极地雪藻固定化保种方法技术

本发明专利技术属于微藻养殖领域，尤其涉及一种极地雪藻固定化保种方法。极地雪藻传统保种方法存在很多缺点：保种时间短，为1-2年，营养盐消耗快，培养基易老化，需频繁更换培养基，工作量大，细胞存活率低，易污染。本发明专利技术用蛋白胨代替传统的褐藻酸钠或琼脂作为主要固定剂，且在培养基中增加了柠檬酸铁、山梨酸钾、葡萄糖、海泥抽提液、土壤抽出液等营养成分，并添加了乙二醇作为抗冻剂，接种后的培养基置于温度为-50±2℃、光照强度200-400lx的低温、弱光培养箱中保存。新方法能显著提高藻细胞的存活率，大大降低工作量，不易污染，种质纯正，保种时间长达6-8年而且保种成本降为原来的1/3。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种极地雪藻固定化保种所用软蛋白胨固体培养基，其特征在于配方如下：A溶液：NH4NO340毫克，NaNO35毫克，尿素5毫克，KH2PO41.8毫克，Na2SiO38毫克，NaHCO3500毫克，九二0植物生长刺激素8国际单位，山梨酸钾10毫克，葡萄糖50毫克、海藻酸丙二醇酯15毫克，环己基氨基磺酸钠20毫克，蜂胶9毫克，麦芽糖醇8毫克，硬脂酰乳酸钠8毫克，焦磷酸铁4毫克，柠檬酸钾6毫克，乙酸钠5毫克，山梨糖醇液1毫升，三聚甘油单硬脂酸酯10毫克，人尿1毫升，海泥抽取液1毫升，土壤抽出液2毫升，煮沸纯净淡水1000毫升；B溶液：即f/2微量元素溶液：ZnSO4·4H2O23毫克，MnCl2·4H2O178毫克，CuSO4·5H2O10毫克，FeC6H5O7·5H2O3.9克，Na2MoO4·2H2O7.3毫克，CoCl2·6H2O12毫克，Na2EDTA4.35克，蒸馏水1000毫升；将上述A、B溶液煮沸消毒后，装入高压灭菌过的棕色试剂瓶中置于4℃冰箱低温保存；C溶液配制完后装入高压灭菌过的棕色试剂瓶，置于4℃低温冰箱备用；从冰箱中取出上述A和B两种溶液进行混合，使用前两个棕色瓶均充分摇匀，取A溶液1000毫升，B溶液1毫升，混合于1500毫升的三角烧瓶中；混合液用1％的氢氧化钠溶液调节值到7.5左右，按重量比6‰的比例称重蛋白胨，加入三角烧瓶中，搅拌均匀，再加入重量比0.5‰的乙二醇，搅拌3分钟，后置于电热炉上加热融化；培养液分装于100毫升的三角烧瓶中，分装量30毫升，三角烧瓶瓶口用无菌培养容器封口膜封口；将上述配制好的固体培养基置于高压灭菌锅中灭菌，温度121℃，灭菌20‑30分钟，取出冷却，即可。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王培磊，王博仑，
申请(专利权)人：临沂大学，
类型：发明
国别省市：山东;37