一种孕甾烷型甾体生物碱及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种孕甾烷型甾体生物碱及其制备方法和应用。其分子式为C31H48N2O。制备步骤为：1)将野扇花的根茎干燥粉碎成粗粉；2)将粗粉用甲醇超声提取，得提取液；3)将提取液浓缩成浸膏，浸膏用硫酸溶液溶解后用乙酸乙酯萃取得非生物碱部分，剩余的酸水层调节pH到9，再用二氯甲烷萃取得总生物碱；4)将总生物碱用硅胶拌样进行柱层析分离后用二氯甲烷重结晶即得孕甾烷型甾体生物碱。本发明专利技术的孕甾烷型甾体生物碱具有明显的抑制肿瘤细胞增殖，治疗癌症的作用。

【技术实现步骤摘要】
一种孕甾烷型甾体生物碱及其制备方法和应用
本专利技术属于药物
，具体地，涉及一种新型甾体生物碱及其制备方法和应用，特别是一种新型孕甾烷型甾体生物碱及其制备方法和在抗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
野扇花属(Sarcococca)黄杨科(Buxaceae)植物，常绿灌木，本属约有20种，分布于亚洲南部及东部。在我国现知的有8种及几个变种分别为:羽脉野扇花(S.hookerianaBaill)、双蕊野扇花(变种)(S.hookerianavar.digyna)、野扇花(S.ruacifolia)、柳叶野扇花(S.saligna)、东方野扇花(S.oriantalis)、长叶柄野扇花(S.longipotiolata)、长叶野扇花(S.longifolia)、云南野扇花(S.wallichii)、海南野扇花(S.vagans)、聚花野扇花(S.confertiflor)。贵州省主要产2种，野扇花和羽脉野扇花，且为贵州苗族民间习用草药，常混用，又名三两金、胃友，收录于《贵州省中药材、民族药材质量标准》2003年版(DB52/YC328-2003)。药用根、果。治胃痛、风寒湿痹、跌打损伤，每用根3～5钱，水煎服或研末，日服三次。治头晕、心悸、视力减退，每用果3～5钱，水煎服。结合该属植物在民间用药的传统，开展深入的化学成分和药理活性研究有利于充分挖掘该属植物药用价值，具有特别的现实意义。根据世界卫生组织的最新实况报道，肿瘤即癌症是世界第二大死因(心血管疾病为第一大死因)。2015年因罹患癌症而死亡的案例高达880万，就全球范围而言，近六分之一的死亡是由癌症造成的。世界死亡率最高的癌症类型依次为：肺癌(2015年死亡人数接近169万)、肝癌(78.8万)、结肠直肠癌(77.4万)、胃癌(75.4万)及乳腺癌(57.1万)。其发病率和死亡率不仅与性别有关，发达地区和欠发达地区在此也表现出了明显的差异。在我国，肿瘤发病率逐年攀升，以每年10％的速度增长，每一分钟就有6人被诊断为恶性肿瘤，5人死于癌症。而且，值得关注的是我国癌症发病人数约占世界发病的五分之一；癌症死亡人数约占全球总数的四分之一。因此，对抗癌药物的深入研究具有十分重要的意义并成为国内外的一个研究热点。在恶性肿瘤的治疗中，药物治疗占有重要的地位。在合成化学类抗肿瘤药物中绝大多数都以天然抗肿瘤活性成分为先导化合物，以天然产物为来源的抗肿瘤药物具有活性显著、结构独特、作用机制不同于一般的小分子化学治疗药物的优势。据报道，临床使用的抗癌药物中超过60％来源于天然，包括植物、海洋生物、微生物。在2003年销售最好的20种抗肿瘤药物中，天然产物及其衍生物占37％，如紫杉醇，多西他赛，羟基喜树碱等，由此可见，天然产物是结构新颖和作用独特的抗肿瘤化合物的重要来源。从药用植物中寻找新的具有选择性细胞毒活性单体化学成分成为研制新型抗肿瘤药物的重要途径。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种孕甾烷型甾体生物碱及其制备方法和应用。本专利技术的孕甾烷型甾体生物碱具有明显的抑制肿瘤细胞增殖，治疗癌症的作用。本专利技术的技术方案：一种孕甾烷型甾体生物碱，其分子式为C31H48N2O，所述孕甾烷型甾体生物碱的结构式如附图1所示。一种前述的孕甾烷型甾体生物碱的制备方法，是从野扇花的根茎中提取获得。前述的孕甾烷型甾体生物碱的制备方法，所述提取的步骤如下：1)将野扇花的根茎干燥，粉碎成粗粉；2)将粗粉用甲醇超声提取，得提取液；3)将提取液浓缩成浸膏，浸膏用硫酸溶液溶解后用乙酸乙酯萃取得非生物碱部分，剩余的酸水层调节pH到9，再用二氯甲烷萃取得总生物碱；4)将总生物碱用硅胶拌样后进行柱层析分离，采用二氯甲烷-甲醇-二乙胺＝100:1:0、50:1:0、20:1:0、10:1:0和5:1:1的梯度洗脱合并相同组分依次获得5个部分A-E，B部分经二氯甲烷-甲醇＝20:1、10:1和5:1的梯度洗脱合并相同组分后依次得B1-B3三个部分，其中B2部分经过石油醚-二氯甲烷-二乙胺＝50:1:1、20:1:1、10:1:1和5:1:1分离依次得B2-1、B2-2、B2-3和B2-4四个部分，B2-2部分经二氯甲烷-甲醇＝10:1的系统反复柱层析后二氯甲烷重结晶即得孕甾烷型甾体生物碱。前述的孕甾烷型甾体生物碱的制备方法，步骤2)中，所述甲醇选用94-96％的甲醇。前述的孕甾烷型甾体生物碱的制备方法，步骤2)中，所述超声提取是提取3次，每次20-30小时，将3次提取的提取物合并得所述提取液。前述的孕甾烷型甾体生物碱的制备方法，步骤骤3)中，所述硫酸溶液的浓度为0.8-1.2％。前述的孕甾烷型甾体生物碱的制备方法，步骤3)中，所述剩余的酸水层是用饱和的碳酸钠溶液调节pH到9-10。前述的孕甾烷型甾体生物碱的制备方法，所述野扇花为聚花野扇花、羽脉野扇花、双蕊野扇花、长叶野扇花、长叶柄野扇花、东方野扇花、野扇花、柳叶野扇花、海南野扇花或云南野扇花。一种前述的孕甾烷型甾体生物碱的应用，是在抗癌药物中的应用。前述的孕甾烷型甾体生物碱的应用，具体是在人结肠腺癌、人肝癌、人前列腺癌、人乳腺癌和人慢性髓原白血病癌的抗癌药物中的应用。本专利技术的有益效果本专利技术是从野扇花(SarcococcahookerianaBaill.)的根茎中的分离到的一种新型的孕甾烷型甾体生物碱，这一新型甾体生物碱具有抑制肿瘤细胞增殖的活性，特别是对人结肠腺癌、人肝癌、人前列腺癌、人乳腺癌和人慢性髓原白血病癌显著的选择性。本专利技术表明该甾体生物碱具有开发成抗癌药物的价值。本专利技术化合物的分离与结构鉴定：实验材料药材于2015年7月采于贵州省赫章县韭菜坪，贵阳中医学院赵俊华教授鉴定为羽脉野扇花(SarcococcahookerianaBaill.)，植物标本存放于贵阳中医学院苗医药重点实验室，编号为20150701。仪器及试剂ECX-500MHz、JEOL-400MHz超导核磁共振谱仪(日本电子株式会社)；UV-2401PC岛津紫外分光光度计(日本岛津)；micrOTOF-QⅡBrukerDaltonics质谱仪(美国布鲁克·道尔顿公司)；TENSOR-27型Bruker红外光谱仪(德国布鲁克仪器公司，KBr压片)；BUCHI-R-215型旋转蒸发仪(瑞士步奇公司)；N-1001型旋转蒸发仪(EYELA，日本东京理化)；WFH-308B三色紫外分析仪(上海精科实业有限公司)；ZF-2型紫外光谱仪(上海安亭电子仪器厂)；RE-5210旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)；SHZ-D-Ⅲ型多用真空泵(郑州华仪器有限责任公司)；SK8210HP超声仪(上海科导超声仪器有限公司)。柱层析硅胶(青岛海洋化工，80-100目、200-300目)；薄层层析硅胶H(青岛海洋化工)；GF254硅胶板(青岛海洋化工200×200mm)；凝胶为SephadexLH-20；显色剂为改良碘化铋甲试剂；其它试剂均为国产分析纯。经上述实施例的方法制得化合物。化合物呈无色针状晶体，易溶于氯仿；改良碘化铋钾显色呈橘红色。(c＝0.565,CH2Cl2).UV(CHCl3):242.0(0.25).IR(KBr):3294,3029,2929,2865,2761,1637,1539,1496,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种孕甾烷型甾体生物碱，其特征在于：其分子式为C31H48N2O，所述孕甾烷型甾体生物碱的结构式为：

【技术特征摘要】
1.一种孕甾烷型甾体生物碱，其特征在于：其分子式为C31H48N2O，所述孕甾烷型甾体生物碱的结构式为：2.一种根据权利要求1所述的孕甾烷型甾体生物碱的制备方法，其特征在于：是从野扇花的根茎中提取获得。3.根据权利要求2所述的孕甾烷型甾体生物碱的制备方法，其特征在于：所述提取的步骤如下：1)将野扇花的根茎干燥，粉碎成粗粉；2)将粗粉用甲醇超声提取，得提取液；3)将提取液浓缩成浸膏，浸膏用硫酸溶液溶解后用乙酸乙酯萃取得非生物碱部分，剩余的酸水层调节pH到9，再用二氯甲烷萃取得总生物碱；4)将总生物碱用硅胶拌样后进行柱层析分离，用二氯甲烷-甲醇-二乙胺＝100:1:0、50:1:0、20:1:0、10:1:0和5:1:1的梯度洗脱合并相同组分依次获得5个部分A-E，B部分经二氯甲烷-甲醇＝20:1、10:1和5:1的梯度洗脱合并相同组分后得B1-B3三个部分，其中B2部分经过石油醚-二氯甲烷-二乙胺＝50:1:1、20:1:1、10:1:1和5:1:1分离依次得B2-1、B2-2、B2-3和B2-4四个部分，B2-2部分经二氯甲烷-甲醇＝10:1的系统反复柱层析后二氯甲烷重结晶...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜江，吴继春，何席程，霍少杰，何康，
申请(专利权)人：贵阳中医学院，
类型：发明
国别省市：贵州,52