一种金针菇多孢自交育种方法技术

技术编号:9810068 阅读:266 留言:0更新日期:2014-03-26 15:19
本发明专利技术属于食用菌育种技术领域,具体涉及一种金针菇多孢自交育种方法。利用液体培养基多孢自交的育种选育金针菇新菌种。其步骤为:(1)从亲本菌株高邮738的子实体中收集单孢子制成孢子液;(2)将含亲本菌株的孢子液加入液体培养基中摇菌,进行多孢自交;(3)将液体菌种摇瓶培养并进行搔菌处理;(4)通过栽培和筛选获得目标菌株金针菇(Flammulina?velutipes)D7-Y。与现有技术相比,本发明专利技术具有适用于工厂化、简单、快速的特点,且污染容易被发现提高育种效率的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于食用菌育种
,具体涉及。
技术介绍
我国金针菇种质资源丰富。随着技术的不断发展,不管是制种的材料、工艺还是菌种的选育技术都得到了改进和提高。现今,工厂化栽培金针菇将成为时代的主流,能够选育一种高产、优质、高抗、生物活性物质含量高、口感好和适合工厂化栽培的菌种至关重要。在金针菇工厂化生产中,往往会发现,原先一个优良的品种在经过一段时间的生产之后,它的优良性状开始表现不明显,例如出菇期明显推迟,成菇率低,出菇不整齐,产量下降等。人为控制的各种生长因子与金针菇最适生长环境的生长因子有差异。环境的改变,会加速品种某些性状的变异,致使某些优良性状慢慢消失。且现在所用栽培品种大多为白色品系,而其多为杂交或变异品种,这种品系虽各方面性状都比较优良,但其遗传基因多为杂合性的,即表现为显性遗传性状。按照遗传学观点,某个基因发生改变,它的性状就有可能发生改变。所以在生产过程中,金针菇菌种特别容易发生变异而失去原有的优良性状。对一个品种频繁传代、不适宜的培养条件及保藏条件是导致衰退的主要外因,由此导致菌丝遗传物质发生了变异,是菌种衰退的内因。食用菌菌种随着培养时间延长,将会发生老化现象,产生一系列生理生化变化。老化菌种易出现菌丝体萌发率下降、生长速度减慢、长势减弱、色泽变淡、子实体形成延后、弱小等。金针菇是我国工厂化生产发展最快的食用菌种类。品种的改良与选育一直是产业发展的需求。目前金针菇的育种手段主要有驯化育种、诱变育种、单-单杂交、单-双杂交、多孢杂交、多孢自交和转基因技术育种等方法,使用最为广泛的仍是杂交育种的各种方法,单单和单双杂交工作量巨大,多孢杂交和多孢自交的出线(徐珍等,2007)大大提高了育种的效率,常规多孢自交是指将母种的子实体在无菌环境中弹射的孢子混合培养,之后及时挑取杂交菌株,可有效排除无性孢子的干扰,但是在工厂化生产中的栽培瓶不适合接入固体菌种,需要将杂交菌落制成液体菌种再接入栽培瓶,这就使得育种步骤增多,育种周期边长,反而降低了效率,所以多孢自交技术仍有很大的改进和创新空间。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术存在的缺陷,所要解决的技术问题在于提供一种金针菇多孢杂交育种方法,该方法可应用于金针菇工厂化栽培优良新菌株的选育。本专利技术通过下列技术步骤实现:一种金针菇多孢杂交育种方法,其步骤如下:(1)从金针菇高邮738菌株取发育完全的子实体菌盖部分,切掉菌柄,用75%的酒精棉球擦净菌盖表面,菌褶朝下用灭过菌的铁钩勾住悬挂于灭菌的三角瓶中,用无菌棉塞封口过夜,收集孢子印,用无菌水制成孢子液;(2)将上步所得的孢子液加入到液体培养基中进行摇菌,进行液体多孢自交,摇菌条件为:转速140r/min,培养温度为25°C,当培养液清澈菌丝球充实的时候摇菌结束,用磁力搅拌器搅匀菌丝球得到金针菇混合菌丝液;(3)将上步所得的金针菇混合菌丝液在在洁净室接种于栽培瓶的培养料上,用透气盖封口,并置于14-15°C的培养室内暗培养25-30d ;(4)待菌丝长满栽培瓶后,刮除瓶口表层菌丝进行搔菌,以刺激出菇;(5)将播囷后的栽培瓶移入生育室,初始温度18 C,按天数递减,最后保持在4 C进行培养,筛选生育期小于25d、菇形整齐、美观、菌柄基部无绒毛、菌落整体紧实的菌株,进行组织分离,得到候选菌株;对所获候选菌株进行复种,按生育期小于25d、菇形整齐、美观、菌柄基部无绒毛、菌落整体紧实和单瓶产量大于350g进行复筛一次,得到金针菇菌株D7-Y,Flammulina velutipes D7-Y,于2013年11月24日将该菌株送中国.武汉.武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏,保藏号为CCTCC NO:M2013599。其中:液体培养基配方如下:大豆粉3.3g/L,蔗糖20g/L,七水硫酸镁0.66g/L,硫酸氢二钾0.66g/L,加水定容至 IL0 pH=6.2-6.5。 栽培瓶用的培养料配方由下述重量百分比的原料制成:本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种金针菇多孢杂交育种方法,其特征在于下列步骤:(1)从金针菇高邮738菌株取发育完全的子实体菌盖部分,切掉菌柄,用75%的酒精棉球擦净菌盖表面,菌褶朝下用灭过菌的铁钩勾住悬挂于灭菌的三角瓶中,用无菌棉塞封口过夜,收集孢子印,用无菌水制成孢子液;(2)将上步所得的孢子液加入到液体培养基中进行摇菌,进行液体多孢自交,摇菌条件为:转速140r/min,培养温度为25℃,得到金针菇混合菌丝液;(3)将上步所得的金针菇混合菌丝液在洁净室接种于栽培瓶的培养料上,用透气盖封口,并置于14?15℃的培养室内暗培养25?30d;(4)待菌丝长满栽培瓶后,刮除瓶口表层菌丝进行搔菌,以刺激出菇;(5)将搔菌后的栽培瓶移入生育室,初始温度18℃,按天数递减,最后保持在4℃进行培养,筛选生育期小于25d、菇形整齐、美观、菌柄基部无绒毛、菌落整体紧实的菌株,进行组织分离,得到候选菌株;对所获候选菌株进行复种,按生育期小于25d、菇形整齐、美观、菌柄基部无绒毛、菌落整体紧实和单瓶产量大于350g进行复筛一次,得到金针菇D7?Y,其保藏号为CCTCC?NO:M2013599;其中:液体培养基配方:大豆粉3.3g/L,蔗糖20g/L,七水硫酸镁0.66g/L,硫酸氢二钾0.66g/L,加水定容至1L,pH=6.2?6.5;栽培瓶用的培养料配方由下述重量百分比的原料制成:按干物质计重量百分比:FDA0000422713210000011.jpg...

【技术特征摘要】
1.一种金针菇多孢杂交育种方法,其特征在于下列步骤: (1)从金针菇高邮738菌株取发育完全的子实体菌盖部分,切掉菌柄,用75%的酒精棉球擦净菌盖表面,菌褶朝下用灭过菌的铁钩勾住悬挂于灭菌的三角瓶中,用无菌棉塞封口过夜,收集孢子印,用无菌水制成孢子液; (2)将上步所得的孢子液加入到液体培养基中进行摇菌,进行液体多孢自交,摇菌条件为:转速140r/min,培养温度为25°C,得到金针菇混合菌丝液; (3)将上步所得的金针菇混合菌丝液在洁净室接种于栽培瓶的培养料上,用透气盖封口,并置于14-15°C的培养室内暗培养25-30d ; (4)待菌丝 长满栽培瓶后,刮除瓶口表层菌丝进行搔菌,以刺激出菇; (5)将搔菌后的栽培瓶移入生育室,初始温度18°C,按天数递减,最后保...

【专利技术属性】
技术研发人员:边银丙常堃蔡婧
申请(专利权)人:华中农业大学
类型:发明
国别省市:

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