信号序列捕获制造技术

本发明专利技术能够通过对先前构建的基因库或文库筛选在工业上感兴趣而使用常规筛选方法不太可能分离得到的分泌的、部分分泌的、或细胞表面展示的多肽（诸如酶、受体、细胞因子、肽激素等）的编码基因。本发明专利技术描述了由现有基因文库分离分泌的、部分分泌的、或细胞表面展示的多肽的编码基因的方法，其中使用体外多核苷酸插入反应来检测内源分泌信号序列，其中插入的多核苷酸包含无启动子且无分泌信号的分泌性报告基因。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
用于由基因文库鉴定并分离目的基因的方法，其中所述基因编码携带用于分泌或部分分泌的信号序列的多肽，所述方法包括下列步骤： ａ）提供基因组ＤＮＡ文库或ｃＤＮＡ文库； ｂ）在所述文库中插入包含编码分泌报告蛋白的无启动子且无分泌信号的多核苷酸的ＤＮＡ片段； ｃ）将包含插入ＤＮＡ片段的文库导入宿主细胞； ｄ）筛选并选择分泌或部分分泌有活性的分泌性报告蛋白的宿主细胞； ｅ）通过对插入的ＤＮＡ片段侧翼的ＤＮＡ测序，在选定宿主细胞中鉴定插入了分泌性报告基因的目的基因； ｆ）分离在步骤（ｅ）中鉴定的完整目的基因。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：F杜福纳，R威尔廷，K施诺尔，
申请(专利权)人：诺沃奇梅兹有限公司，
类型：发明
国别省市：DK[丹麦]