The invention provides a porous plate for pre - storing reagent microbeads and a method for preparing and using the porous plate. The porous plate includes: a container filled with a porous plate is filled with a first liquid and a micro bead of a loaded reagent is preintroduced at the bottom of the porous plate. The beads loaded with reagents can be solid microspheres, micro droplets or any combination of them. The first liquid is not mutually soluble with the beads of the reagents. The porous plate is sealed and stored, and users do not need to prepare and add screening reagent when using. The pre stored reagent microbeads can greatly reduce the consumption of reagents and samples. The reagent microbeads can be easily mixed with the subsequent introduction of microsamples. The volume of the conventional screening reaction can be reduced by 2 to 3 orders of magnitude. It can be widely used in protein crystallization screening, drug screening, microbial resistance screening and culture screening. Selection, array PCR, single cell analysis and other fields.
【技术实现步骤摘要】
一种预储存试剂微珠的多孔板及其制备和使用方法
本专利技术涉及高通量分析和筛选
,具体涉及一种基于预储存试剂的微体积反应筛选多孔板。技术背景组合化学、生物学、临床检验、药物学的反应筛查和大规模样品分析分选,大多需要手工配制试剂,耗费大量试剂和耗材,操作过程中产生的误差大。针对这一瓶颈,而发展起来的预先加入试剂的多孔板,避免了用户手工配制大量试剂的溶液操作,使用方便,保证了试剂量的精度,具有重要意义。然而,现有的预先存储试剂的多孔板,大多数为干燥存储,试剂消耗量较大,成本居高不下,进行筛选反应需要的样品体积大,存储的试剂容易发生变质,多孔板之间容易发生交叉污染。本专利技术创新的提出用油相包裹的微珠试剂,试剂可以以液态或固态微珠的形式长期保存,配合自动化微量加样技术,我们可以将反应体系缩小至纳升级别,成本低廉,在诸如药敏测试、多位点PCR筛查、细胞药物互作筛查、蛋白结晶筛选等应用领域具有广阔的推广使用前景。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于微体积反应筛选的预先储存试剂的多孔板,在多孔板中,预先在每个孔中以负载试剂微珠的形式引入反应筛选试剂,同时添加保护防挥发和交叉污染的油性液体,以长时间稳定存储。这一预先存储试剂多孔板在使用时,配合自动化微量加液技术,即可完成普通多孔板上的微体积反应筛选实验。这一预先存储试剂的多孔板,使用方便,试剂消耗量小,可以将常规筛选反应的体积降低2至3个数量级,可长时间稳定保存,有效防止了试剂的氧化变质和交叉污染。在蛋白质结晶筛选、药物互作筛选、微生物耐药筛查、培养条件筛选、阵列PCR、单细胞分析等领域具有广阔的应用前景 ...
【技术保护点】
1.一种预储试剂微珠的反应筛选多孔板,其特征在于,包括:在多孔板的每个单位容器中充满第一种液体和一个负载试剂微珠,所述的第一种液体的比重小于负载试剂微珠;所述的负载试剂的微珠体积范围为1纳升至5微升。
【技术特征摘要】
2016.12.27 CN 20161122788201.一种预储试剂微珠的反应筛选多孔板,其特征在于,包括:在多孔板的每个单位容器中充满第一种液体和一个负载试剂微珠,所述的第一种液体的比重小于负载试剂微珠;所述的负载试剂的微珠体积范围为1纳升至5微升。2.根据权利要求1所述的多孔板,其特征在于,所述的第一种液体是油性液体或者是与试剂微珠互不相溶的液体,其包括矿物油、液态烷烃、酯类、硅油、烷烯烃或饱和烃类半液态混合物等与水相互不相溶且比重小于水的液体。3.根据权利要求2所述的多孔板,其特征在于,所述的烷烯烃或饱和烃类半液态混合物指其状态在常温时介于固体及液体之间,熔点在4摄氏度及以上,包括固体石蜡、凡士林。4.根据权利要求1所述的多孔板,其特征在于,所述的试剂微珠包含水、固态微球、难挥发水相溶剂或高分子水溶性物质中任意一种或一种以上的组合,用于固定反应筛选试剂。5.根据权利要求4所述的多孔板,其特征在于,所述的难挥发水相溶剂或高分子水溶性物质的混合物,包括但不限于聚乙二醇、甘油、羟甲基纤维素、可溶性淀粉、低聚果糖、阿拉伯胶、二甲基亚砜(DMSO)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、六甲基磷酰三胺(HMPA)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)等。6.根据权利要求4所述的多孔板,其特征在于,所述的固态微球包括聚合物微球、二氧化硅微球、多孔微球、凝胶微球、磁性微球;所述的微球直径为50-1000微米。7.根据权利要求1所述的多孔板,其特征在于,所述的多孔板包括96孔、384孔、1536孔板及八联管、PCR管等,其底部包含平底、圆形...
【专利技术属性】
技术研发人员:杜文斌,奕巧莲,
申请(专利权)人:中国科学院微生物研究所,
类型:发明
国别省市:北京,11
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