【技术实现步骤摘要】
具有聚集诱导发光特性的TP荧光标记探针及其制备方法与可视化标记策略
[0001]本专利技术涉及一种病原体标记成像
,尤其涉及活梅毒螺旋体标记技术。
技术介绍
[0002]梅毒螺旋体(Treponema Pallidum,TP)是一种非典型革兰氏阴性菌(Gram
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negative bacteriμm,G
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),可通过性行为、血液、母婴等传播,引起心血管/骨/神经/胎传梅毒等。梅毒已连续多年位居我国甲乙类法定报告传染病病种的第3位,早已成为威胁全球健康的公共卫生问题。但人们对TP的研究相对较少。现有的对于TP的检测技术包括基于蛋白标志物的免疫分析方法(梅毒血清学试验、免疫组化/荧光)、基于基因组水平的聚合酶链式反应(PCR)、基于病原体的镜检(暗视野显微镜)及兔子感染实验等。现行技术的检测结果由于存在假阴/阳性、血清固定、主观判读、抗体非特异染色,荧光染料易淬灭、光漂白,无法实时跟踪等问题使其在梅毒的精确检测、指导临床治疗中受到局限;且TP与宿主细胞相互作用的可视化研究还相对缺乏,许多有机分子由于其平面的共轭结构使其在稀溶液中发光很强,但在高浓度溶液中或在聚集(纳米粒子、胶束、固体薄膜或粉末)状态下荧光变弱甚至完全消失,聚集导致猝灭(aggregation
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caused quenching,ACQ)荧光现象,另外还有光漂白、不利于长时间成像的问题。因此开发可靠、实时地对活TP的动态示踪成像技术具有重要的临床意义。
技术实现思路
[0003]本 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种具有聚集诱导发光特性的TP荧光标记探针,其特征在于:其结构式如下所示:2.一种如权利要求1所述的具有聚集诱导发光特性的TP荧光标记探针的制备方法,其特征在于:步骤包括:将化合物1于干燥的CH2Cl2中溶解,冰浴情况下用BBr3处理反应,得化合物2;将化合物2、DBCO
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NHS和4
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二甲氨基吡啶溶于THF溶液中,加热搅拌,得到终产物DBCO
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TPE;所述化合物1结构如式(Ⅰ)所示:所述化合物2结构如式(Ⅱ)所示:3.如权利要求2所述的一种具有聚集诱导发光特性的TP荧光标记探针的制备方法,其特征在于:详细步骤包括:将化合物1于干燥的CH2Cl2中溶解,冰浴情况下用BBr3处理反应2h,加水
猝灭反应并用CH2Cl2萃取、干燥、柱色谱提纯得化合物2,将化合物2、DBCO
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NHS和4
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二甲氨基吡啶溶于THF溶液中,并加热至40℃搅拌24h,除去溶剂并进行柱层析得到终产物二苯基环辛炔
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四苯乙烯DBCO
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TPE。4.一种使用权利要求1
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3任一所述具有聚集诱导发光特性的TP荧光标记探针标记的活TP的重悬培养基,其特征在于:所述重悬培养基是TPCM
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2培养基,其成分包括:不含谷胱甘肽的CMRL1066、丙酮酸钠、刃天青、吗啉基丙磺酸、碳酸氢钠、谷酰胺、葡萄糖、组氨酸、二硫苏糖醇、灭活胎牛血清。5.如权利要求4所述一种使用具有聚集诱导发光特性的TP荧光标记探针标记的活TP的重悬培养基,其特征在于:按TPCM
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2培养基体积为100mL计,所述TPCM
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2培养基成分包括:0.7mM丙酮酸钠、质量分数0.1%刃天青、1M吗啉基丙磺酸、质量分数7.5%碳酸氢钠、200m...
【专利技术属性】
技术研发人员:廖玉辉,郑举敦,杨斌,岳锐,江银波,林伟强,黄佳林,
申请(专利权)人:南方医科大学皮肤病医院广东省皮肤病医院,广东省皮肤性病防治中心,中国麻风防治研究中心,
类型:发明
国别省市:
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