【技术实现步骤摘要】
基于时间分辨免疫荧光层析法的检测试剂盒的制备方法
[0001]本专利技术涉及医用检测
,尤其涉及一种基于时间分辨免疫荧光层析法的检测试剂盒的制备方法
。
技术介绍
[0002]目前,降钙素原
(PCT)
已经发展成为一种很有前途的早期检测
(
全身
)
细菌感染的新型生物标志物;
1993
年,
Assicot
等人证明了高血清降钙素原水平与细菌感染和脓毒症阳性依据
(
如血培养阳性
)
患者之间存在正相关;此外,他们证明降钙素原在病毒感染中不会升高,并且在使用适当的抗生素治疗后血清降钙素原水平会降低;目前的炎症标志物,如
C
反应蛋白
(CRP)
,缺乏准确诊断细菌和非细菌感染所需的特异性
。
[0003]降钙素原有一个固定的半衰期,为临床医生和研究人员提供了一个粗略的时间表,说明在对全身性感染进行生理控制后,降钙素原水平应在何时开始下降
(24
小时内下降约
50
%
)
;目前的临床实践利用各种降钙素原临界值来决定抗生素治疗的开始和停止;临床方案和背景对于应该采用哪个截止水准起着重要作用;然而,大多数研究表明,当降钙素原水平在
0.1
至
0.5ng/mL
的范围内时,它们显示出临床意义;此外,研究表明小于
0.1ng/mL
的降钙素原水平对于排 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种基于时间分辨免疫荧光层析法的检测试剂盒的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:通过荧光微球
、
磷酸盐溶液
、NHS
溶液
、EDC
溶液
、PCT
单克隆抗体1和
BSA
制成
PCT
喷金液;使用喷金划膜仪将所述
PCT
喷金液喷涂至独立的结合垫上;以此
PCT
喷金垫制成;采用缓冲液将
PCT
单克隆抗体2稀释至
0.5
~
2.0mg/ml
,制成
T
线划线液;采用缓冲液将质控抗体稀释至
0.5
~
2.0mg/ml
,制成
C
线划线液;采用喷金划膜仪将
C
线抗体
、T
线抗体分别包被在固定于底板上的硝酸纤维素膜上;将划好线的大板置于鼓风干燥箱中进行干燥;以此包被抗体的硝酸纤维素膜底板制备完成;将吸水垫
、PCT
喷金垫
、
样品垫和包被抗体的硝酸纤维素膜底板进行组卡,并位于常温下密封保存,以此制成试纸条;将试纸条置于上盖和底壳之间,制成检测卡;最终将所述检测卡
、
标定卡
、
样品稀释液
、ID
卡和合格证进行组合,制成所述基于时间分辨免疫荧光层析法的检测试剂盒
。2.
如权利要求1所述的基于时间分辨免疫荧光层析法的检测试剂盒的制备方法,其特征在于,制备所述
PCT
喷金液包括如下步骤:离心管加入1%的荧光微球
50ul
,向荧光微球溶液中加入
200ul
磷酸盐溶液,再向离心管中加入
NHS
溶液和
EDC
溶液,并室温静置
30min
,通过离心机进行离心,并弃上清液,再加入
200ul
磷酸盐溶液复溶;向上述复溶溶液中加入
PCT
单克隆...
【专利技术属性】
技术研发人员:郝书顺,耿在燕,
申请(专利权)人:禾柏南京医学科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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