一种壳寡糖-纳米银抗菌敷料及其制备方法技术

本发明专利技术药物涉及一种纳米银抗菌敷料，其制备方法包括以下步骤：(1)制备壳寡糖-纳米银复合物；(2)采用静电纺丝技术制备壳寡糖-纳米银抗菌敷料。壳寡糖为按照下述方法制得的：1)配制壳聚糖醋酸溶液：将70-90g壳聚糖溶于1.5-3.5L的2％的醋酸溶液；2)于配制的壳聚糖醋酸溶液中加入按质量比计的过氧化氢进行处理：壳聚糖醋酸溶液：过氧化氢＝25～30:3～4；3)于70℃下，将处理的产物水解80-100min，40-60℃下真空浓缩，抽滤所得的固形物用NaOH中和后，真空冷冻干燥得所述壳寡糖粉末。本发明专利技术所制备的壳寡糖-纳米银抗菌敷料生物安全性高、抗菌活性强、透气性好。可以加速创面愈合，促进组织修复和再生，可广泛应用于感染性创面。

【技术实现步骤摘要】
【专利说明】 专利
本专利技术涉及一种敷料及其制备方法，具体讲涉及一种壳寡糖-纳米银抗菌敷料及 其制备方法。
技术介绍
敷料因具有保护、吸收渗出物、抑制外来微生物感染以及促进皮肤愈合等功能而 广泛地应用于创面护理。创面敷料应具备生物兼容性和生物降解性，可促进创面愈合，能吸 收多余渗出物并溶胀，有高的孔隙度和透气性等特性。然而，传统的敷料材料例如绷带、棉 纱、软麻布、无纺布等除溶胀能力与透气性不能满足要求外，还不具备治疗和修复创面等特 性，因此远不能满足伤口护理的要求。 静电纺丝技术制备的纳米纤维膜其结构与天然细胞组织接近，具有比表面积大、 透气性好、保湿性强、能够促进创面愈合等优点，因而十分适用作创面敷料。已有报道将壳 寡糖(C0S)与聚乙烯醇(PVA)相结合静电纺丝技术用于制备纳米纤维敷料提高纳米纤维的 均匀性。（PVA)作为一种可生物降解树脂，在生物医用材料领域应用广泛，采用静电纺丝技 术制备的PVA纳米纤维可用于创面护理。壳寡糖(C0S)是壳聚糖经水解生成的低聚物，这类 低聚物具有较高的溶解度，生物相容性好，具有抗菌、止血、消炎、促进凝血和伤口愈合等特 性，可以增加创面组织的网状结构，增强伤口抗拉强度，能够激活巨噬细胞，产生TGF-βΙ等 生长因子，促进成纤维细胞增殖和胶原形成，从而促进创面愈合。纳米银粒子(AgNP)具有安 全性高，抗菌范围广，持续杀菌时间长，穿透力强表面积大等优点，能全面充分接触并攻击 病原体，从而发挥更强的生物效应，同时，与其他抗生素相比，纳米银具有光谱抗菌作用和 无耐药性等优点。综合上述事实，在含壳寡糖(C0S)与聚乙稀醇(PVA)的纳米纤维中结合进 纳米银粒子AgNP将成为一种具前景的创面敷料材料。 《InternationalJournalofNanomedicine》国际期刊上公开了"纳米银/壳寡 糖/聚乙烯醇纳米纤维作为抗菌敷料的临床前研究"。该研究以聚乙烯醇(PVA)为载体，通过 静电纺丝技术制备了一种含纳米银粒子的纳米纤维膜PVA/COS-AgNP用作抗菌敷料。经研究 与分析发现现有技术主要存在以下2点缺陷：1、尽管聚乙烯醇(PVA)已经被广泛用于生产纳 米纤维医用敷料，但含有潜在致敏成份;2、现有技术制备的纳米纤维所采用的市售壳寡糖 重均分子量在3000Da以上，存在分子量偏尚，分子量分布指数宽的缺点，导致其制备的纳米 纤维偏长，银粒子颗粒偏大，所制敷料的吸水性和透气性欠佳，无法更好满足医用要求。
技术实现思路
为克服现有技术的不足，本专利技术提供一种改进的壳寡糖-纳米银创面敷料的制备 方法。 实现本专利技术目的的技术方案如下： 本专利技术提供的一种制备纳米银抗菌敷料的方法，所述敷料包括由壳寡糖与硝酸银 制得的壳寡糖-纳米银复合物，其改进之处在于所述壳寡糖为按照下述方法制备的： 1)配制壳聚糖醋酸溶液： 将70-90g壳聚糖溶于1.5-3.5L的2%的醋酸溶液； 2)于步骤1)配制的壳聚糖醋酸溶液中加入按质量比计的过氧化氢处理：壳聚糖醋酸溶液:过氧化氢=25~30:3~4; 3)于70°C下，将步骤2)的处理产物水解80-100min，40-60°C下真空浓缩，抽滤的固 形物用NaOH中和后，真空冷冻干燥得所述壳寡糖粉末。本专利技术提供的第一优选技术方案中，所述壳寡糖-纳米银复合物的制备方法包括 下述步骤： 1)制备纳米银-壳寡糖复合物：搅拌下，30-80°C下，将0.5-2.(^所述壳寡糖与0.謂的硝酸银溶液反应，依次用丙 酮和乙醇洗涤，l〇〇°C下真空干燥24h得纳米银-壳寡糖复合物； 2)制备纳米银-壳寡糖复合物纺丝液：常温下，将按质量百分比计的3-5质量份所述纳米银-壳寡糖复合物与30-50% (w/v)的95-97质量份的聚维酮混合； 3)静电纺丝:于电压10-20KV、0.2-0.6mL/h流速和9-16cm接收距离下，用注射器对 步骤2)制得的纺丝液纺丝，得到的壳寡糖-纳米银纳米纤维； 4)经钴60辐照灭菌得纳米银抗菌敷料。 本专利技术提供的第二优选技术方案中， 1)所述步骤1)中： 将70-8(^壳聚糖溶于2.0-3.51^的2%的醋酸溶液； 2)所述步骤2)中：壳聚糖醋酸溶液:过氧化氢=25:4。本专利技术提供的第三优选技术方案中，所述步骤1)中：将80g壳聚糖溶于2.5L的2 % 的醋酸溶液;所述步骤2)中：壳聚糖醋酸溶液:过氧化氢=28:3。本专利技术提供的第四优选技术方案中，所述步骤3)中，水解90-100min后，40-50°C下 真空浓缩，抽滤，固形物用NaOH中和后，真空冷冻干燥得所述壳寡糖粉末。本专利技术提供的第五优选技术方案中，所述水解时间为95-100min，45-50°C下真空 浓缩。本专利技术提供的第六优选技术方案中，所述步骤1)中，所制得的1.0-2.0g壳寡糖与 0.1M的硝酸银溶液在70-80°C反应;所述步骤3)中，电压15-20KV和0.2-0.4mL/h流速。本专利技术提供的第七优选技术方案中，所述丙酮的体积为40~80mL。本专利技术提供的第八优选技术方案中，所述纤维直径lOOnm;纳米银颗粒粒径10nm， 本专利技术提供的第九优选技术方案中，所述壳寡糖的重均分子量为1000~2000。 与最接近的现有技术比，本专利技术提供的技术方案具有以下优异效果： 1.本专利技术制备的创面敷料制备方法，除从壳寡糖的制备方法、壳寡糖的重均分子 量的选取方面做了改进外、静电纺丝液的制备方面做了改进外，其纤维直径lOOnm，显著低 于所述最接近的现有技术的纤维直径130nm，因此纳米纤维分布更为均匀;纳米银颗粒直径 l〇nm，相比现有技术纳米银颗粒直径15.7nm，更小的纳米银颗粒有助于纳米颗粒更均匀附 着在纳米纤维上。 2.本专利技术制备的创面敷料对革兰氏阳性菌和阴性菌(金黄色葡萄球菌、化脓性链 球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌)具有良好的抑菌效果(抑菌圈达10~25mm); 3 .本专利技术制备的抗菌敷料具有溶胀性高、透气性强的特点：溶胀率达到652 %~ 706%，透气性达10.86~12.04X10-6g·h-1 ·cm-3 ·mmHg-1，本专利技术制备的抗菌敷料在透气 性和溶胀率方面均有显著提高。 4.本专利技术提供的创面敷料对人体正常细胞，如L929 (人皮肤成纤维细胞），没有毒 性(MTT法检测24h细胞存活率与空白对照组相当）； 5.本专利技术提供的创面敷料能加速大鼠机械创面愈合，在第7天愈合百分率高20-28% 〇【附图说明】 图1为本专利技术实施例1所制备的壳寡糖-纳米银抗菌敷料的SEM照片； 图2为本专利技术实施例1所制备的壳寡糖-纳米银抗菌敷料的TEM照片；图3为本专利技术实施例1-3细胞毒性测试的结果； 图4为大鼠创面愈合测试照片，从左到右依次为空白对照组、实施例1和实施例3所 制备的抗菌敷料处理后创面的愈合情况。【具体实施方式】 下面结合附图1-4对具体实施例作进一步详细说明，对本专利技术的技术方案进行清 楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基 于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其 他实施例，都属于本专利技术保护的范围。 实施例1制备壳寡糖:将70g壳聚糖粉体溶于1.75L的2 %的醋酸溶液，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备纳米银抗菌敷料的方法，所述敷料包括由壳寡糖与硝酸银制得的壳寡糖‑纳米银复合物，其特征在于，所述壳寡糖为按照下述方法制得的：1)配制壳聚糖醋酸溶液：将70‑90g壳聚糖溶于1.5‑3.5L的2％的醋酸溶液；2)于步骤1)配制的壳聚糖醋酸溶液中加入按质量比计的过氧化氢进行处理：壳聚糖醋酸溶液：过氧化氢＝25～30:3～4；3)于70℃下，将步骤2)的处理产物水解80‑100min，40‑60℃下真空浓缩，抽滤所得的固形物用NaOH中和后，真空冷冻干燥得所述壳寡糖粉末。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李沉纹，卢来春，王庆，崔欢欢，吴国菻，胡大强，向明凤，徐靖，宋宏宇，
申请(专利权)人：中国人民解放军第三军医大学第三附属医院，
类型：发明
国别省市：重庆;85