一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法技术

本发明专利技术公开了一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法，包括以下步骤：将试验羔羊分为健康对照组和攻毒试验组；攻毒第一阶段对试验羔羊饲喂代食料，绘制大肠杆菌生长曲线；攻毒第二阶段对试验羔羊用注射器灌喂F17大肠杆菌菌液；每6小时观察一次羔羊状态，记录羔羊粪便形态，并根据羔羊生理状态结合细菌生长曲线调整大肠杆菌菌液剂量；连续灌喂3 d直至羔羊生理状态维持不变，以“正常”（1型，2型）、“糊状”（3型）、“水样”（4型）三种粪便黏稠度为标准进行记录。本发明专利技术提出的一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法，有针对性地提高了绵羊大肠杆菌的攻毒成功率。

A Method of Attacking Escherichia coli in Sheep

The invention discloses a method for attacking E. coli in sheep, which includes the following steps: dividing test lambs into healthy control group and detoxification test group; feeding test lambs with substitutes in the first stage of detoxification, drawing the growth curve of E. coli; feeding test lambs with injectors in the second stage of detoxification; observing lamb status every six hours and recording lamb feces. The dosage of Escherichia coli liquid was adjusted according to lamb's physiological state and bacterial growth curve. The dosage of Escherichia coli liquid was continuously fed for 3 days until the lamb's physiological state remained unchanged. The fecal consistency of \normal\ (type 1, type 2), \pasty\ (type 3) and \water\ (type 4) was recorded as the standard. The invention provides a method for attacking sheep E. coli, aiming at improving the success rate of attacking sheep E. coli.

【技术实现步骤摘要】
一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法
本专利技术涉及畜牧兽医
，尤其涉及一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法。
技术介绍
在现代化的集约化养殖生产过程中，细菌性腹泻在规模化羊场最为常见高发，细菌性腹泻的治疗方案存在诸多缺陷，传统细菌攻毒技术存在着盲目性、效率低以及针对性不强等缺点。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是提供一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法，旨在解决传统的细菌攻毒方法存在的效率低、针对性不强等缺点。为了实现以上目的，本专利技术提出了一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、绘制大肠杆菌生长曲线，调整攻毒菌液浓度；步骤2、将试验羔羊分为健康对照组和攻毒试验组；步骤3、攻毒第一阶段，对试验羔羊饲喂代食料；步骤4、攻毒第二阶段，使试验羔羊口服F17大肠杆菌菌液；步骤5、攻毒第二阶段，每6小时观察一次羔羊状态，记录羔羊生理状态；步骤6、攻毒第二阶段，连续灌喂5d直至羔羊生理状态维持不变，以“正常”、“糊状”、“水样”三种粪便黏稠度为标准进行记录。所述的步骤2包括：将试验羔羊分为健康对照组和攻毒试验组，两组之间严格隔离饲养，组内羔羊分栏单独饲养。所述的步骤3包括：攻毒第一阶段，对试验羔羊饲喂代食料，观察试验羔羊的生理状态，若连续2天未出现腹泻现象，此时可进行攻毒第二阶段的操作。所述的步骤6包括：连续灌喂3d直至羔羊生理状态维持不变，以“正常”、“糊状”、“水样”三种粪便黏稠度为标准进行记录；“正常”包括1型、2型，“糊状”对应3型；“水样”对应4型。步骤4中，每只试验羔羊每天接受F17大肠杆菌菌株的平均剂量浓度是4.6×108CFU·mL-1；平均剂量浓度需根据生长曲线进行调整。相对于现有技术，本专利技术的有益效果为：根据饲喂代食料之后的情况，排除由代食料引起的腹泻，还提供粪便形态的鉴定标准，有针对性地为绵羊大肠杆菌的攻毒方案提供参考。附图说明图1为大肠杆菌生长曲线图。具体实施方式以下通过具体实施例对本专利技术作进一步详细说明。本专利技术提出一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法，所述绵羊大肠杆菌的攻毒方法包括以下步骤：步骤1、绘制大肠杆菌生长曲线，调整攻毒菌液浓度；生长曲线见图1。生长曲线制作方法如下：(1)、平板划线，挑取单菌落接种5mLLB培养基，37℃过夜培养；(2)、取1mL种子液各加入100mLLB培养基，37℃过夜培养；(3)、每1小时取1mL菌液，3个重复，测量OD600吸光值。细菌平板菌落计数操作方法如下：(1)、接种待测大肠杆菌菌液到LB培养基，过夜培养。测量OD600吸光值，取一定量(如100μl)的菌悬液，进行10×倍梯度系列稀释；(2)、取一定量(如100μl)稀释液均匀涂布于平板培养基，每个稀释度3个重复，37℃过夜培养；(3)、待平板上长出菌落后，选取稀释度最合适的平板(通常菌落数为数十至数百个之间)，数平板上的菌落数，根据稀释度和涂平板的液体量，换算出原始菌液中的活菌数。通常单位是CUF/ml，即每ml原始菌液中有多少个活菌数。步骤2、将试验羔羊分为健康对照组和攻毒试验组；步骤2包括：选取18只3-5日龄、健康状况良好、体重相近的羔羊个体，将试验羔羊分为健康对照组和攻毒试验组，其中空白对照组3只，攻毒试验组15只。两组之间严格隔离饲养，组内羔羊分栏单独饲养；步骤3、攻毒第一阶段，对试验羔羊饲喂代食料，代食料成分不含抗生素和微生物制剂。步骤3包括：攻毒第一阶段，对试验羔羊饲喂代食料，观察试验羔羊的生理状态，若连续2天未出现腹泻现象，可排除由代食料导致试验羔羊消化不良而引起的内分泌紊乱，此时可进行攻毒第二阶段；步骤4、攻毒第二阶段，使试验羔羊口服F17大肠杆菌菌液；步骤4包括：每只试验羔羊每天接受F17大肠杆菌菌株的平均剂量浓度是4.6×108CFU·mL-1；平均剂量浓度需根据生长曲线进行调整。步骤5、攻毒第二阶段，每6小时观察一次羔羊状态，记录羔羊生理状态；步骤6、攻毒第二阶段，连续灌喂3d直至羔羊生理状态维持不变，以“正常”(1型，2型)、“糊状”(3型)、“水样”(4型)三种粪便黏稠度为标准进行记录。粪便黏稠度标准见表1。表1粪便分类表以上显示描述了本专利技术的基本原理、主要特征以及优点。本行业的技术人员应该了解，本专利技术不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说本专利技术的原理，在不脱离本专利技术精神和范围的前提下，本专利技术还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落进要求保护本专利技术范围内。本专利技术要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、绘制大肠杆菌生长曲线，调整攻毒菌液浓度；步骤2、将试验羔羊分为健康对照组和攻毒试验组；步骤3、攻毒第一阶段，对试验羔羊饲喂代食料；步骤4、攻毒第二阶段，使试验羔羊口服F17大肠杆菌菌液；步骤5、攻毒第二阶段，每6小时观察一次羔羊状态，记录羔羊生理状态；步骤6、攻毒第二阶段，连续灌喂5d直至羔羊生理状态维持不变，以“正常”、“糊状”、“水样”三种粪便黏稠度为标准进行记录。

【技术特征摘要】
1.一种绵羊大肠杆菌的攻毒方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、绘制大肠杆菌生长曲线，调整攻毒菌液浓度；步骤2、将试验羔羊分为健康对照组和攻毒试验组；步骤3、攻毒第一阶段，对试验羔羊饲喂代食料；步骤4、攻毒第二阶段，使试验羔羊口服F17大肠杆菌菌液；步骤5、攻毒第二阶段，每6小时观察一次羔羊状态，记录羔羊生理状态；步骤6、攻毒第二阶段，连续灌喂5d直至羔羊生理状态维持不变，以“正常”、“糊状”、“水样”三种粪便黏稠度为标准进行记录。2.如权利要求1所述的绵羊大肠杆菌的攻毒方法，其特征在于，所述的步骤2包括：将试验羔羊分为健康对照组和攻毒试验组，两组之间严格隔离饲养，组内羔羊分栏单独饲养。3.如权利要求1所述的绵羊大肠杆菌的攻毒方法，其特征在于，所述的步骤3包括：攻毒第一阶段，对试...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙伟，鲍建军，金澄艳，吕晓阳，高雯，于嘉瑞，陈炜昊，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32