丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法技术

本发明专利技术的丝石竹皂苷元3‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸甲酯的制备方法包括以下步骤，S1：取木鳖子碾磨成粗粉，加石油醚脱脂，弃去石油醚，挥尽溶剂；S2：取步骤S1得到的木鳖子粗粉，以乙醇溶液为溶媒，进行加热回流提取，合并提取液，滤过，减压回收乙醇至浸膏；S3：取浸膏与酸液溶解，回流水解，过滤，得到滤液；S4：取滤液加于已处理好的大孔吸附树脂柱上流速进行吸附，流出液弃去，待上样饱和后先以水冲洗至无色，以乙醇溶液作为洗脱剂，进行洗脱，收集洗脱液并减压浓缩至干；S5：取步骤S4中的得到的固体加甲醇溶解，经制备液相色谱洗脱分离，收集洗脱液合并，减压回收溶剂，冻干，得白色粉末。该制备方法利于大生产操作、污染少、产品纯度高。

Preparation of 3-O-beta-D-glucuronic acid methyl ester of carnation saponin

【技术实现步骤摘要】
丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法
本专利技术涉及一种丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法，属于药品制剂制备方法

技术介绍
木鳖子为葫芦科植物木鳖Momordicacochinchinensis(Lour.)Spreng.的干燥成熟种子，主要分布于长江流域及以南地区(江苏、安徽、江西、福建等)，中南半岛和印度半岛亦有分布。木鳖子味苦、微甘，性凉；有毒。归肝、脾、胃经。具有散结消肿，攻毒疗疮的作用。常用于疮疡肿毒，乳痈，瘰疠，痔漏，干癣，秃疮等。其所含化学成分主要为皂苷类，多属于五环三萜齐墩果烷型的双糖链三萜皂苷，具有抗肿瘤、抗炎、抗病毒的多种药理作用。《中国药典》2015版一部中木鳖子含量测定成分为木鳖子皂苷的次级苷，丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(分子式C37H56O10)。现有技术中高纯度丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的提取分离方法主要采用硅胶层析法，此类提取分离方法产率低，操作过程污染严重，基本无法实现大规模工业化生产。本专利技术提供了一种丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法。
技术实现思路
为克服现有技术的不足，本专利技术提出一种丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法，该方法对木鳖子提取物进行酸水解后，再经过大孔吸附树脂富集和制备液相分离，有利于大规模生产，并且生产过程污染少，产品纯度高。为实现上述目的，本专利技术的丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法，包括以下步骤：S1：取木鳖子碾磨成粗粉，加石油醚在60℃-90℃条件下脱脂，弃去石油醚，木鳖子粗粉挥尽溶剂；S2：取步骤S1得到的木鳖子粗粉，以20％-85％的乙醇溶液为溶媒，木鳖子粗粉与溶媒以重量比1:5-15进行加热回流提取，加热回流提取1-4次，每次1-4h，合并提取液，滤过，减压回收乙醇至浸膏；S3：取步骤S2中得到的浸膏与酸液以重量比1:15-30溶解，回流水解1-4h，过滤，得到滤液；S4：取步骤S3中得到的滤液加于已处理好的大孔吸附树脂柱上以1BV/h的流速进行吸附，流出液弃去，待上样饱和后先以水冲洗至无色，以10％-80％乙醇溶液作为洗脱剂，以0.5BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液并减压浓缩至干；S5：取步骤S4中的得到的固体加甲醇溶解，经制备液相色谱，以乙腈-甲酸水溶液为流动相进行洗脱分离，分离条件为柱温35℃，流速5.0ml/min,检测波长210mm，收集洗脱液合并，减压回收溶剂，冻干，得白色粉末。进一步地，在步骤S2中，溶媒采用55％的乙醇溶液。进一步地，在步骤S3中，酸液采用1％-10％的硫酸、1％-10％的盐酸或1％-10％的硼酸。进一步地，酸液的浓度为5％。进一步地，在步骤S3中，浸膏与酸液的重量比为1:20。进一步地，在步骤S3中，回流水解时间为2h。进一步地，在步骤S4中，大孔吸附树脂柱采用HPD-100大孔吸附树脂、HPD-300大孔吸附树脂、AB-8大孔吸附树脂、X-5大孔吸附树脂或D-101大孔吸附树脂。进一步地，在步骤S4中，洗脱剂采用60％的乙醇溶液。进一步地，在步骤S5中，流动相采用乙腈：0.5％甲酸水溶液(75:25)。进一步地，在步骤S5中，制备柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶。本专利技术的丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法，在将木鳖子粗提取物经水解后获得更多次级皂苷，有利于后续进行提取分离，由大孔吸附树脂除去多糖等大分子成分，提升了丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的提取纯度，有利于通过制备液相色谱收集高纯度的丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯。附图说明下面结合附图对本专利技术作进一步描写和阐述。图1是本专利技术首选实施方式的丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法制得产品的1HNMR图谱；图2是本专利技术首选实施方式的丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法制得产品的13CNMR谱图；图3是本专利技术首选实施方式的丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法制得产品的质谱(正离子)图谱；图4是本专利技术首选实施方式的丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法制得产品的质谱(负离子)谱图。具体实施方式下面将结合附图、通过对本专利技术的优选实施方式的描述，更加清楚、完整地阐述本专利技术的技术方案。试验方法：(1)质谱仪法：照《中国药典》2015版中通则0431：质谱法进行分析，谱图数据对照文献[质谱学报，2002,23(3)：135-140]，应基本一致。(2)核磁共振波谱法：照《中国药典》2015版中通则0441：核磁共振波谱法中的1HNMR法与13CNMR法进行定性分析。(3)高效液相色谱：照《中国药典》2015版中通则0512：高效液相色谱法进行含量测定。实施例一：丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备。S1：取木鳖子粗粉2kg，加石油醚(60℃～90℃)脱脂，弃去石油醚，药渣挥尽溶剂。S2：以50％乙醇作为溶媒，木鳖子粗粉与溶媒的重量比为1:8，加热回流3次，每次2h，合并提取液，滤过，减压回收乙醇至浸膏。S3：浸膏加30倍量的5％硫酸水溶液溶解，回流水解2h，过滤。S4：滤液加于已处理好的AB-8大孔吸附树脂柱上以1BV/h的流速进行吸附，流出液弃去，待上样饱和后先以水冲至无色，再用60％乙醇3BV作为洗脱剂，以0.5BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液减压浓缩至干。S5：用适量甲醇溶解固体，经制备液相色谱，以乙腈：0.5％甲酸水溶液(75:25)为流动相，柱温35℃，流速5.0ml/min，检测波长210nm进行分离，根据对照品的保留时间，收集丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯部分洗脱液合并，减压回收溶剂，冻干，得白色粉末。实施例二：丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备。S1：取木鳖子粗粉2kg，加石油醚(60℃～90℃)脱脂，弃去石油醚，药渣挥尽溶剂。S2：以85％乙醇作为溶媒，木鳖子粗粉与溶媒的重量比为1:12，加热回流2次，每次3h，合并提取液，滤过，减压回收乙醇至浸膏。S3：浸膏加20倍量的8％盐酸水溶液溶解，回流水解1.5h，过滤。S4：滤液加于已处理好的HPD-100大孔吸附树脂柱上以1BV/h的流速进行吸附，流出液弃去，待上样饱和后先以水冲至无色，再用80％乙醇2BV作为洗脱剂，以0.5BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液减压浓缩至干。S5：用适量甲醇溶解固体，经制备液相色谱，以乙腈：0.5％甲酸水溶液(75:25)为流动相，柱温35℃，流速5.0ml/min，检测波长210nm进行分离，根据对照品的保留时间，收集丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯部分洗脱液合并，减压回收溶剂，冻干，得白色粉末。实施例三：丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备。S1：取木鳖子粗粉3kg，加石油醚(60℃～90℃)脱脂，弃去石油醚，药渣挥尽溶剂。S2：以30％乙醇作为溶媒，木鳖子粗粉与溶媒的重量比为1:6，加热回流3次，每次1.5h，合并提取液，滤过，减压回收乙醇至浸膏。S3：浸膏加15倍量的4％硼酸水溶液溶解，回流水解4h，过滤。S4：滤液加于已处理好的D-101大孔吸附树脂柱上以1BV/h的流速本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种丝石竹皂苷元3‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸甲酯的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：取木鳖子碾磨成粗粉，加石油醚在60℃‑90℃条件下脱脂，弃去石油醚，木鳖子粗粉挥尽溶剂；S2：取步骤S1得到的木鳖子粗粉，以20％‑85％的乙醇溶液为溶媒，木鳖子粗粉与溶媒以重量比1:5‑15进行加热回流提取，加热回流提取1‑4次，每次1‑4h，合并提取液，滤过，减压回收乙醇至浸膏；S3：取步骤S2中得到的浸膏与酸液以重量比1:15‑30溶解，回流水解1‑4h，过滤，得到滤液；S4：取步骤S3中得到的滤液加于已处理好的大孔吸附树脂柱上以1BV/h的流速进行吸附，流出液弃去，待上样饱和后先以水冲洗至无色，以10％‑80％乙醇溶液作为洗脱剂，以0.5BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液并减压浓缩至干；S5：取步骤S4中的得到的固体加甲醇溶解，经制备液相色谱，以乙腈‑甲酸水溶液为流动相进行洗脱分离，分离条件为柱温35℃，流速5.0ml/min,检测波长210mm，收集洗脱液合并，减压回收溶剂，冻干，得白色粉末。

【技术特征摘要】
2018.09.28 CN 20181114179671.一种丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：取木鳖子碾磨成粗粉，加石油醚在60℃-90℃条件下脱脂，弃去石油醚，木鳖子粗粉挥尽溶剂；S2：取步骤S1得到的木鳖子粗粉，以20％-85％的乙醇溶液为溶媒，木鳖子粗粉与溶媒以重量比1:5-15进行加热回流提取，加热回流提取1-4次，每次1-4h，合并提取液，滤过，减压回收乙醇至浸膏；S3：取步骤S2中得到的浸膏与酸液以重量比1:15-30溶解，回流水解1-4h，过滤，得到滤液；S4：取步骤S3中得到的滤液加于已处理好的大孔吸附树脂柱上以1BV/h的流速进行吸附，流出液弃去，待上样饱和后先以水冲洗至无色，以10％-80％乙醇溶液作为洗脱剂，以0.5BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液并减压浓缩至干；S5：取步骤S4中的得到的固体加甲醇溶解，经制备液相色谱，以乙腈-甲酸水溶液为流动相进行洗脱分离，分离条件为柱温35℃，流速5.0ml/min,检测波长210mm，收集洗脱液合并，减压回收溶剂，冻干，得白色粉末。2.如权利要求1所述的丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的制备方法，其特征在于，在步骤S2中，所述溶媒采用55％的乙醇溶液。3.如权利要求1所述的丝石竹皂苷元3-...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴义元，梁青，
申请(专利权)人：南京曼赫医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32