狭颅田鼠DNA序列制造技术

本发明专利技术公开了狭颅田鼠DNA序列。本发明专利技术为了提供一种快速鉴定狭颅田鼠的方法，通过形态特征的鉴定方法对该鼠种进行了鉴定，并获取了该种的COI基因序列。本发明专利技术还提供一种用于检测狭颅田鼠的DNA标准基因、其引物及其试剂盒。本发明专利技术采用传统的形态学鉴定与分子分类方法相结合，对所述狭颅田鼠进行鉴定，可确保物种鉴定的准确性和可靠性。

【技术实现步骤摘要】
狭颅田鼠DNA序列
本专利技术涉及狭颅田鼠种类分子鉴定，具体涉及狭颅田鼠DNA序列。
技术介绍
狭卢页田鼠(Microtus gregalis)隶属于仓鼠科(Cricetidae),田鼠属(Microtus)。狭颅田鼠多数为小型鼠类，栖息于草原地区，群居；国外分布于俄罗斯、蒙古；国内分布于新疆、内蒙古、河北、山西等地。狭颅田鼠数量多时可危害草原，降低草地产量。狭颅田鼠可传播鼠疫、土拉伦斯病及蜱性斑疹伤寒等疾病。长期以来，对鼠类的鉴定主要依靠形态学特征来实现，但近几年，随着DNA测序等技术的进步，人们陆续采用分子生物学方法对鼠类的DNA进行研究，以期建立新的分类方法，与传统分类方法相互作证。线粒体COI基因是鼠类鉴定研究中应用最为广泛的分子标记，就目前而言，鼠类分子鉴定研究在国内研究较少，本专利技术意在提供一种快速鉴定狭颅田鼠的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供狭颅田鼠的DNA序列。狭颅田鼠DNA序列的获得，可为该种的快速鉴定提供科学依据。为实现上述目的，本专利技术通过如下技术方案实现:通过试剂盒提取满洲里地区的狭颅田鼠的DNA序列，然后由合成的引物扩增该狭颅田鼠的COI基因，PCR产物序列送由专业生物公司测定。测序结果通过手工校对，并用Mega4.0软件进行相似性分析，确保所得序列为目标序列。所述狭颅田鼠的COI基因序列如SEQ ID No:1 所示。本专利技术提供一种用于检测狭颅田鼠的DNA标准基因，其特征在于该基因为COI基因，具有如SEQ ID NO:1所不的基因序列。本专利技术还提供一种检测狭颅田鼠的DNA标准基因的引物，其特征在于该引物序列为:正向引物5 ’ ACTTCTGGGTGTCCAAAGAATCA3 ’ ；反向引物5 ’ CCTACTCRGCCATTTTACCTATG3 ’。本专利技术还提供一种用于检测狭颅田鼠的试剂盒，其特征在于包括上述的引物。本专利技术还提供一种狭颅田鼠的分子鉴定方法，包括:1)从待测的鼠类肝脏中分离提取DNA ；2)以该DNA为模板，采用上述引物进行扩增；3)鉴定扩增所得序列，如果该序列与SEQ ID NO:1的同源性在98%以上，即可判断所测田鼠为狭颅田鼠。本专利技术还提供一种狭颅田鼠的分子鉴定方法，其中步骤2)中:采用聚合酶链式反应扩增模板。本专利技术还提供一种狭颅田鼠的分子鉴定方法，其中步骤3)中:所述鉴定包括取适量步骤2)扩增出的产物用琼脂糖电泳分离，经染色剂Goldview染色后于凝胶成像系统检测，根据扩增产物的大小判定结果，如果能特异性扩增出720bp左右的条带，则进行测序分析。本专利技术还提供一种狭颅田鼠的分子鉴定方法，其中扩增体系为:本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测狭颅田鼠的DNA标准基因，其特征在于该基因为COI基因，具有如SEQ ID NO：1所示的基因序列。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测狭颅田鼠的DNA标准基因，其特征在于该基因为COI基因，具有如SEQID NO:1所不的基因序列。2.一种检测权利要求1所述基因的引物，其特征在于该引物序列为: 正向引物 5’ ACTTCTGGGTGTCCAAAGAATCA3’ ； 反向引物 5’ CCTACTCRGCCATTTTACCTATG3’。3.一种用于检测狭颅田鼠的试剂盒，其特征在于包括权利要求2所述的引物。4.狭颅田鼠的分子鉴定方法，包括: O从待测的鼠类肝脏中分离提取DNA ； 2)以该DNA为模板，采用权利要求2所述引物进行扩增； 3)鉴定扩增所得序列，如果该序列与SEQID NO:1的同源性在98%以上，即可判断所测田鼠为狭颉田鼠。5.权利要求4所述的分子鉴定方法，其中步骤2)中: 采用聚合酶链式反应扩增模板。6.权利要求4或5所述的分子鉴定方法，其中步骤3)中: 所述鉴定包括取适量步骤2)扩增出...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓龙，姚李四，慈颖，乔舜，王海玲，房健慧，田丽，魏怀波，
申请(专利权)人：中国检验检疫科学研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11