质治疗剂的治疗潜能的组合物和方法，包括将已被修饰来减小免疫原性和/或改善溶解度的蛋白质白蛋白结合结构域连接于治疗性蛋白，包括治疗性抗体、抗体片段、抗体单结构域和/或抗体单结构域的二聚体。这些连接的多肽可显示增加的血清半衰期而无加剧的免疫原性和/或无减小的溶解度，并且大体上不影响治疗性蛋白的特异性结合性质。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术涉及包含经修饰的白蛋白结合结构域以改善治疗性分子的药代动力学性质的组合物和方法。经修饰的肽显示减小的免疫原性和/或改善的溶解度。具体地，提供了用于增强蛋白质治疗剂的治疗潜能的组合物和方法，包括将已被修饰来减小免疫原性和/或改善溶解度的蛋白质白蛋白结合结构域连接于治疗性蛋白，包括治疗性抗体、抗体片段、抗体单结构域和/或抗体单结构域的二聚体。这些连接的多肽可显示增加的血清半衰期而无加剧的免疫原性和/或无减小的溶解度，并且大体上不影响治疗性蛋白的特异性结合性质。【专利说明】与相关申请的交叉引用本申请要连接子临时申请系列号61/538，552 (将其内容通过引用整体并入本文)的权益。本申请还涉及也在2011年9月23日由Frederico Aires da Silva, SofiaVolker CortC-Real 和 Sara Lourenfo 提交的标题为“Ant1-Tumor NecorsisFactor- a Agents and Uses Thereof ”的美国临时申请系列号61/538，548,并且也将其内容通过引用整体并入本文。专利
本专利技术涉及包含经修饰的白蛋白结合结构域以改善治疗性分子的药代动力学性质的组合物和方法。经修饰的肽显示减小的免疫原性和/或改善的溶解度。具体地，提供了用于增强蛋白质治疗剂的治疗潜能的组合物和方法，包括将蛋白质白蛋白结合结构域(其已被修饰来减小免疫原性和/或改善溶解度)连接至治疗性蛋白，包括治疗性抗体、抗体片段、抗体单结构域和/或抗体单结构域的二聚体。这些连接的多肽可显示增加的血清半衰期而无加剧的免疫原性和/或无减小的溶解度，并且大体上不影响治疗性蛋白的特异性结合性质。 背景药物的效力很大程度上取决于化合物的固有药代动力学。这对于小分子药物和治疗性蛋白药物都一样。小分子药物长久以来依赖于它们与各种血浆组分的缔合来改善它们的体内药代动力学性质；然而，尽管它们的半衰期被延长，但与血浆蛋白缔合的药物通常不能用于结合靶。由于仅所述小分子的未结合部分通常在功能上有活性，因此必须在效力所需的游离药物的浓度与必须施用其的频率之间维持精细平衡(Rowland, M.(ed) (1988)Clinical Pharmacokinetics:Concepts and Applications,第 2版,Lea&Febiger, Philadelphia, PA)。治疗性蛋白，包括干扰素、生长激素、抗体片段等，主要因它们的小的尺寸而通常具有短的血清半衰期。这使得所述蛋白质高度易受快速肾清除和由血清蛋白酶导致的降解的影响。因为肾通常滤出低于60kDa的分子，减少治疗性蛋白的清除的努力集中在通过化学修饰例如糖基化或添加聚乙二醇聚合物(即PEG)来增加分子大小。Kurtzhals, P.，等人(1995)Biochem.J.312, 725 - 731 ；Markussen, J.,等人(1996)Diabetologia39, 281 - 288。尽管化学衍生法已增加了血清半衰期，但这些分子的添加也可减小生物活性和治疗效力，以及增加构建体的免疫原性。使用免疫球蛋白作为治疗剂特别地在近年来已显著增加，并且已扩展至医学治疗的不同领域。这样的用途包括无丙种球蛋白血症和低丙种球蛋白血症的治疗，作为用于治疗自身免疫性疾病和移植物抗宿主(GVH)病的免疫抑制剂，治疗和控制炎性疾病如类风湿关节炎，治疗淋巴恶性肿瘤和用于治疗各种全身性和感染性疾病的被动免疫疗法。此外，免疫球蛋白还可被用作体内诊断工具，例如在诊断成像程序中。然而，这些疗法中的持续问题是免疫球蛋白从循环的清除。免疫球蛋白清除的速率直接影响免疫球蛋白的剂量的量和频率并且增加的剂量和频率可在患者中引起不利作用，以及增加医疗费用。使用抗体片段作为治疗性蛋白也在近年来大大增加。例如，抗体片段例如sdAb、scFv、双抗体(diabody)和Fab提供了快速肿瘤渗透并且已被开发用于这些适应症；然而，这些片段也被快速清除并且它们被保留在肿瘤中的能力是有限的(Kashmiri，S.V.S.(2001) J.Nucl.Med.42:1528 - 1529 ；ffu, A.M.和 Yazaki, P.J.(2000) Q.J.Nuc1.Med.44:268 - 83)。使用了数种策略来克服与短的血清半衰期相关的问题。例如，某些蛋白质融合物已被尝试用来增加蛋白质治疗剂的大小，从而用来增加其稳定性和半衰期。(Syed 等人(1997)Blood89:3243 - 3252 ；Yeh,等人(1992)Proc.Natl.Acad.Sc1.U.S.A.89:1904 - 1908)。这些策略包括治疗性蛋白与抗体IgG的Fe部分的融合和与阿拉伯半乳聚糖-蛋白(AGP)的融合。例如，AGP与干扰素α 2的嵌合体显示直至13倍增加的体内血清半衰期，而生物活性保持与天然干扰素α2相似。也参见，美国专利公布号2007/0050855，所述专利公布提供了改善血清半衰期和稳定性的、治疗性蛋白与可溶性毒素受体片段和经修饰的转铁蛋白分子的某些融合蛋白。与抗体片段的融合还已用于例如用于治疗类风湿关节炎的产品，包括依那西普(Enbrel)和赛妥珠单抗(Cimzia)以及Remicade?(英夫利昔单抗)、Humira (阿达木单抗)和Simponi (戈利 木单抗)。Enbrel是与抗体的Fe部分融合的TNF- α受体的遗传融合物，而Cimzia是PEG化的Fab片段。然而，许多患者产生针对产品的免疫原性反应，需要转向其它治疗。还已尝试治疗性蛋白与白蛋白的融合。白蛋白(67kDa的分子质量)是血浆中最丰富的蛋白质(以50mg/ml存在)，在人中具有19天的半衰期(Peters，T.，Jr.(1985)Adv.Protein Chem.37:161 - 245 ;Peters,Τ.，Jr.(1996)All about Albumin, AcademicPress, Inc., San Diego, CA)。白蛋白通过可逆地结合和运输许多种内源性物质以及药物在体内起着至关重要的作用，并且已描述了白蛋白中的几个主要小分子结合位点。(例如，参见，Frick,等人(1994)Mol Microbiol.12:143-51 ;和 Akesson 等人(1994)Biochem.J.300:877-886)。然而，与白蛋白的直接融合已证明并不成功。例如，白蛋白与抗体的融合已经失败，因为白蛋白可因偶联程序或因缀合而变性。这可导致高免疫原性和导致缀合物被网状内皮系统可观地摄取，从而这些缀合物被从循环中快速除去，并且被肝而非靶组织大量获取。Stehle, G.,等人(1997) Anticancer Drugs8:677 ；Stehle, G.,等人(1997)Anticancer Drugs8:835 ；Kashmiri, S.V.S.(2001) J.Nucl.Med., 42, 1528 - 1529 ；ffu, A.M.等人(2000) Q.J.Nucl.Med.，44，268 - 83。也参见，例如，属于 Human Genome Sciences的W007本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种试剂，其包含连接至至少一个白蛋白结合结构域或其白蛋白结合片段或衍生物的治疗性分子，其中所述白蛋白结合结构域包含对应于SEQ ID NO:1(PEP)的氨基酸序列，其中所述结构域被至少一个选自E12D、T29H‑K35D和A45D的氨基酸置换修饰，所述置换参照SEQ ID NO:1中的氨基酸位置；和其中相较于所述治疗性分子，所述试剂具有增加的血清半衰期。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：F·N·卡斯塔涅拉埃雷斯达席尔瓦，S·弗尔克尔科尔特雷亚尔，S·费雷拉洛伦特格兰舒洛伦索，
申请(专利权)人：抗菌技术，生物技术研究与发展股份有限公司，
类型：发明
国别省市：葡萄牙;PT
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