一种促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂及其使用方法技术

本发明专利技术公开了一种促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂及其使用方法，该液体复合菌剂包括菌根真菌石斛小菇(Mycena dendrobii)以及硝酸镧，还可以包括生长素，以石斛小菇接种幼苗根部，硝酸镧及生长素以喷洒方式处理经过驯化后移栽到大棚生长的石斛组培苗地上部分。采用石斛小菇和硝酸镧两者组成的液体复合菌剂，明显提高石斛幼苗成活率和促进生长，包括株高、单株重量、根、茎、叶等指标性状，而采用石斛小菇、硝酸镧和生长素三者组成的复合菌剂显著提高石斛药材多糖和生物碱等有效成分含量。该项技术栽培方法简单、易于大面积推广、投资少，生产出的石斛药材的品质符合中国药典要求。

A liquid compound microbial agent for promoting the growth of Dendrobium candidum and its application method

The invention discloses a liquid composite fungus agent for promoting the growth of Dendrobium candidum and its application method. The liquid composite fungus agent includes mycorrhizal fungus Mycena Dendrobii and lanthanum nitrate, and can also include auxin, which can be inoculated into the root of the seedling by Dendrobium candidum, and lanthanum nitrate and auxin are sprayed to treat the aboveground part of the tissue culture seedling of Dendrobium which has been domesticated and transplanted into the greenhouse. \u3002 The liquid compound microbial agent composed of Dendrobium mushroom and lanthanum nitrate significantly increased the survival rate and growth of Dendrobium seedlings, including plant height, weight per plant, root, stem and leaf, while the compound microbial agent composed of Dendrobium mushroom, lanthanum nitrate and auxin significantly increased the content of polysaccharides and alkaloids in Dendrobium medicinal materials. The cultivation method of this technology is simple, easy to be popularized in large areas, with less investment. The quality of Dendrobium medicinal materials produced meets the requirements of Chinese Pharmacopoeia.

【技术实现步骤摘要】
一种促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂及其使用方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂及其使用方法。
技术介绍
铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)是中国传统名贵中药材，具有很高的药用价值和经济价值，被列为国家一级野生保护植物，在我国热带和亚热带均有广泛分布。然而，由于人为的大肆采挖和原生环境的破坏，导致供需关系的严重不平衡，推动了铁皮石斛人工栽培及其产业化的发展。自然条件下野生石斛的结实率很低，加上种子没有胚乳直接提供营养，前期幼苗很难萌发，且其移栽成活率很低。目前铁皮石斛人工种植均采用组培苗，存在着成本高、移栽成活率低、生长缓慢、产量低等问题。植物促生菌剂已成为当前研究的热点，具有促生作用的植物菌根真菌以及内生细菌由于有足够的碳源、氮源等营养物质，且受到植物组织或根的保护，更易于发挥作用。菌根真菌对宿主植物的促进作用主要体现在能更好地吸收营养物质，有利于次生代谢产物的积累等方面，同时可以促进宿主植物对氮、磷等矿质元素的吸收，从而促进宿主植物的生长。目前，微生物菌剂多为单一菌，混合菌剂的报道不多。单一纯培养接种物缺少铁皮石斛生长所需要的营养元素，育苗初期效果不佳，难以推广。因此，研究石斛菌根真菌与寄主植物的相互关系以及液体复合菌剂对铁皮石斛组培苗的促生作用具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了一种促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂及其使用方法，用于解决铁皮石斛由于缺少菌根真菌导致生长慢、药用植物资源不足的难题，采用该两种液体复合菌剂，可以大大促进石斛幼苗株高、茎长、茎粗、根长、根粗、根数、节长、节数、叶片数、叶长、叶宽等，还能够显著提高石斛药材多糖和生物碱等有效成分含量；该项技术栽培方法简单、易于大面积推广、投资少，生产出的石斛药材的品质符合中国药典要求。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之一是：一种促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂，包括3～5g/L石斛小菇(Mycenadendrobii)、4～6mg/L硝酸镧。一实施例中：还包括190～210mg/L生长素。一实施例中：所述石斛小菇制备方法包括：石斛小菇菌种活化后，转接于PDA培养基中，于22～25℃恒温静置培养14～20天，随后接入PDA培养基中进行发酵培养7～14天，即得。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之二是：一种促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂的使用方法，所述液体复合菌剂中，石斛小菇接种于铁皮石斛幼苗根部，充分利用石斛菌根真菌与寄主植物形成菌根共生关系，硝酸镧、生长素喷洒于铁皮石斛幼苗地上部分。一实施例中：所述液体复合菌剂中，石斛小菇每隔28～32天接种铁皮石斛幼苗根部一次，硝酸镧、生长素每隔9～11天喷洒铁皮石斛幼苗地上部分一次。一实施例中：所述石斛小菇的接种量为4～6mL。一实施例中：所述铁皮石斛幼苗为经过驯化后移栽到大棚生长的石斛组培苗。本技术方案与
技术介绍
相比，它具有如下优点：本专利技术的促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂中，石斛小菇菌根真菌能提高组培苗的株高和茎粗，在制成液体处理剂后避免了由真菌接种时含菌量过高而使共生关系失去平衡的问题，也不会因为培养基的残留而污染组培苗；合适浓度的硝酸镧在铁皮石斛菌根形成时具有一定的促进作用(随着接种硝酸镧浓度的增加，铁皮石斛的真菌侵染率也会随之增高)；加入生长素后不仅铁皮石斛苗量大，育苗周期短，且操作便捷，未发生变种现象。采用本专利技术的液体复合菌剂培养后，石斛幼苗株高、整枝分枝数、茎长、茎粗、节长、节数、根长、根粗、根数、叶片数、叶长、叶宽、石斛多糖、石斛生物碱含量等明显增加，对铁皮石斛幼苗生长有很好的促进作用。同时，液体处理剂在制成复合菌剂后不影响其侵染能力。附图说明下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步说明。图1为不同液体复合菌剂处理后的石斛幼苗成活率示意图。图2为不同液体复合菌剂处理后的石斛茎外观指标示意图。图3为不同液体复合菌剂处理后的石斛根外观指标示意图。图4为不同液体复合菌剂处理后的石斛叶片外观指标示意图。图5为不同液体复合菌剂处理后的石斛整株外观指标示意图。图6为不同液体复合菌剂处理后的石斛茎鲜重干重对比示意图。图7为不同液体复合菌剂处理后的石斛多糖含量示意图(注：不同字母表示处理间差异显著；“**”表示与对照组差异性极显著)。图8为不同液体复合菌剂处理后的石斛生物碱含量示意图(注：不同字母表示处理间差异显著；“**”表示与对照组差异性极显著)。具体实施方式下面通过实施例具体说明本专利技术的内容：本实施例提供了一种促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂，包括：4g/L石斛小菇(Mycenadendrobii)、5mg/L硝酸镧。在本专利技术的另一实施例中，还包括190～210mg/L生长素，即促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂包括：4g/L石斛小菇(Mycenadendrobii)、5mg/L硝酸镧、200mg/L生长素。其中，液体复合菌剂中的石斛小菇制备方法如下：菌根真菌石斛小菇来自铁皮石斛的根部，来自中国林业微生物菌种保藏管理中心，菌根真菌石斛小菇自低温保藏的斜面试管菌种活化后，分别转接于含PDA培养基(固体培养基，含有葡萄糖、马铃薯、琼脂等)的试管或培养皿中，于22～25℃恒温静置培养14～20天，待菌丝大部分或全部长满培养基时取出备用，分别在菌落边缘打孔成菌片，并以小块接入PDA马铃薯葡萄糖琼脂培养基中进行发酵培养7～14天。利用液体复合菌剂对铁皮石斛进行培养的步骤包括：将石斛幼苗移植到含有300mL树皮、小卵石和粗腐殖质土壤3：1：1(v/v/v)的混合物的穴盘中(穴盘为长方形，5×10方格，每个小方格为4cm直径)。将所述石斛幼苗置于大棚下培养，温度为23～25℃以常规方法进行管理，包括：移栽后浇定根水，以基质浇透为准，养护时每天定时喷雾4～5次，湿度保持在80％左右，待新根长出后逐步减少喷雾次数。进一步的，每隔30天，用PDA马铃薯葡萄糖琼脂培养基中发酵培养7～14天的菌根真菌石斛小菇(4g/L)接种幼苗根部一次。接种时，在幼苗根部周围轻轻扒开，用吸管吸取约5mL石斛小菇接种在幼苗根部，再轻轻覆盖上原来的基质。进一步的，每隔10天，用复合液体菌剂中的5mg/L硝酸镧、200mg/L生长素混合得到的液体处理剂分别对石斛幼苗地上部分喷洒一次。注意石斛幼苗怕湿，湿润即可，不宜太多。根据石斛菌根真菌与寄主植物的相互关系以及不同复合液体剂铁皮石斛的影响，共设置了10组处理，每组10个穴盘，每个穴盘种植三株幼苗，以下表1为具体处理方案：表1不同液体复合菌剂的处理组及浓度经6个月处理培养，10组幼苗成活率如图1所示。实验结果显示，第四组处理方式：以4g/L石斛小菇每隔30天接种幼苗根部一次，以5mg/L硝酸镧每隔10天喷洒幼苗地上部分一次处理的石斛幼苗最高，成活率为83.0％，比对照组成活率(63.3％)提高了31.1％。将幼苗取出分别测定幼苗茎长、茎粗、节长、节数外观指标，取平均值具体结果如图2所示。实验结果显示，不同复合液体处理组石斛幼苗茎长、茎粗、节长、节数外观指标均明显高于对照组，其中第四组处理方式：以4g/L石斛小菇每隔30天接种幼苗根部一次，以5mg/L硝酸镧每隔10天喷洒幼苗地上部分一次处理的石斛幼苗生长表本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂，其特征在于：包括3～5g/L石斛小菇(Mycena dendrobii)、4～6mg/L硝酸镧。

【技术特征摘要】
1.一种促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂，其特征在于：包括3～5g/L石斛小菇(Mycenadendrobii)、4～6mg/L硝酸镧。2.根据权利要求1所述的促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂，其特征在于：还包括190～210mg/L生长素。3.根据权利要求1或2所述的促进铁皮石斛生长的液体复合菌剂，其特征在于：所述石斛小菇制备方法包括：石斛小菇菌种活化后，转接于PDA培养基中，于22～25℃恒温静置培养14～20天，随后接入PDA培养基中进行发酵培养7～14天，即得。4.一种权利要求1至3中任一项所述的促...

【专利技术属性】
技术研发人员：张君毅，秦建立，高小琴，陈颖，杨光宇，卢绍基，
申请(专利权)人：华侨大学，厦门塔斯曼生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35