The invention belongs to the preparation technology field of precious metal nano-materials and ratio fluorescence probe, in particular relates to a method for preparing a melamine ratio fluorescence probe based on DNA stabilized silver nano-clusters and Rhodamine 6G complex. Silver nanoclusters / Rhodamine 6G composites were synthesized by electrostatic self-assembly. Melamine formed hydrogen bonds with thymine in DNA on the surface of silver nanoclusters. Rhodamine 6G was dissociated from the surface of silver nanoclusters, the fluorescence resonance energy transfer was destroyed, and the fluorescence of silver nanoclusters was restored. This process has little effect on the fluorescence of rhodamine 6G. As a reference signal, the fluorescence of silver nanoclusters acts as a response signal. By fitting the linear relationship between the intensity ratio of fluorescence emission peak of silver nanoclusters and Rhodamine 6G and the molar concentration of melamine, a fluorescence probe for melamine ratio was constructed. The probe has the advantages of simple preparation process, low cost and high sensitivity. It can be developed as a novel fluorescent probe for the determination of melamine in real samples.
【技术实现步骤摘要】
基于银纳米簇复合物的三聚氰胺比率荧光探针的制备方法
:本专利技术属于贵金属纳米材料和比率荧光探针的制备
,具体涉及一种基于DNA稳定的银纳米簇与罗丹明6G复合物的三聚氰胺比率荧光探针的制备方法,其制备的探针可用于三聚氰胺的高灵敏度检测。
技术介绍
:三聚氰胺是一种三嗪含氮杂环有机化合物,氮含量高达66%,常用于塑料、杀虫剂和肥料等诸多行业。添加1%的三聚氰胺可在食品中增加4%以上的蛋白含量,某些企业使用三聚氰胺代替蛋白质来获得高额利润。美国食品和药物管理局和中国卫生部对婴幼儿配方奶粉的安全限值为1毫克/千克,成人食品为2.5毫克/千克。检测日常食品中三聚氰胺的含量对人们的健康成长具有重要的意义。目前,检测三聚氰胺的方法主要包括高效液相色谱法、气相色谱与质谱联用法、分光光度法、表面增强拉曼散射法等。这些传统的检测方法普遍存在样品制备耗时、操作复杂、仪器昂贵、检测成本高等问题,发展一种低成本、简单、快速和高效的三聚氰胺检测方法已成为当前亟待解决的关键技术问题。荧光法是利用物质本身或其表面修饰的官能团与检测物反应引起荧光强度或谱线位置发生变化,从而进行物质鉴别和含量测定的分析方法。该方法具有操作简便、灵敏度高等优点。文献检索表明:Wu等利用上转换纳米粒与金纳米粒之间荧光共振能量转移检测三聚氰胺(Anupconversionfluorescenceresonanceenergytransfernanosensorforonestepdetectionofmelamineinrawmilk,QiongqiongWu,QianLong,HaitaoLi,Youy ...
【技术保护点】
1.一种基于银纳米簇复合物的三聚氰胺比率荧光探针的制备方法,其特征在于,该方法具体包括以下步骤:(1)制备DNA稳定的银纳米簇:在0℃下,向1毫升二次蒸馏水中加入一定量的硝酸银溶液与DNA溶液,磁力搅拌20分钟以形成均质混合液,然后加入新配制的硼氢化钠溶液,在避光处剧烈搅拌反应20分钟。所得产物溶液采用0.4微米的滤膜过滤,滤液经截留分子量为5000道尔顿的透析袋透析处理,以去除未反应的实验原料,将透析袋中溶液进行旋蒸处理以去除90%溶剂,再进行冷冻干燥得到银纳米簇干样,在4℃避光条件下储存备用;(2)制备银纳米簇/罗丹明6G复合物:将步骤(1)中制得的银纳米簇溶解在200微升二次蒸馏水中,加入100微升柠檬酸盐水缓冲液混匀,再加入100微升不同浓度的罗丹明6G溶液,混合液在避光处反应30分钟,产物溶液采用离心分离、乙醇洗涤和真空干燥处理,得到银纳米簇/罗丹明6G复合物;(3)将步骤(2)中制得的复合物分散在100微升柠檬酸盐水缓冲液中,在避光处孵化30分钟,分别测定不同罗丹明6G摩尔浓度下,复合物均质溶液的荧光发射光谱,优化双发射荧光峰强度以确定银纳米簇与罗丹明6G的配比;(4)在室 ...
【技术特征摘要】
1.一种基于银纳米簇复合物的三聚氰胺比率荧光探针的制备方法,其特征在于,该方法具体包括以下步骤:(1)制备DNA稳定的银纳米簇:在0℃下,向1毫升二次蒸馏水中加入一定量的硝酸银溶液与DNA溶液,磁力搅拌20分钟以形成均质混合液,然后加入新配制的硼氢化钠溶液,在避光处剧烈搅拌反应20分钟。所得产物溶液采用0.4微米的滤膜过滤,滤液经截留分子量为5000道尔顿的透析袋透析处理,以去除未反应的实验原料,将透析袋中溶液进行旋蒸处理以去除90%溶剂,再进行冷冻干燥得到银纳米簇干样,在4℃避光条件下储存备用;(2)制备银纳米簇/罗丹明6G复合物:将步骤(1)中制得的银纳米簇溶解在200微升二次蒸馏水中,加入100微升柠檬酸盐水缓冲液混匀,再加入100微升不同浓度的罗丹明6G溶液,混合液在避光处反应30分钟,产物溶液采用离心分离、乙醇洗涤和真空干燥处理,得到银纳米簇/罗丹明6G复合物;(3)将步骤(2)中制得的复合物分散在100微升柠檬酸盐水缓冲液中,在避光处孵化30分钟,分...
【专利技术属性】
技术研发人员:桂日军,付永鑫,金辉,卜祥宁,
申请(专利权)人:青岛大学,
类型:发明
国别省市:山东,37
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