一种五倍子的乙酸乙酯提取物及其制备、检测方法和用途技术

本发明专利技术涉及一种五倍子的乙酸乙酯提取物及其制备、检测方法和用途，所述乙酸乙酯提取物由以下方法制备：五倍子，用石油醚浸泡，石油醚渗滤，回收残渣，挥干残渣中的石油醚，然后用乙醇回流提取，提取液浓缩至无醇味，然后用与浓缩液等体积的乙酸乙酯萃取，收集上层清液，蒸干，即得乙酸乙酯提取物。经过体外试验，发现本发明专利技术提供的五倍子的乙酸乙酯提取物可抑制EGFR活性，效果明显。

【技术实现步骤摘要】
—种五倍子的乙酸乙酯提取物及其制备、检测方法和用途[
]本专利技术涉及五倍子提取物及其制备、检测方法和应用，具体涉一种五倍子的乙酸乙酯提取物及其制备、检测方法和应用。[
技术介绍
]表皮生长因子受体(EGFR)是EGFR酪氨酸激酶家族的成员之一，它包含有一个细胞外配体结合区、单一的跨膜区和一个含酪氨酸激酶结构的胞内区。EGFR与配体结合导致重要的构象变化，暴露受体中的二聚环结构，引发自身磷酸化，转导下游信号，调节细胞的增殖、凋亡、迁移、存活和一系列复杂的过程。EGRF在肿瘤细胞中常处于过度激活状态，使细胞周期失去调控，导致肿瘤细胞无限制生长，如神经胶质细胞瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、头颈部鳞癌、宫颈癌、食管癌、前列腺癌、肝癌、结肠癌、胃癌等。EGFR是目前抗肿瘤分子靶向治疗中，最成功也是最受关注的治疗靶点之一。FDA已批准两种靶向EGFR的小分子抑制剂,gefitinib(吉非替尼，易瑞沙)和erlotinib (厄洛替尼,特罗凯),随着时间的推移,在治疗中出现了耐药现象。而国内迄今为止，尚未有特异性EGFR抑制剂出现。五倍子，漆树科植物盐肤木Rhus chinensis Mill.、青麸杨Rhus potaniniiMaxim.或红鉄杨Rhus punjabensis Stew.var.sinica(Diels)Rehd.et wils.叶上的虫瘦，主要由五倍子姆Melaphis chinensis (Bell) Baker寄生而形成。具有敛肺降火、潘肠止湾，敛汗，止血，收湿敛疮的作用。现代药理研究表明，五倍子具有以下药理作用:1、抗 菌作用:五倍子水提液能够减少牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞膜表面CD14的表达，有助于对牙周病的防治；五倍子水、乙醇提取物对变形链球菌Ingbritt株、茸毛链球菌均有较强作用。2、抗病毒作用:五倍子煎剂具有很强的抑制HIV-Rt活性。3、清除自由基和抗氧化作用:五倍子水煎剂有对老鼠抗衰老的作用；五倍子提取物能够抑制突变作用。4、抗癌作用:五倍子提物对PGG具有抗癌作用；五倍子的醇浸提液具有治疗早期宫颈癌的作用。迄今为止，尚未有关于五倍子的乙酸乙酯提取物及其相关应用于一直EGFR活性的报道。[
技术实现思路
]为了弥补现有技术尚无用五倍子乙酸乙酯提取物用于制造抑制EGFR活性的药物的空白，本专利技术提供了五倍子的乙酸乙酯提取物及其制备方法、检测方法和用途。为实现上述目的，设计一种五倍子的乙酸乙酯提取物的方法，其特征在于该方法由以下步骤组成:a.将五倍子加入到石油醚中浸泡12~48小时，每100g五倍子需要300~500毫升的石油醚，然后渗滤回收残渣；b.所述的残渣用浓度为60%~90%的乙醇分2~3次提取，每100克残渣每次需要300~500毫升的乙醇，每次提取的时间是I~3小时，收集得到提取液；c.所述的提取液进行浓缩得到浓缩液；d.用与浓缩液等体积的乙酸乙酯对所述的浓缩液进行萃取，收集乙酸乙酯的萃取液；e.蒸干所述的萃取液得到提取物。每100g五倍子需要300毫升的石油醚浸泡。所述的浸泡时间为18~36小时。所述的乙醇浓度为70~90%。所述的浸泡时间为24小时，每100克残渣每次需要300毫升的乙醇，所述的乙醇浓度为80%，所述的步骤(b)中的提取次数为2次。本专利技术还包括一种用上述方法提取的五倍子的乙酸乙酯提取物，其特征在于该提取物含有主要成分:石榴皮鞣素，香草醛，六羟基二苯酰胺葡萄糖，鞣花单宁，杨梅苷，原儿茶素，五倍子单宁倍酰葡萄糖，五倍子单宁，鞣花酸，3，5- 二咖啡酰奎宁酸，Monogalloyl—glucos eο本专利技术还包括一种药物制剂，由所述的五倍子的乙酸乙酯提取物和药学上可接受的载体组成。所述制剂为片剂、胶囊、颗粒或丸剂。所述药学上可接受的载体或稀释剂是指药学领域常规的药物载体，选自填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、润湿剂、溶剂、表面活性剂或矫味剂中的一种或几种。所述填充剂选自淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素或葡萄糖等;所述粘合剂选自纤维素衍生物、藻酸盐、淀粉、糊精、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等；所述崩解剂选自微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素或交联羧甲基纤维素钠；所述润滑剂选自硬脂酸、聚乙二醇、碳酸钙、碳酸氢钠、微粉硅胶、滑石粉或硬脂酸镁；所述助悬剂选自微粉硅胶、蜂蜡、纤维素、固态聚乙二醇；所述润湿剂选自甘油、吐温-80、乙氧基氢化蓖麻油或卵磷脂；所述溶剂选自乙醇、液态聚乙二醇、异丙醇、吐温-80、甘油、丙二醇或植物油，所述植物油选自大豆油、蓖麻油、花生油、调和油等；所述表面活性剂选自十二烷基苯磺酸钠、硬脂酸、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、月旨肪酸山梨坦或聚山梨酯(吐温)等；所述矫味剂选自阿斯巴甜、蔗糖素、香精、柠檬酸或糖精钠。本专利技术的五倍子的乙酸乙酯提取物还可以用于制备抑制EGFR活性药物。在抑制EGRF活性时，五倍子的乙酸乙酯提取物的用量(即每日服用量限定为0.lmg_3g)。本专利技术还包括一种检测所述五倍子的乙酸乙酯提取物的方法，用超高效液相色谱-电喷雾串联质仪对所述五倍子提取物进行分析，以获得乙酸乙酯提取物的UPLC-Q-TOF-MS图谱，其条件为:a.质谱条件为:ESI离子源，正离子模式检测；雾化器N2压力50psi ;干燥气N2，流速15L/min ;质量扫描范围50—1200 ;自动3级质谱；b.色谱分析条件为:色谱柱:Waters ACQUITY UPLC TM BEHC18Column (50mm32.1mm.1 d., 1.7 μ m) ;二元梯度洗脱，A相为0.1%甲酸水溶液；B相为乙腈，流速为0.35mL/min,梯度洗脱的程序如下:本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种五倍子的乙酸乙酯提取物的方法，其特征在于该方法由以下步骤组成：a.将五倍子加入到石油醚中浸泡12～48小时，每100g五倍子需要300～500毫升的石油醚，然后渗滤回收残渣；b.所述的残渣用浓度为60%～90%的乙醇分2～3次提取，每100克残渣每次需要300～500毫升的乙醇，每次提取的时间是1～3小时，收集得到提取液；c.所述的提取液进行浓缩得到浓缩液；d.用与浓缩液等体积的乙酸乙酯对所述的浓缩液进行萃取，收集乙酸乙酯的萃取液；e.蒸干所述的萃取液得到提取物。

【技术特征摘要】
2012.12.28 CN 201210587542.41.一种五倍子的乙酸乙酯提取物的方法，其特征在于该方法由以下步骤组成: a.将五倍子加入到石油醚中浸泡12~48小时，每100g五倍子需要300~500毫升的石油醚，然后渗滤回收残渣； b.所述的残渣用浓度为60%~90%的乙醇分2~3次提取，每100克残渣每次需要300~500毫升的乙醇，每次提取的时间是I~3小时，收集得到提取液； c.所述的提取液进行浓缩得到浓缩液； d.用与浓缩液等体积的乙酸乙酯对所述的浓缩液进行萃取，收集乙酸乙酯的萃取液； e.蒸干所述的萃取液得到提取物。2.如权利要求1所述的五倍子的乙酸乙酯提取物的方法，其特征在于每100g五倍子需要300毫升的石油醚浸泡。3.如权利要求1所述的五倍子的乙酸乙酯提取物的方法，其特征在于所述的浸泡时间为18~36小时。4.如权利要求1所述的五倍子的乙酸乙酯提取物的方法，其特征在于所述的乙醇浓度为70~90%ο5.如权利要求1所述的五倍子的乙酸乙酯提取物的方法，其特征在于所述的浸泡时间为24小时，每100克残渣每次需要300毫升的乙醇，所述的乙醇浓度为80%，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈士林，黄林芳，王冬梅，林森森，卞兆祥，徐宏喜，杨大坚，陈新滋，
申请(专利权)人：中国医学科学院药用植物研究所， 香港浸会大学，
类型：发明
国别省市：北京;11