聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了聚L‑赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极，属于电化学分析领域，所述电极的表面修饰有聚L‑赖氨酸/天冬氨酸复合物。同时提供其制备方法和应用。本发明专利技术将L‑赖氨酸/天冬氨酸复合修饰电极，VB6在聚L‑赖氨酸/天冬氨酸修饰电极上的电化学反应的电子转移数与质子数相等，聚L‑赖氨酸/天冬氨酸修饰电极对VB6有良好的催化活性，电化学响应好，峰电位相对于裸电极正移0.021V，响应峰电流是裸电极的12倍；将其制成电化学传感器用于VB6的灵敏测定，该复合电极对VB6的电化学氧化过程具有良好的催化性能，表现为其氧化峰电流显著提高和氧化峰电位正移。本发明专利技术具有稳定性好、易制备和成本低等优点，具有高的灵敏度和宽的线性范围，可用于VB6含量的测定。

Poly-L-lysine/aspartic acid composite modified electrode and its preparation method and Application

The invention discloses a polyL lysine/aspartic acid composite modified electrode, which belongs to the field of electrochemical analysis. The surface of the electrode is modified with polyL lysine/aspartic acid complex. The preparation method and application are also provided. The electrochemical reaction of VB6 on polyL lysine/aspartic acid modified electrode is equal to proton number. The polyL lysine/aspartic acid modified electrode has good catalytic activity for VB6, good electrochemical response and positive shift of peak potential to bare electrode by 0.021. V, the response peak current is 12 times of that of the bare electrode. The electrochemical sensor is used for the sensitive determination of VB6. The composite electrode has good catalytic performance for the electrochemical oxidation of VB6, which shows that the oxidation peak current is significantly increased and the oxidation peak potential is positively shifted. The method has the advantages of good stability, easy preparation and low cost, high sensitivity and wide linear range, and can be used for the determination of VB6 content.

【技术实现步骤摘要】
聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极及其制备方法和应用
本专利技术属于电化学分析领域，具体涉及聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极及其制备方法和应用。
技术介绍
盐酸吡哆辛，别名维生素B6(VB6)，它是某些氨基酸的氨基转移酶和消旋酶的补酶，参于氨基酸及脂肪的代谢，可有效治疗妊娠疾病，经前期症状综合症，肌肉无力等。但人体摄入盐酸吡哆辛量过多过少都会引起疾病，因此，准确测定盐酸吡哆辛的含量，对其药理研究和用量有一定的实际意义。目前，文献中报道测定盐酸吡哆辛的方法有：紫外分光光度法、酶法、反向流动注射化学发光法、高效液相色谱、电化学方法等。其中电化学方法具有操作简便快速、灵敏度高等特点，但存在检出限高且检测范围窄等问题。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极，同时提供其相应的制备方法和应用是本专利技术的另一专利技术目的。基于上述目的，本专利技术采取以下技术方案：聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极，所述电极的表面修饰有聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合物。制备聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极的方法，包括以下步骤：1）将预处理后的电极置于浓度为1.0×10-3mol/L~8.0×10-3mol/LL-赖氨酸的PBS溶液中，于扫描电位-0.7～2.2V、扫描速度80~120mV/s下，循环扫描，淋洗、晾干，得聚L-赖氨酸修饰的电极；2）将步骤1）聚L-赖氨酸修饰的电极置于单体浓度为1.0×10-3mol/L~8.0×10-3mol/L天冬氨酸的PBS溶液中，于扫描电位-1.0～1.5V、扫描速度80~120mv/s下，循环扫描，淋洗、晾干，即得聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极。步骤1）中PBS溶液的pH值为9.0，循环扫描12圈；步骤2）中PBS溶液的pH值为6.84，循环扫描15圈，步骤1）和2）淋洗时，采用的淋洗剂为二次蒸馏水。步骤1）电极的预处理方法：将电极依次用金相砂纸、粒度为0.05μm的Al2O3粉与水的混合物抛光，再依次用硝酸溶液、无水乙醇、二次蒸馏水超声清洗，然后二次蒸馏水冲洗，自然晾干即可。所述电极为玻碳电极。将修饰后的电极作为工作电极，与对电极和参比电极组成三电级体系，用于测定盐酸吡哆辛。所述对电极为铂柱电极，参比电极为饱和甘汞电极。以修饰后的电极作为工作电极，测定盐酸吡哆辛的方法为：1）在含有不同浓度的盐酸吡哆辛的pH4.2的ABS溶液中，利用差分脉冲伏安法测定不同浓度的盐酸吡哆辛溶液的氧化峰电流；2）绘制盐酸吡哆辛的氧化峰电流与浓度的线性关系图，计算出线性关系式；3）根据氧化峰电流值计算得到待测盐酸吡哆辛溶液的浓度。差分脉冲伏安法的扫描电位0.6～1.4V、扫描速度0.1V/s。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：1）本专利技术将L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰电极，VB6在聚L-赖氨酸/天冬氨酸修饰电极上的电化学反应的电子转移数与质子数相等，聚L-赖氨酸/天冬氨酸修饰电极对VB6有良好的催化活性，因此，电化学响应好，峰电位相对于裸电极正移0.021V，响应峰电流是裸电极的12倍；将其制成电化学传感器用于VB6的灵敏测定，该复合修饰电极对VB6的电化学氧化过程具有良好的催化性能，表现为其氧化峰电流显著提高和氧化峰电位正移。实验结果表明，该电化学传感器具有稳定性好、易制备和成本低等优点。所建立的分析方法具有高的灵敏度和宽的线性范围，可用于VB6含量的测定；2）制备方法简单、成本低、易操作。附图说明图1为不同电极的CV曲线；图2为图1中曲线a和b的局部图；图3为不同扫速下VB6在PLL/PL-ASP/GCE上的CV图；图4为VB6氧化峰电流与扫速平方根的关系曲线图；图5为VB6在不同pH的缓冲溶液中的循环伏安图；图6为图5的曲线a、c、e和g的局部图；图7为图5的曲线b、d、f、h的局部图；图8为VB6氧化峰电流与pH的关系曲线图；图9为不同浓度VB6在PLL/PL-ASP/GCE的差分脉冲伏图；图10为图9中a-e的局部图；图11为VB6氧化峰电流与浓度的关系曲线图；图12为不同修饰电极的交流阻抗图。具体实施方式仪器：CHI660E电化学工作站(上海辰华仪器有限公司)，KQ-2200E型超声波清洗器(昆山市)，玻碳电极(∮=3mm)，饱和甘汞电极(SCE，231型，上海光电仪器厂)，铂电极。试剂：L-赖氨酸（上海市，国药集团化学试剂有限公司），天冬氨酸（上海市，国药集团化学试剂有限公司），盐酸吡哆辛(VB6，阿拉丁试剂厂)，氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、醋酸钠、冰醋酸等其它试剂均为分析纯，溶液用二次蒸馏水配制。溶液的配制：分别用电子天平称取8.96gNa2HPO4·12H2O和0.0625gNaH2PO4·2H2O固体，将两者混合，用二次蒸馏水溶解配置250mLpH=9.0的PBS溶液。分别用电子天平称取8.96gNa2HPO4·12H2O和9.14gNaH2PO4·2H2O固体，将两者混合，用二次蒸馏水溶解配置250mL的pH=6.84的PBS溶液。电子天平称取0.0402g的L-赖氨酸固体，将其溶解于pH=9.0的PBS溶液中配置50mL浓度为5×10-3mol/L的L-赖氨酸的pH为9.0的PBS溶液。电子天平称取0.00667g的天冬氨酸固体，将其溶解于pH=6.84的PBS溶液中配置50mL浓度为1×10-3mol/L的天冬氨酸的pH为6.84的PBS溶液。精确称量0.00823g盐酸吡哆辛，将盐酸吡哆辛用二次蒸馏水溶解配置成2mL的2×10-2moL/L盐酸吡哆辛原液（VB6原液），放入低温环境中待用。实施例1聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极，所述电极的表面修饰有聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合物，电极为玻碳电极。制备聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极的方法，包括以下步骤：1）电极的预处理方法：将玻碳电极（GCE，直径为3mm）依次用金相砂纸、粒度为0.05μm的Al2O3粉与水的混合物抛光成镜面，再依次用硝酸溶液（硝酸溶液是由市售质量分数为68%的浓硝酸添加等体积的蒸馏水得到）、无水乙醇和蒸馏水超声清洗各2min，再用二次蒸馏水冲洗，自然晾干；2）将预处理后的玻碳电极置于浓度为5.0×10-3mol/LL-赖氨酸的PBS溶液（PBS溶液的pH值为9.0）中，于扫描电位-0.7～2.2V、扫描速度120mV/s下，循环扫描12圈，用水淋洗、晾干，得聚L-赖氨酸修饰的电极(PLL/GCE)；3）将步骤2）聚L-赖氨酸修饰的玻碳电极置于浓度为1.0×10-3mol/L天冬氨酸的PBS溶液（PBS溶液的pH值为6.84）中，于扫描电位-1.0～1.5V、扫描速度100mv/s下，循环扫描15圈，用水淋洗、晾干，即得聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极(PLL/PL-ASP/GCE)。将修饰后的玻碳电极作为工作电极，与对电极和参比电极组成三电级体系，制成电化学传感器用于测定盐酸吡哆辛，所述对电极为铂柱电极，参比电极为饱和甘汞电极。以修饰后的电极作为工作电极，测定盐酸吡哆辛的方法为：1）在含有不同浓度的盐酸吡哆辛的pH4.2的ABS溶液中，于扫描电位0.6～1.4V、扫描速度0.1V/s下，利用差分脉冲伏安法测定不同浓度的盐酸吡哆辛溶液的氧化峰电流；2）绘制本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.聚L‑赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极，其特征在于，所述电极的表面修饰有聚L‑赖氨酸/天冬氨酸复合物。

【技术特征摘要】
1.聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极，其特征在于，所述电极的表面修饰有聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合物。2.制备权利要求1所述的聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将预处理后的电极置于浓度为1.0×10-3mol/L~8.0×10-3mol/LL-赖氨酸的PBS溶液中，于扫描电位-0.7～2.2V、扫描速度80mV/s~120mV/s下，循环扫描，淋洗、晾干，得聚L-赖氨酸修饰的电极；2）将步骤1）聚L-赖氨酸修饰的电极置于单体浓度为1.0×10-3mol/L~8.0×10-3mol/L天冬氨酸的PBS溶液中，于扫描电位-1.0～1.5V、扫描速度80mv/s~120mv/s下，循环扫描，淋洗、晾干，即得聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极。3.如权利要求2所述的制备聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极的方法，其特征在于，步骤1）中PBS溶液的pH值为9.0，循环扫描12圈；步骤2）中PBS溶液的pH值为6.84，循环扫描15圈，步骤1）和2）淋洗时，采用的淋洗剂为二次蒸馏水。4.如权利要求2所述的制备聚L-赖氨酸/天冬氨酸复合修饰的电极的方法，其特征在于，步骤1）电极的预处理方法：...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢先春，许春萱，宋力，彭洋洋，李智玲，
申请(专利权)人：信阳师范学院，
类型：发明
国别省市：河南,41