The invention discloses a method for purifying high purity polyphenols from guava leaves, which comprises the following steps: (1) drying guava leaves after washing, grinding into powder and sieving; (2) extracting by microwave-assisted extraction technology, removing residue through gauze filtration and collecting extract; (3) enzymatic hydrolysis, freezing and centrifuging, and extracting supernatant. Polyphenol crude extracts were obtained after concentration; (4) Redissolved in deionized water, adsorbed by macroporous resin, separated and purified by high-speed countercurrent chromatography, separated and purified by preparative liquid chromatography, and the monomers were qualitatively and quantitatively determined by ultra-high performance liquid chromatography four-stage rod time-of-flight tandem mass spectrometry. Analysis. The method has the advantages of low energy consumption, high extraction speed, high yield and purity. The purity of polyphenols from guava leaves is more than 90%.
【技术实现步骤摘要】
一种高纯度番石榴叶多酚类物质的提纯方法
本专利技术属于番石榴叶化合物提纯领域,尤其涉及一种高纯度番石榴叶多酚类物质的提纯方法。
技术介绍
番石榴(PsidiumguajavaL.)属于桃金娘科,原产于美洲,现在我国广东、广西、四川、福建等地均有栽培,其叶可全年采摘,资源十分丰富。番石榴叶为番石榴的干燥叶及带叶嫩茎,其主要成分是芳香类二级代谢产物多酚类物质,实验研究证明,正是这些酚类化合物赋予番石榴叶多种功效,如软化血管,降低血脂、血糖和胆固醇,抗氧化性,抗菌活性,治疗咳嗽、减肥等。因此,提取番石榴中的多酚物质会在医药、保健品、食品和化妆品领域都具有广阔的应用前景。作为天然活性成分,番石榴多酚已经在国内外取得了一定的研究进展,然而由于以往提取方法效率低或要求高等缺陷,在工业上的使用和推广受到了极大的限制。目前,鲜有高纯度番石榴叶多酚化合物的提取纯化方法。传统的分离纯化多酚类化合物的方法有液液萃取法、薄层色谱法和柱色谱法等,这些方法存在耗时、耗费溶剂、产量低、操作复杂及难以实现工业化等缺点。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是,克服以上
技术介绍
中提到的不足和缺陷,提供一种高纯度番石榴叶多酚类物质的提纯方法。为解决上述技术问题,本专利技术提出的技术方案为提供一种高纯度番石榴叶多酚类物质的提纯方法,包括如下步骤:(1)将番石榴叶洗净后烘干、粉碎成粉末后,过筛;(2)取所述步骤(1)后得到的番石榴叶粉末,通过微波辅助提取技术浸提,经纱布过滤去除残渣收集提取液;(3)将所述步骤(2)收集后得到的提取液用果胶酶进行酶解,冷冻离心后取上清液,浓缩后得到多酚粗提物;( ...
【技术保护点】
1.一种高纯度番石榴叶多酚类物质的提纯方法,包括如下步骤:(1)将番石榴叶洗净后烘干、粉碎成粉末后,过筛;(2)取所述步骤(1)后得到的番石榴叶粉末,通过微波辅助提取技术浸提,经纱布过滤去除残渣收集提取液;(3)将所述步骤(2)收集后得到的提取液用果胶酶进行酶解,冷冻离心后取上清液,浓缩后得到多酚粗提物;(4)将所述步骤(3)浓缩后得到的多酚粗提物复溶于去离子水中,采用大孔吸附树脂进行吸附,得到的多酚提取物采用高速逆流色谱法进行一次分离纯化,得到不同馏分,然后采用制备型液相色谱法对每个馏分进行二次分离纯化,得到番石榴叶多酚类化合物单体,即所述的高纯度番石榴叶多酚类物质。
【技术特征摘要】
1.一种高纯度番石榴叶多酚类物质的提纯方法,包括如下步骤:(1)将番石榴叶洗净后烘干、粉碎成粉末后,过筛;(2)取所述步骤(1)后得到的番石榴叶粉末,通过微波辅助提取技术浸提,经纱布过滤去除残渣收集提取液;(3)将所述步骤(2)收集后得到的提取液用果胶酶进行酶解,冷冻离心后取上清液,浓缩后得到多酚粗提物;(4)将所述步骤(3)浓缩后得到的多酚粗提物复溶于去离子水中,采用大孔吸附树脂进行吸附,得到的多酚提取物采用高速逆流色谱法进行一次分离纯化,得到不同馏分,然后采用制备型液相色谱法对每个馏分进行二次分离纯化,得到番石榴叶多酚类化合物单体,即所述的高纯度番石榴叶多酚类物质。2.根据权利要求1所述的提纯方法,其特征在于,所述步骤(1)中,过筛为过40-60目筛。3.根据权利要求1所述的提纯方法,其特征在于,所述步骤(2)中,通过微波辅助提取技术浸提的具体操作步骤为:按1:20-22g/mL的料液比加入体积浓度为50%的乙醇作为浸提剂对番石榴叶粉末进行浸提,浸提的微波功率为490-650W,提取时间为130s-200s。4.根据权利要求1所述的提纯方法,其特征在于,所述步骤(2)中,浸提次数为2-4次。5.根据权利要求1所述的提纯方法,其特征在于,所述步骤(3)中,酶解温度为37-37.5℃,冷冻离心的转速为8000-10000r/min,时间为5-8min。6.根据权利要求1-5中任一项所述的提纯方法,其特征在于,所述步骤(4)中,采用大孔吸附树脂进行吸附的具体操作包括如下步骤:通过聚苯乙烯型中、低极性大孔吸附树脂柱进行吸附,首先对大孔吸附树脂进行预处理,然后树脂上柱,样液上柱,经大孔吸附树脂的解吸,大孔吸附树脂的清洗、再生以及洗脱液后续处理后,得到多酚提取物。7.根据权利要求6所述的提纯方法,其特征在于,采用NKA-9大孔吸附树脂柱进行吸附;所述预处理是对大孔吸附树脂进行除杂和筛除干瘪颗粒以进行活化;所述树脂上柱...
【专利技术属性】
技术研发人员:周智广,曾伟民,李交昆,胡芳,申丽,黄干,余润兰,吴学玲,刘元东,吴晨晨,李芳,刘阿娟,邱冠周,
申请(专利权)人:中南大学,
类型:发明
国别省市:湖南,43
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