用于冷冻保存和包封细胞的方法技术

本文描述了冷冻保存已悬浮在海藻酸盐中的细胞的方法以及包封已悬浮在海藻酸盐中的冷冻保存的细胞的方法。本文还提供了包含已根据本文所述的方法处理的细胞的细胞组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本申请主张2010年12月30日提交的美国临时专利申请第61/428，427号的优先权，该申请的公开内容以其整体并入本文作为参考。1.
本文描述了冷冻保存已悬浮在海藻酸盐中的细胞的方法以及包封已悬浮在海藻酸盐中的冷冻保存的细胞的方法。本文还提供了包含已根据本文所述方法处理的细胞的细胞组合物。2.
技术介绍
冷冻保存是可以通过将细胞冷却至低温来保存的方法。在这些低温下，有效停止了生物活性，包括在正常情况下会导致细胞死亡的生化反应。由此，冷冻保存提供了用于储存细胞备用的有价值的方法。然而，冷冻保存细胞存在某些缺点，包括冷冻和/或解冻过程中细胞发生的损伤和融化后需要培养细胞以确保它们适当恢复。这些缺点限制了冷冻保存的细胞的价值，特别是在希望融化后立即使用或不久后使用冷冻保存的细胞的情况下。3.
技术实现思路
本专利技术公开的目的是提供冷冻保存细胞的方法和使用解决了上述问题的已冷冻保存的细胞的方法。这些方法部分地基于以下发现:当在细胞冷冻保存前将液体海藻酸盐加入细胞时，所述细胞能够(i )在融化后包封，并且随后在将它们融化后无需培养所述冷冻保存的细胞而用于所需目的在融化后以非包封形式使用而在将它们融化后无需培养所述冷冻保存的细胞。所述方法另外部分基于以下发现:将已融化的冷冻保存的细胞立即悬浮在海藻酸盐中，并且随后包封剩余的活细胞并在包封后可以立即使用。由此，在一种实施方式中，本文所述的方法包括向细胞加入液体海藻酸盐以形成细胞/液体海藻酸盐溶液。在一些实施方式中，产生了细胞/液体海藻酸盐溶液并且将所述细胞/液体海藻酸盐溶液中的细胞冷冻保存、融化并且在融化后立即包封，并且此后将所述细胞用于它们所需的目的，例如，不进行任何额外培养，施用于受试者，例如，立即使用细胞。在一些实施方式中，在冷冻保存的细胞融化后立即产生细胞/液体海藻酸盐溶液，随后将其包封并在此之后将其用于它们所需的目的，例如，不进行任何额外培养，施用于受试者，例如，立即使用细胞。在一些实施方式中，产生了细胞/液体海藻酸盐溶液并且将所述细胞冷冻保存、融化，但在融化后不包封，而是不进行任何额外培养地使用所述细胞，例如，立即使用细胞。在一个方面，本文提供了用于制备适合于在将冷冻保存的细胞融化并包封在海藻酸盐中后立即施用于受试者的冷冻保存的包封细胞的方法。根据这个方面，在冷冻保存和融化后立即包封前，将所述冷冻保存的包封细胞悬浮在液体海藻酸盐中。作为另外一种选择，在融化和随后的包封后立即将所述冷冻保存的细胞悬浮在液体海藻酸盐中。在每一种情况下，然后可以不进行任何额外培养将所述包封的细胞施用于受试者，例如，包封后立即使用细胞。在一种【具体实施方式】中，本文提供了制备适合施用于受试者的包封的细胞群体的方法，所述方法包括:(i )获得细胞群体；(ii )将包含液体海藻酸盐的冷冻保存溶液加入到所述细胞群体中以产生细胞/液体海藻酸盐组合物；(iii)冷冻保存所述细胞/液体海藻酸盐组合物；(iv)融化所述细胞/液体海藻酸盐组合物；和(0包封所述细胞/液体海藻酸盐组合物。在某些实施方式中，在融化和随后的包封后不进行任何额外培养地使用所述细胞，例如，包封后立即使用所述细胞。在另一种【具体实施方式】中，本文提供了制备适合施用于受试者的包封的细胞群体的方法，所述方法包括:(i)将细胞群体与包含液体海藻酸盐的冷冻保存溶液合并以产生细胞/液体海藻酸盐组合物；(ii)冷冻保存所述细胞/液体海藻酸盐组合物；(iii)融化所述细胞/液体海藻酸盐组合物jP(iv)包封所述细胞/液体海藻酸盐组合物。在某些实施方式中，在融化和随后的包封后不进行任何额外培养地使用所述细胞，例如，包封后立即使用所述细胞。 在另一种【具体实施方式】中，本文提供了将包封的细胞群体施用于受试者的方法，所述方法包括:(i)获得细胞群体；(ii)将包含液体海藻酸盐的冷冻保存溶液加入到所述细胞群体中以产生细胞/液体海藻酸盐组合物；(iii)冷冻保存所述细胞/液体海藻酸盐组合物；(iv)融化所述冷冻保存的细胞/液体海藻酸盐组合物；(v)包封所述细胞/液体海藻酸盐组合物；(vi )将所述包封的细胞/液体海藻酸盐组合物施用于受试者，其中，所述施用是在步骤(V)的包封后在所述细胞/液体海藻酸盐组合物中不培养细胞的情况下进行的。在另一种【具体实施方式】中，本文提供了将包封的细胞群体施用于受试者的方法，所述方法包括:(i)将细胞群体与包含液体海藻酸盐的冷冻保存溶液合并以产生细胞/液体海藻酸盐组合物；(ii)冷冻保存所述细胞/液体海藻酸盐组合物；(iii)融化所述冷冻保存的细胞/液体海藻酸盐组合物；(iv)包封所述细胞/液体海藻酸盐组合物；和(0将所述包封的细胞/液体海藻酸盐组合物施用于受试者，其中，所述施用是在步骤(iv)的包封后在所述细胞/液体海藻酸盐组合物中不培养细胞的情况下进行的。在另一种【具体实施方式】中，本文提供了制备适合施用于受试者的包封的细胞群体的方法，所述方法包括:(i)获得细胞群体；(ii)将所述细胞在冷冻保存溶液中冷冻保存；(iii)融化所述冷冻保存的细胞；(iv)将包含液体海藻酸盐的溶液加入到所述融化的细胞中以产生细胞/液体海藻酸盐组合物；和(V)包封所述细胞/液体海藻酸盐组合物。在某些实施方式中，在融化和随后的包封后不进行任何额外培养地使用所述细胞，例如，包封后立即使用所述细胞。在另一种【具体实施方式】中，本文提供了制备适合施用于受试者的包封的细胞群体的方法，所述方法包括:(i )将细胞群体在冷冻保存溶液中冷冻保存；(ii )融化所述冷冻保存的细胞；(iii)将包含液体海藻酸盐的溶液加入到所述融化的细胞中以产生细胞/液体海藻酸盐组合物jP(iv)包封所述细胞/液体海藻酸盐组合物。在某些实施方式中，在融化和随后的包封后不进行任何额外培养地使用所述细胞，例如，包封后立即使用所述细胞。在另一种【具体实施方式】中，本文提供了将包封的细胞群体施用于受试者的方法，所述方法包括:(i)获得细胞群体；(ii)将所述细胞在冷冻保存溶液中冷冻保存；(iii)融化所述冷冻保存的细胞；(iv)将包含液体海藻酸盐的溶液加入到所述融化的细胞中以产生细胞/液体海藻酸盐组合物；(V)包封所述细胞/液体海藻酸盐组合物jP(vi)将所述包封的细胞/液体海藻酸盐组合物施用于受试者，其中所述施用是在步骤(V)的包封后在所述细胞/液体海藻酸盐组合物中不培养细胞的情况下进行的。在另一种【具体实施方式】中，本文提供了将包封的细胞群体施用于受试者的方法，所述方法包括:(i)将细胞群体在冷冻保存溶液中冷冻保存；(ii)融化所述冷冻保存的细胞；(iii)将包含液体海藻酸盐的溶液加入到所述融化的细胞中以产生细胞/液体海藻酸盐组合物；(iv)包封所述细胞/液体海藻酸盐组合物；和(V)将所述包封的细胞/液体海藻酸盐组合物施用于受试者，其中，所述施用是在步骤(iv)的包封后在所述细胞/液体海藻酸盐组合物中不培养细胞的情况下进行的。在另一个方面，本文提供了用于制备适合于在将冷冻保存的细胞融化后立即施用于受试者的冷冻保存的细胞的方法。根据这个方面，在冷冻保存前将冷冻保存的细胞悬浮在液体海藻酸盐中并且能够在融化后立即施用于受试者，而无需在施用前培养所述包封的细胞。在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于制备适合施用于受试者的包封的细胞群体的方法，所述方法包括：（i）将细胞群体与包含液体海藻酸盐的冷冻保存溶液合并以产生细胞/液体海藻酸盐组合物；（ii）冷冻保存所述细胞/液体海藻酸盐组合物；（iii）融化所述细胞/液体海藻酸盐组合物；和（iv）包封所述细胞/液体海藻酸盐组合物中的细胞。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.12.30 US 61/428,4271.一种用于制备适合施用于受试者的包封的细胞群体的方法，所述方法包括: (i)将细胞群体与包含液体海藻酸盐的冷冻保存溶液合并以产生细胞/液体海藻酸盐组合物； (ii)冷冻保存所述细胞/液体海藻酸盐组合物； (iii)融化所述细胞/液体海藻酸盐组合物；和 (iv)包封所述细胞/液体海藻酸盐组合物中的细胞。2.一种用于制备适合施用于受试者的细胞群体的方法，所述方法包括: (i)将细胞群体与包含液体海藻酸盐的冷冻保存溶液合并以产生细胞/液体海藻酸盐组合物；和 (ii)冷冻保存所述细胞/液体海藻酸盐组合物， 其中，所述冷冻保存的细胞/液体海藻酸盐组合物中的细胞可以在融化后立即施用于受试者。3.一种用于将包封的细胞群体施用于受试者的方法，所述方法包括: (i)将细胞群体与包含 液体海藻酸盐的冷冻保存溶液合并以产生细胞/液体海藻酸盐组合物； (ii)冷冻保存所述细胞/液体海藻酸盐组合物； (iii)融化所述冷冻保存的细胞/液体海藻酸盐组合物； (iv)包封所述细胞/液体海藻酸盐组合物；和 (v)将所述包封的细胞/液体海藻酸盐组合物施用于受试者， 其中，所述施用是在步骤(iv)的包封后在所述细胞/液体海藻酸盐组合物中不培养所述细胞的情况下进行的。4.一种用于将细胞群体施用于受试者的方法，所述方法包括: (i)将细胞群体与包含液体海藻酸盐的冷冻保存溶液合并以产生细胞/液体海藻酸盐组合物； (ii)冷冻保存所述细胞/液体海藻酸盐组合物； (iii)融化所述细胞/液体海藻酸盐组合物；和 (iv)将所述细胞/液体海藻酸盐组合物施用于受试者， 其中，所述施用是在步骤(iii)的融化后在所述细胞/液体海藻酸盐组合物中不培养所述细...

【专利技术属性】
技术研发人员：萨沙·阿布拉门逊，
申请(专利权)人：人类起源公司，
类型：
国别省市：