本发明专利技术涉及一种耐受抗血管新生治疗的肿瘤细胞系及其建立方法和应用，通过使用抗血管新生药物治疗荷瘤小鼠，通过体内多次治疗及筛选而成抗药性，最后分离培养获得。本发明专利技术通过皮下接种荷瘤小鼠，通过多轮治疗并筛选的方法获得的耐受抗血管新生治疗的小鼠肺癌细胞系更接近临床，通过研究药物耐受细胞系与原始细胞系表达基因的差异，可用于研究导致出现抗血管新生治疗药物耐受的关键基因，为筛选导致药物耐受的靶点奠定了基础，同时也为临床用药指导提供了依据。
【技术实现步骤摘要】
一种耐受抗血管新生治疗的肿瘤细胞系及其建立方法和应用
本专利技术属于荷瘤小鼠药物耐受模型领域，特别涉及一种耐受抗血管新生治疗的肿瘤细胞系及其建立方法和应用。
技术介绍
恶性肿瘤是威胁人类健康的严重疾病。据中国卫生部发布的《2010年中国卫生统计年鉴》，中国恶性肿瘤在所有疾病死亡原因中居首位，其中，统计资料显示死亡率排名前十位的恶性肿瘤中，肺癌居首位，为人民生活和社会发展带来严重的经济和社会负担。近年来，肺癌和其他肿瘤的治疗和基础研究取得了较大发展，其中抗血管新生药物是一类新的药物。血管新生(Angiogenesis)是指体内已存在的血管生长出新的血管的过程。在成人体内，血管新生只见于少数病理(例如肿瘤)和生理过程中。美国哈佛大学Folkman教授在四十年前提出，肿瘤的生长和转移依赖于血管新生，肿瘤通过新生血管得到氧气和营养供应，肿瘤生长到一定体积后如果未建立血管便会停止生长，因此，可以通过抑制血管新生达至1J治疗月中瘤的目的[Folkman J.Tumor angiogenesis: therapeutic implications.N EnglJ Med.1971，285:1182-6]、[Folkman J, Angiogenesis in cancer, vascular, rheumatoidand other disease.1995, Nature Medicine.1:27-30]。近几年的临床试验证据证明了这一理论的正确性，抗血管新生(Ant1-angiogenesis)药物是目前肿瘤新药开发的热点之一 [Kerbel RS.Tumor angiogenesis.N Engl J Med.2008，358:2039-49]、[Cao Y.Tumorangiogenesis and molecular targets for therapy.Front Biosc1.2009，14:3962-73]、[Heath VL, Bicknell R.Anticancer strategies involving the vasculature.Nat RevClin Oncol.2009，6:395-404]。血管新生过程受多种刺激因子和抑制因子的调节[Hanahan D, FolkmanJ.Patterns and emerging mechanisms of the angiogenic switch duringtumorigenesis.Cell.1996, 86:353-64]。抗血管新生治疗的基本原理在于阻断血管新生刺激因子或者用血管新生抑制因子阻止肿瘤血管的形成和生长。目前已经知道相当数目的血管新生刺激因子,例如血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growthfactor, VEGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor, FGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)等，这些因子能刺激血管内皮细胞的分裂、分化和血管的形态发生。其中，VEGF是目前所知对血管新生最特异、最有效的生长因子[Ferrara N, Gerber HP, LeCouter J.The biology of VEGF and its receptors.NatMed.2003，9:669-76]、[Ferrara N.Vascular endothelial growth factor as a targetfor anticancer therapy.0ncologist.2004，1:2-10]。在肿瘤组织内的缺氧环境中，肿瘤细胞分泌大量的VEGF，诱导血管内皮细胞的分裂和迁移，最终在肿瘤建立血管网络。众多动物实验证明，抑制VEGF能阻止血管的新生，进而抑制肿瘤的生长。正因为此，VEGF及其受体是目前抗血管新生药物最重要的靶标。至今，美国FDA已经批准了多个具有抗血管新生作用的抗肿瘤药物，它们都直接或间接地作用于VEGF的信号传递。其中，VEGF-Trap(Aflibercept)和Avastin (Bevascizumab)直接阻断VEGF,抑制肿瘤血管的新生，因此是严格意义上的抗血管新生药物，其他几个药物除了抗血管新生外还抑制肿瘤细胞的分裂，具有多重作用。Avastin是一种人源化的抗VEGF的单克隆抗体，由美国著名生物技术公司Genentech生产。在大规模三期临床试验中，Avastin与化疗联合用药可以显著延长多种肿瘤病人的生存时间，包括直肠癌、肺癌、乳腺癌、肾癌等[Jenab-Wolcott J, GiantonioBJ.Bevacizumab: current indications and future development for managementof solid tumors.Expert Opin Biol Ther.2009，9 (4):507-17]、[Summers J,CohenMH, Keegan P, Pazdur R.FDA drug approval summary:bevacizumab plus interferon foradvanced renal cell carcinoma.0ncologist.2010，15 (I): 104-11]。美国生物技术公司Regeneron和Sanof1-Aventis合作的VEGF-Trap在结肠癌、肺癌等癌症的治疗中具有显著的疗效，已经被美国FDA批准进入临床应用。抗血管新生药物在临床上的成功具有重要意义，它证明以肿瘤血管系统为靶标的抗血管新生治疗是在临床上有效的治疗手段，为多种肿瘤的治疗开辟了一个全新的途径。虽然以Avastin为代表的抗血管新生药物在肿瘤治疗上取得了很大的成功，但是，大量临床试验也发现了这一药物的局限。从临床效果看，Avastin延长病人的半数生存时间约 3 ~4 个月[Hurwitz H, Fehrenbacher L, Novotny ff, Cartwright T, HainsworthJ, Heim ff, Berlin J,Baron A, Griffing S, Holmgren E, Ferrara N, Fyfe G, Rogers B, RossR, Kabbinavar F.Bevacizumab plus irinotecan,fluorouracil, and leucovorin formetastatic colorectal cancer.N Engl J Med.2004, 350(23):2335-42]> [SandlerA,Gray R, Perry MC, Brahmer J, Schiller JH,Dowlati A, Lilenbaum R,JohnsonDH.Paclitaxel-carbop latin alone or with bevacizumab for non-small-cell lungcancer.N Engl J Med.2006，355 (24): 2542-50]，因此，Avastin 并不能本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种耐受抗血管新生治疗的肿瘤细胞系，其特征在于：所述细胞系通过使用抗血管新生药物治疗荷瘤小鼠，通过体内多次治疗及筛选而成抗药性，最后分离培养获得。
【技术特征摘要】
1.一种耐受抗血管新生治疗的肿瘤细胞系，其特征在于:所述细胞系通过使用抗血管新生药物治疗荷瘤小鼠，通过体内多次治疗及筛选而成抗药性，最后分离培养获得。2.根据权利要求1所述的一种耐受抗血管新生治疗的肿瘤细胞系，其特征在于:所述抗血管新生药物为血管内皮细胞生长因子抑制剂。3.根据权利要求2所述的一种耐受抗血管新生治疗的肿瘤细胞系，其特征在于:所述血管内皮细胞生长因子抑制剂为VEGF-Trap。4.根据权利要求1所述的一种耐受抗血管新生治疗的肿瘤细胞系，其特征在于:所述肿瘤细胞系为小鼠Lewis肺癌细胞系。5.根据权利要求4所述的一种耐受抗血管新生治疗的肿瘤细胞系，其特征在于:所述小鼠为C57BL/6J、裸鼠或...
【专利技术属性】
技术研发人员：房健民，李栋，
申请(专利权)人：同济大学，
类型：发明
国别省市：上海;31
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