一株具有抗菌活性的菌株及其筛选方法和应用技术

本发明专利技术涉及一株具有抗菌活性的菌株及其筛选方法和应用，属于生物工程技术领域。为了解决现有的海源性具有抗菌活性的药物较少的问题，提供一株具有抗菌活性的菌株及其筛选方法和应用，该筛选方法包括将采集的海底淤泥加入装有已灭菌的水和玻璃珠的锥形瓶中，室温振荡，然后再用无菌水进行稀释后取样涂布到含K2CrO7的高氏一号培养基平板上进行筛选培养观察，挑取单菌落在YMS培养基平板上进行划线转接筛选培养，获得单菌落纯培养物；将得到的单菌落纯培养物接种在含有指示菌的PDA培养基上进行培养，筛选，得到具有抗菌活性的Nocardia?asteroides?XI菌株。该菌株具有较好的抗菌活性。

【技术实现步骤摘要】
一株具有抗菌活性的菌株及其筛选方法和应用
本专利技术涉及一株具有抗菌活性的菌株及其筛选方法和应用，属于生物工程
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技术介绍
抗菌药物是临床上应用最广泛且极为重要的一类药物。而现有的抗菌药物大多来源于陆源土壤放线菌的次生代谢产物，这些放线菌种类多、代谢复杂、功能各异，科研工作者已依此为基础开发出了种类繁多的抗生素，为人类的健康做出了巨大贡献。目前，已知能够产生抑菌活性物质的陆源性微生物包括以下属:莫拉菌属(Moraxella)、希瓦菌属(Shewanella)、红细菌属(Ruegeria)、小红卵菌属(Rhodvulum)、葡萄球菌属(Staphylococcus)微球菌属(Micrococcus)、弧菌属(Vibrio)、着色菌属(Chromatium)、玫瑰杆菌属(Roseobacter)、节杆菌属(Arthobacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)、盐芽孢杆菌属(Halobacillus)、短杆菌属(Brachybacterium)、黄杆菌属(Flavobacterium)、拟诺卡菌属(Nocardiopsis)、盐单胞菌属(Halomonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)、交替假单胞菌属(Pseudoalteromonas)、交替假单胞菌属(Pseudoalteromonas)和交替单胞菌属(Alteromonas)等等，但是，经过多年的研究开发之后，目前已很难获得新的陆源抗菌活性微生物。然而，海洋生态因环境复杂多变，蕴藏着约20余万种微生物，复杂的海域环境和长期的非定向进化使海洋微生物常具备与陆源微生物不同的防御系统和代谢途径，这为寻找具有保健、抗菌 、抗病毒及抗肿瘤等活性的功能特异、结构新颖的化合物提供了广阔的空间，现代先进生物技术的广泛应用也为有效开发海源抗菌药物提供了有力支持。作为天然化合物宝库的海洋，已成为药物筛选研究领域的热点。近年来，有关海洋微生物所产的脂肪酸、丙烯酸、Π引哚类及苯酚类等抗菌活性的化合物已得到分离并进行了深入的研究。但是目前很少有所道有海洋中开发出具有抗菌活性的微生物。
技术实现思路
本专利技术针对以上现有技术中存在的问题，提供一株具有抗菌活性的菌株及其筛选方法和应用，该菌株是从海底淤泥中筛选的一株新的菌株，具有抗菌活性的效果。本专利技术的目的是通过以下技术方案得以实现的，一株具有抗菌活性的菌株，所述的菌株为Nocardia asteroides XI菌株,所述Nocardia asteroides XI菌株在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO:M2013551。本专利技术的菌株是从海底淤泥中分离并筛选得到的微生物，具有较强的抗菌活性。本专利技术的菌株为Nocardia属的星状诺卡氏菌(Nocardia asteroides),命名为Nocardiaasteroids XI，已于2013年11月06日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO:M2013551，保藏地点为中国武汉武汉大学。本专利技术的Nocardia asteroids XI菌株的菌落不透明且有皱裙和隆起,表面粗糙呈灰白色，菌落轮廓清晰，菌体不易挑起，显微镜下菌丝呈无序纤维状。本专利技术的Nocardiaasteroids XI菌株属于革兰氏阳性菌，在5 °C~40°C温度之间能够生长，最适温度是26。。~30。。，(G+C)mol% 含量为 66.5mol%。在上述的具有抗菌活性的菌株中，所述Nocardia asteroides XI菌株的16S rRNA序列如SEQ.NOl所示。在上述的具有抗菌活性的菌株中，所述Nocardia asteroides XI菌株具有抗菌活性的能力。本专利技术的菌株具有较强的抗菌活性，尤其对Staphylococous、Bacillus和Candia Albicans菌具有较好的抑制效果,抗菌活性强。本专利技术的目的之二是通过以下技术方案得以实现的，一种具有抗菌活性的菌株的筛选方法，所述的菌株为Nocardia asteroides XI菌株,该方法包括以下步骤:A、将采集的海底淤泥加入装有已灭菌的水和玻璃珠的锥形瓶中，室温振荡，然后再用无菌水进行稀释后取样涂布到含K2CrO7的高氏一号培养基平板上进行筛选培养观察，挑取单菌落在YMS培养基平板上进行划线转接筛选培养，获得单菌落纯培养物；B、将得到的单菌落纯培养物接种在含有指示菌的PDA培养基上进行培养，筛选，得到具有抗菌活性的Nocardia asteroides XI菌株。在上述的具有抗菌活性的菌株的筛选方法中，作为优选，所述的高氏一号培养基、YMS培养基和PDA培养基均采用海水配制。采用海水配置培养基因渗透压没有发生变化，从而保证了海源微生物菌株在筛选中不会丢失。在上述的具有抗菌活性的菌株的筛选方法中，作为优选，步骤A中所述K2CrO7的含量为0.lmmol/L~0.5mmol/L。作为更进一步的优选，步骤A中所述K2CrO7的含量为0.2mmol/L ~0.3mmol/L。在上述的具有抗菌活性的菌株的筛选方法中，所述的高氏一号培养基采用常规的高氏一号培养基即可。作为优选，所述高氏一号培养基米用海水配制，且所述高氏一号培养基包括以下成分的重量配比(g/L):可溶性淀粉:15~25 ；Κ2ΗΡ04:0.2 ~0.7 ；ΚΝ03:0.5 ~1.5 ；MgS04:0.2 ~0.7 ;NaCl:0.2 ~0.7 ；FeS04: 0.00 5 ~0.015 ;琼脂:10 ~20 ；PH:7.2 ~7.4。在上述的具有抗菌活性的菌株的筛选方法中，步骤A中所述YMS培养基采用本领域常规的原料配比即可。作为优选，所述的YMS培养基采用海水配制，且所述YMS培养基包括以下成分的重量配比(g/L):酵母粉:3.0~5.0 ;麦芽提取物:8~10 ;葡萄糖:3.0~5.0 ;琼脂:13~17。在上述的具有抗菌活性的菌株的筛选方法中，步骤B中所述的PDA培养基是马铃署葡萄糖琼脂培养基的简称。作为优选，所述的PDA培养基采用海水配制而成，且马铃署葡萄糖琼脂的重量配比为40g/L。在上述的具有抗菌活性的菌株的筛选方法中，作为优选，步骤B中所述指示菌选自Staphylococous (表皮葡萄球菌)、Bacillus (枯草芽抱杆菌)和Candia Albicans (白色念珠菌)中的一种。本专利技术的目的之三是通过以下技术方案得以实现的，一种具有抗菌活性的菌株的应用，所述的菌株为Nocardia asteroides XI菌株,所述Nocardia asteroides XI菌株用于制备抗菌药物。 由于Nocardia asteroides XI菌株具有较强的抗菌活性。因此,可以用于制备相应的抗菌药物。综上所述，本专利技术与现有技术相比，本专利技术的具有抗菌活性的菌株，是本专利技术人从海底游泥中筛选的一株新的菌株，该菌株为Nocardia asteroides XI菌株,具有较强的抗菌活性，提供了一种新的具有抗菌活性的海源微生物，解决了现有的大多是采用具有抗菌活性的陆源微生物，为抗菌药物的研究开辟了一条新的途径。且本专利技术的筛选采用常规的方法即可，但本专利技术的通过对筛选的方法进行改进，通过采用海水作为培养基的配本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株具有抗菌活性的菌株，其特征在于，所述的菌株为Nocardia?asteroides?XI菌株，所述Nocardia?asteroides?XI菌株在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC?NO：M2013551。

【技术特征摘要】
1.一株具有抗菌活性的菌株,其特征在于,所述的菌株为Nocardia asteroides XI菌株，所述Nocardia asteroides XI菌株在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCCNO:M2013551o2.根据权利要求1所述具有抗菌活性的菌株，其特征在于，所述NocardiaasteroidesXI菌株的16S rRNA序列如SEQ.NOl所示。3.一种具有抗菌活性的菌株的筛选方法，其特征在于，所述的菌株为Nocardiaasteroides XI菌株,该方法包括以下步骤: A、将采集的海底淤泥加入装有已灭菌的水和玻璃珠的锥形瓶中，室温振荡，然后再用无菌水进行稀释后取样涂布到含K2CrO7的高氏一号培养基平板上进行筛选培养观察，挑取单菌落在YMS筛选培养基平板上进行划线转接筛选培养，获得单菌落纯培养物； B、将得到的单菌落纯培养物接种在含有指示菌的PDA培养基上进行培养，筛选，得到具有抗菌活性的Nocardia asteroides XI菌株。4.根据权利要求2所述抗菌活性的菌株的筛选方法,其特征在于，所述高氏一号培养基、YMS培养基和PDA培养基均采用海水配制而成。5.根据权利要求3或4所述具有抗菌活性的菌株的筛选...

【专利技术属性】
技术研发人员：奚立民，奚逢源，薛长艳，郝之奎，
申请(专利权)人：台州职业技术学院，
类型：发明
国别省市：