CD4+T淋巴细胞特征蛋白在鉴定潜伏结核感染和活动性肺结核中的应用制造技术

本发明专利技术公开了CD4+T淋巴细胞特征蛋白在鉴定活动性肺结核和潜伏结核感染中的应用。本发明专利技术提供了检测integrin beta‑3和/或integrin‑linked kinase表达量的物质在制备区分或鉴定或辅助区分或鉴定活动性肺结核患者和结核潜伏感染者产品中的应用。本发明专利技术发现了integrin beta‑3和integrin‑linked kinase蛋白可以区分LTBI患者和初治活动性肺结核患者，这为诊断LTBI患者和初治活动性肺结核患者提供了新的诊断标准。

Application of CD4+T lymphocyte characteristic protein in identification of latent tuberculosis infection and active pulmonary tuberculosis

The invention discloses the application of CD4 + T lymphocyte characteristic protein in the identification of active pulmonary tuberculosis and latent tuberculosis infection. The present invention provides the application of substances for detecting integrin beta_3 and/or integrin_linked kinase expression in the preparation of products for differentiating or identifying active pulmonary tuberculosis patients and latent tuberculosis infections. The invention discovers that integrin beta_3 and integrin_linked kinase proteins can distinguish LTBI patients from newly-treated active pulmonary tuberculosis patients, which provides a new diagnostic standard for the diagnosis of LTBI patients and newly-treated active pulmonary tuberculosis patients.

【技术实现步骤摘要】
CD4+T淋巴细胞特征蛋白在鉴定潜伏结核感染和活动性肺结核中的应用
本专利技术属于生物
，尤其涉及CD4+T淋巴细胞特征蛋白在鉴定活动性肺结核和潜伏结核感染中的应用。
技术介绍
2015年世界卫生组织在“MTB(Mycobacteriumtuberculosis，Mtb)潜伏感染(1atentTBinfection，LTBI)诊治指南”中，将LTBI定义为没有活动性结核病的临床表现，但机体持续存在对MTB抗原刺激的免疫应答的一种状态。据世界卫生组织估计，全球约1/3的人感染结核结核分枝杆菌，其中超过95％表现为结核潜伏性感染，其中5～10％的LTBI感染者最终会发展成为活动性结核，成为主要的传染源。LTBI感染者众多，是目前结核病有效防控的关键与难点所在，因此，准确诊断结核菌潜伏感染，对于结核病的预防具有十分重要的意义。由于潜伏感染者缺乏特异性症状，而且目前诊断结核潜伏感染还没有统一的标准和方法，因此很难在健康人群中快速检测出结核潜伏感染患者。临床实践中用于LTBI筛查的方法主要有：结核菌素皮肤试验(Mantouxtuberculinskintest,TST)、-干扰素释放试验(Interferon-gammareleaseassays,IGRA)。TST简单易行，但无法区分MTB感染和卡介苗(BacilleCalmetteGuerin,BCG)接种，在免疫缺陷人群中的敏感性较低。在中国结核病高度流行地区，由于广泛接种BCG，TST会造成假阳性；而在HIV感染患者、自身免疫性疾病、老人和幼儿等免疫力低下的人群中容易出现假阴性。另外，TST检测还存在费时(48～72小时)、需要受试者回访、皮试操作和结果解释存在主观依赖性等缺点。IGRA检测LTBI的特异性高于TST，且不受BCG接种以及非结核分枝杆菌(nontuberculoausmycobacteria，NTM)感染的影响。但是，由于目前的IGRA实验只检测IFN-γ一种分子，敏感性低、容易受机体其他因素干扰，而且仅仅只能够检测到结核杆菌的感染，不能够区分活动性结核和潜伏性结核感染。而且，IGRA实验需要抽血获取淋巴细胞、要求专业的操作人员和具备相应条件的实验室、样品必须在采集后8小时内完成等缺点，现阶段仍未能完全取代TST。另外，现阶段研究的样本都非常小，也没有诊断LTBI的金标准。因此，对于IGRA还有待进一步研究。另外，虽然也有新的标志物如：白细胞介素-2(IL-2)、HSP16.3、干扰素诱导蛋白10(IP-10)及单核细胞趋化蛋白2(MCP-2)等的出现，但是仍缺乏足够的临床证据。结核杆菌感染主要引起细胞免疫，T淋巴细胞在受到抗原刺激后产生分化、增殖、合成和分泌一系列细胞因子，产生特异性的细胞免疫。其中，CD4+T淋巴细胞在分泌淋巴因子，激活、趋化巨噬细胞，促进巨噬细胞完全杀灭结核杆菌等方面起到重要的作用。整合素(integrin)，是介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质黏附作用的膜表面黏附分子，同时参与细胞的信号转导、生长、分化、凋亡、伸展和移动、炎症、血栓形成、肿瘤转移和创伤愈合等一系列重要生理和病理过程。αIIbβ3是整合素家族中研究最多的分子，是整合素家族中的代表。αIIbβ3是血小板膜表面表达最丰富的整合素分子，它在血小板粘附、聚集、释放等止血功能中发挥着重要的作用。研究发现整合素αⅡbβ3的信号可分为由膜内向膜外的信号和由膜外向膜内的信号，前者由激动剂诱导引起血小板活化，改变整合素αIIbβ3的构像，使整合素αIIbβ3与其配体粘附；后者由配体与整合素αIIbβ3受体连结后而引发产生一系列血小板功能。整合素连接激酶(integrin-linkedkinase，ILK)，是整合素信号通路中一个重要的调节蛋白，在整合素信号通路的活化过程中发挥了至关重要的调节作用。它是一个由452个氨基酸组成的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在全身多种组织中高表达，蛋白结构域分析提示，ILK包含一个N端锚蛋白重复结构(ankyrinrepeatdomain，ARD)和一个C末端与整合素胞质尾部结合的激酶样结构。它通过与整合素亚单位的结合共同介导细胞与细胞外基质(extracellularmatrixc,ECM)，甚至细胞与细胞之间的信号传导，从而影响细胞外信号向下游的传递，调节细胞的生长、增殖、分化、生存、迁移、凋亡、黏附和侵袭。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供检测integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase表达量的物质的用途。本专利技术提供的检测integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase表达量的物质在制备区分或鉴定或辅助区分或鉴定活动性肺结核患者和结核潜伏感染者产品中的应用。本专利技术的另一个目的是提供检测integrinalpha-IIb(整合素alpha-IIb)、integrinbeta-3(整合素beta-3)和/或integrin-linkedkinase(整合素连接激酶)表达量的物质的用途。本专利技术提供的检测integrinalpha-IIb、integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase表达量的物质在制备检测或辅助检测是否为肺结核患者的产品中的应用；或本专利技术提供的检测integrinalpha-IIb、integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase表达量的物质在制备检测或辅助检测是否为结核潜伏感染者的产品中的应用。上述应用中，所述检测integrinalpha-IIb表达量的物质为下述1)或2)：1)利用蛋白质质谱检测integrinalpha-IIb表达量所需的试剂和/或仪器；2)利用WesternBlot检测integrinalpha-IIb表达量所需的试剂和/或仪器；和/或，所述检测integrinbeta-3表达量的物质为下述3)或4)：3)利用蛋白质质谱检测integrinbeta-3表达量所需的试剂和/或仪器；4)利用WesternBlot检测integrinbeta-3表达量所需的试剂和/或仪器；和/或，所述检测integrin-linkedkinase表达量的物质为下述5)或6)：5)利用蛋白质质谱检测integrin-linkedkinase表达量所需的试剂和/或仪器；6)利用WesternBlot检测integrin-linkedkinase表达量所需的试剂和/或仪器。上述应用中，所述integrinalpha-IIb的表达量为CD4+T淋巴细胞中表达量；和/或，所述integrinbeta-3的表达量为CD4+T淋巴细胞中表达量；和/或，integrin-linkedkinase的表达量为CD4+T淋巴细胞中表达量。本专利技术第3个目的是提供以integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase作为标志物的区分或辅助区分活动性肺结核患者和结核潜伏感染者的物质的用途。本专利技术提供了以integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase作为标志物的区分或辅助区分活动性肺结核患者和结核潜伏感染者的物质在制备区分或辅助区分活动性肺结核患者和结核潜伏感染者产品中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测integrin beta‑3和/或integrin‑linked kinase表达量的物质在制备区分或鉴定或辅助区分或鉴定活动性肺结核患者和结核潜伏感染者产品中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase表达量的物质在制备区分或鉴定或辅助区分或鉴定活动性肺结核患者和结核潜伏感染者产品中的应用。2.检测integrinalpha-IIb、integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase表达量的物质在制备检测或辅助检测是否为肺结核患者的产品中的应用；或检测integrinalpha-IIb、integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase表达量的物质在制备检测或辅助检测是否为结核潜伏感染者的产品中的应用。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述检测integrinalpha-IIb表达量的物质为下述1)或2)：1)利用蛋白质质谱检测integrinalpha-IIb表达量所需的试剂和/或仪器；2)利用WesternBlot检测integrinalpha-IIb表达量所需的试剂和/或仪器；和/或，所述检测integrinbeta-3表达量的物质为下述3)或4)：3)利用蛋白质质谱检测integrinbeta-3表达量所需的试剂和/或仪器；4)利用WesternBlot检测integrinbeta-3表达量所需的试剂和/或仪器；和/或，所述检测integrin-linkedkinase表达量的物质为下述5)或6)：5)利用蛋白质质谱检测integrin-linkedkinase表达量所需的试剂和/或仪器；6)利用WesternBlot检测integrin-linkedkinase表达量所需的试剂和/或仪器。4.根据权利要求1-3中任一所述的应用，其特征在于：所述integrinalpha-IIb的表达量为CD4+T淋巴细胞中表达量；和/或，所述integrinbeta-3的表达量为CD4+T淋巴细胞中表达量；和/或，integrin-linkedkinase的表达量为CD4+T淋巴细胞中表达量。5.以integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase作为标志物的区分或辅助区分活动性肺结核患者和结核潜伏感染者的物质在制备区分或辅助区分活动性肺结核患者和结核潜伏感染者产品中的应用；或以integrinalpha-IIb、integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase作为标志物的检测或辅助检测是否为肺结核患者的物质在制备检测或辅助检测是否为肺结核患者产品中的应用；或以integrinalpha-IIb、integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase作为标志物的检测或辅助检测是否为结核潜伏感染者的物质在制备检测或辅助检测是否为结核潜伏感染者产品中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述区分或辅助区分活动性肺结核患者和结核潜伏感染者的物质为检测integrinbeta-3和/或integrin-linkedkinase表达量的物质；或，所述检测或辅助检测是否为肺结核患者的物质为检测integrinalpha-IIb、integrinbeta-3和/或i...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄银霞，张宗德，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京胸科医院，
类型：发明
国别省市：北京,11