本发明专利技术是一种新的生产目的蛋白的植物生物反应器，为各种口服疫苗、药用多肽、防腐剂等经济上重要的蛋白的生产和应用提供一种高产量、低投入、高效益的途径。它是将目的蛋白基因以花生贮藏蛋白基因及相邻结构为载体，通过各种生物技术手段以同源重组或插入的方式整合入花生基因组，并在花生子叶中特异表达。通过标记基因筛选转基因植株，得到在子叶中表达目的基因的花生品种。带有目的基因的花生可直接食用以达到治病、免疫、保健的效果，生产防腐剂的花生用于加工生产可直接起到防腐作用。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因工程一种安全而高产量的生物反应器，其本身可食用。适用于大量生产可直接食用的口服型疫苗、药用多肽，也可生产其他保健或食品防腐蛋白。现有的生物反应器有如细菌、酵母菌、动物细胞等，产品不能直接食用，需经过提纯、加工等步骤，其产量有限。由它们生产的疫苗多经注射给药，既有到特定地点需专业人员操作的麻烦，又有价格高的缺点。而其他植物如番茄、马铃薯等蛋白含量有限。本专利技术的目的是提供一种可食的高产量的生物反应器，使人们在日常进食中达到营养与药用、保健等兼具的目的，同时免去上述各种麻烦。实施本专利技术的方案如下克隆贮藏蛋白的基因(根据需要选择主要的水溶性蛋白或致敏蛋白)及其两端相邻序列(包括启动子和3‘序列及其相邻的Mar序列)，或直接使用不包括贮藏蛋白基因本身的贮藏蛋白两端序列(即启动子和3‘序列及其相邻的Mar序列)，将目的蛋白基因放入贮藏蛋白的外显子或建成融合蛋白，或直接放入启动子后，并与玉米紫色素标记基因相连，该标记基因也在子叶中表达，或在茎中表达。将带有紫色标记基因和目的蛋白基因的载体通过细菌质粒的繁殖，提纯，通过基因枪、电击、花粉管通道导入法、原生质体转化等方法转入花生植株中，筛选紫茎或紫色花生仁植株，将之经过DNA、RNA、蛋白质等多级检测，得到生产目的基因的转基因植株。本专利技术的优势在于，一、一物多用。如生产口服乙肝疫苗的花生既可作为普通食物供给营养，又可起免疫的作用。二、产量高。花生是高蛋白食品，蛋白含量远高于其他水果蔬菜或淀粉类食物。三、生产容易。花生是普通的农作物，大田生产很容易。四、疫苗或药物应用容易。疫苗或药物可直接通过食用花生达到目的。五、加工容易。花生采收后只需经过正常的采后处理即可。这些优势使得一些现在昂贵的疫苗和药物可以普遍应用，以提高全体人民的健康水平。实例1以致敏蛋白基因为载体，将口服乙肝疫苗基因插入第2个外显子，并与以茎特异的启动子控制的玉米紫色调控基因连接，得到的片段为带有标记基因和乙肝疫苗基因的转化载体。将这个片段通过大肠杆菌质粒的扩增，纯化，再通过基因枪、电击、花粉管通道、原生质体转化的方式转化花生。然后筛选紫茎花生苗，待结果后收取已形成子叶的果实，进行DNA、RNA、蛋白质的三级定性和定量检测，确证各级乙肝疫苗产品的存在，得到能生产口服乙肝疫苗的花生子叶反应器。实例2以花生主要的贮藏蛋白基因为载体，将乳酸链球素(Nisin)基因插入其中的一个外显子，其他过程同实例1，得到的花生品系是生产防腐剂乳酸链球素的花生反应器。该品种的花生在用于加工各种花生制品或添加品时不需另外加防腐剂。还可从花生蛋白中大量提取防腐剂。权利要求一种利用生物技术以花生子叶为目的蛋白质生产平台的生物反应器，其特征在于以花生贮藏蛋白基因为载体，用各种生物技术将载有目的蛋白基因的载体整合入花生基因组，并在子叶中特异表达，并通过标记基因(如玉米紫色素调控基因或花生黑壳基因)的筛选获得在子叶中生产目的蛋白如口服乙肝疫苗、霍乱疫苗、抗癌药物多肽等的转基因花生品种。全文摘要本专利技术是一种新的生产目的蛋白的植物生物反应器，为各种口服疫苗、药用多肽、防腐剂等经济上重要的蛋白的生产和应用提供一种高产量、低投入、高效益的途径。它是将目的蛋白基因以花生贮藏蛋白基因及相邻结构为载体，通过各种生物技术手段以同源重组或插入的方式整合入花生基因组，并在花生子叶中特异表达。通过标记基因筛选转基因植株，得到在子叶中表达目的基因的花生品种。带有目的基因的花生可直接食用以达到治病、免疫、保健的效果，生产防腐剂的花生用于加工生产可直接起到防腐作用。文档编号A61P1/16GK1428428SQ0113189公开日2003年7月9日 申请日期2001年12月26日 优先权日2001年12月26日专利技术者严海燕, 薛乐勋 申请人:严海燕本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种利用生物技术以花生子叶为目的蛋白质生产平台的生物反应器，其特征在于：以花生贮藏蛋白基因为载体，用各种生物技术将载有目的蛋白基因的载体整合入花生基因组，并在子叶中特异表达，并通过标记基因（如玉米紫色素调控基因或花生黑壳基因）的筛选获得在子叶中生产目的蛋白如口服乙肝疫苗、霍乱疫苗、抗癌药物多肽等的转基因花生品种。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：严海燕，薛乐勋，
申请(专利权)人：严海燕，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]
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