本发明专利技术提供了特异地识别在由γ-分泌酶介导的APP蛋白裂解之后获得的更短的Aβ肽的单克隆抗体，这些更短的Aβ肽即该Aβ-肽片段Aβ1-37、Aβ3-37、Aβ3p-37、Aβ11-37和Aβ11p-37、以及在APP的第37个氨基酸处终止的其他类似的片段(在下文中也被称为Aβx-37肽)。它进一步提供了产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞连同用于生产该抗体以及该杂交瘤细胞的方法；以及使用本发明专利技术的抗体通过一种竞争方法或一种夹心方法对一种Aβx-37肽进行的免疫测定；以及用于测量在一种样品(例如一种生物样品)中的Aβx-37肽的水平的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】特异性针对β -淀粉样蛋白χ-37的单克隆抗体及其用途本专利技术涉及特异性针对β -淀粉样肽的新抗体，其作为诊断药物、生物标记、或治疗剂的用途。更具体地，本专利技术说明了特异性针对β_淀粉样肽的Αβχ-37片段的抗体。本专利技术总体上涉及用于监测β_淀粉样前体蛋白加工的方法和组合物。更具体地说，本专利技术涉及用于响应阿尔茨海默病和其他β_淀粉样肽相关疾病的治疗的诊断、预后和监测的方法和组合物，连同所披露的抗体在被动免疫中作为治疗阿尔茨海默病和其他β-淀粉样肽相关疾病的一种方法的用途。 阿耳茨海默病(AD)是一种大脑退行性失调，其临床特征为逐渐失去记忆、认知、推理、判断和情绪稳定性，这逐步引起极大的精神衰退并最终死亡。AD在老年人中是进行性精神衰竭(失智)的一种很常见的原因，并且被认为代表了美国第四大常见医学死亡原因。AD在全世界各族群中都有被观察到并且呈现了一个主要的现在的和未来的公共健康问题。目前估计该疾病仅在美国就影响了约二百万至三百万个体。AD在现在是不可治愈的。目前已知有效地预防AD或逆转它的症状和过程的治疗是不存在的。患有AD的个体的大脑展现了特有的损伤，称为老年(或淀粉样蛋白)斑、淀粉样蛋白血管病(血管中的淀粉样沉着物)和神经原纤维缠结。大量的这些损伤，特别是淀粉样蛋白斑和神经原纤维缠结通常被发现在AD患者的对记忆和认知功能重要的人大脑的一些区域。在一个更受限的解剖学分布中的更小量的这些损伤也被发现在不具有临床AD的大部分老年人的大脑中。淀粉样蛋白斑和淀粉样蛋白血管病也表征了患有21三体性(唐氏综合症)、弥漫性路易体病和具有荷兰型淀粉样变性的遗传性脑出血(HCHWA-D)的个体的大脑。淀粉样蛋白斑的一个主要的组分是多种淀粉样蛋白_β (Αβ)肽，它是通过β -淀粉样前体蛋白(APP)的裂解产生的。APP是一种类型I跨膜蛋白，它经历了由若干所谓的分泌酶蛋白进行的蛋白酶解加工。而在过去，在这些斑和缠结是一个原因还是仅是阿耳茨海默病的结果上存在显著的科学上的争论，最新发现表明淀粉样蛋白斑是一个成为原因的前体或因素。具体而言，已发现Αβ肽的产生可起因于编码淀粉样前体蛋白的基因中的突变，该淀粉样前体蛋白是在正常加工时将不会产生该Αβ肽的一种蛋白。引起家族的、早期性阿耳茨海默病的该淀粉样前体蛋白基因中的突变的识别是证明淀粉样蛋白新陈代谢在基于该疾病的发病过程中是中心事件的最有力的证据。目前Αβ被认为是最重要的诊断参数。Takami (高见)等人(Y -secretase !successive tripeptide and tetrapeptiderelease from the transmembrane domain of β -carboxyl terminal fragment ( y -分泌酶:从β_羧基端片段的跨膜结构域释放的连续三肽和四肽)，J Neurosc1.(《神经科学杂志》)(2009年10月14日),29(41):13042-13052)给出了 β-羧基端片段(β CTF)加工的概述。Αβ被认为是通过在两个长的Αβ 8(Αβ4?^ΡΑβ49)中的β CTF的裂解产生的。这些是进一步通过在每一步骤去除三个或四个残基以产生A β 42生A β 4(|来进行的。A β 49是通过依次释放两个或三个三肽被转化为A β 43 / 4。，而A β 48是通过依次释放两个三肽和一个另外的四肽被转化为Αβ 42 / 38。在病理学情况下，以及当使用缓解疾病剂时，产生了其他片段。尽管在理解AD和其他A β相关疾病的潜在机制中做出了进展，但对于这种或这些疾病的诊断和治疗仍存在开发方法和组合物的需要。因此，监测该淀粉样前体蛋白的细胞加工的能力将会在阿耳茨海默病的诊断、预后、和治疗监督中具有显著价值。具体的，希望的是识别针对筛选和评价易获得的患者样品(例如血清、脑脊髓液(CSF)、以及类似物)的可检测的诊断标记的微创可复制程序。多克隆抗体例如由Said(赛义德)T.C.等人，Neuroscience Letters (《神经科学通讯》)215 (1996) ; 173-176所述的这种对在生物样品中检测不同的Αβ-肽是有用的，但给出了每一批多克隆抗体都是不同的的事实，这些抗体不提供执行针对筛选和评价易获得的患者样品中的可检测的诊断标记的可复制程序的工具。此外，使用多克隆抗体的非特异性结合典型地更高并且在蛋白质印迹中的准确性典型地更低。已提出了多个针对阿耳茨海默病的潜在诊断标记。对本专利技术来说特别感兴趣的是在APP蛋白的β_羧基端片段加工后获得的Aβ前体蛋白的多个片段。这些标记自身和/或结合其他诊断标记和程序应该是有用的。优选地，这些诊断标记在体液例如CSF、血液、血浆、血清、尿、组织、等中会是可检测的，这样使得可以利用微创诊断程序。还存在对针对监测疾病和/或治疗进展的生物标记的需要，用于新治疗的开发中(如，例如在临床试验检测等)，或用于当前治疗中。针对ΑβΧ-37检测的特异性测定应该能够以一种可复制的和一致的方式检测体液样品中非常低浓度的Αβχ-37，连同区分可能存在于该样品中的Αβχ-37肽和APP的其他片段。专利技术概沭本专利技术提供了特异地识别在由Y-分泌酶介导的APP蛋白裂解之后获得的更短的Αβ肽的单克隆抗体，这些`更短的Aβ肽即该Αβ-肽片段Αβ 1-37、Αβ3-37、Αβ3ρ-37、Αβ 11-37和Αβ llp-37、以及在APP的第37个氨基酸处终止的其他类似的片段(在下文中也被称为A β χ-37肽)。它进一步提供了产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞连同用于生产该抗体以及该杂交瘤细胞的方法；以及使用本专利技术的抗体通过一种竞争方法或一种夹心方法对一种Aβχ-37肽进行的免疫测定；以及用于测量在一种样品(例如一种生物样品)中的A β χ-37肽的水平的方法。具体地，本专利技术提供了使用多肽H2N-CAI IGL MVG-COOH作为免疫原制备的单克隆抗体。所述的抗体特异地与A β χ-37肽反应，而没有针对其他APP片段的交叉反应性，并且因此在评估A β χ-37在阿尔茨海默病的发病机理中的作用的免疫测定中是有用的。在一个更具体实施例中，该单克隆抗体与作为免疫原的多肽CAIIGLMVG是反应的，并且由在2011年2月I日保存于比利时微生物协调保藏中心(Belgian CoordinatedCollection of Microorganisms)登录号分别为 LMBP8062CB 和 LMBP8063CB 的杂交瘤细胞JRD / Ab37 / 3scll或JRD / Ab37 / 4scll、或在2011年3月30日保存于比利时微生物协调保藏中心登录号为LMBP8064CB的杂交瘤细胞JRD / Ab37 / lOscll表达。因此，本专利技术的一个另外的实施例提供表达根据本专利技术所述的单克隆抗体的上述杂交瘤细胞。在本专利技术的一个另外的方面中，根据本专利技术所述的抗体被使用在常规的免疫学技术中，用于在任何可能发生之处检测A β χ-37肽，这些可能发生之处包括用于监测β -淀粉样蛋白相关疾病的生物样品以及用于监测APP的细胞内加工的来自组织培养的条件培养基。适合的免疫学技术对本领域普通技术人员来说是熟知的，并且包括例如本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种单克隆抗体，它特异地识别Aβx?37肽。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.07.15 EP 11174224.31.一种单克隆抗体，它特异地识别A βχ-37肽。2.如权利要求1所述的单克隆抗体，其中所述的Aβ χ-37肽选自下组，该组由以下各项组成:由 A β -肽片段 ΑΒ1-37, ΑΒ3-37, AB3p-37, ΑΒ11-37 和 Αβ11ρ-37。3.—种如权利要求1或2所述的抗体，它是被可检测地标记的。4.一种如权利要求3所述的抗体，其中该可检测的标记是一种放射性标记、一种酶标记、一种发光标记或一种突光标记。5.一种如权利要求1至4中任一项所述的抗体，它被固定在一种载体上。6.一种根据权利要求1至5中任一项所述的单克隆抗体，通过在2011年2月I日保存于比利时微生物协调保藏中心(Belgian Coordinated Collections of Microorganisms)登录号分别为 LMBP 8062CB 和 LMBP 8063CB 的杂交瘤细胞 JRD/Ab37/3 sell 或 JRD/Ab37/4sell、或在2011年3月30日保存于比利时微生物协调保藏中心登录号为LMBP 8064...
【专利技术属性】
技术研发人员：MH梅肯，M博格斯，MMPP范德米伦，BJJ范布罗伊克，
申请(专利权)人：詹森药业有限公司，
类型：
国别省市：
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