一种用于检测鸡显性白羽位点基因型的引物、试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测鸡显性白羽位点基因型的引物、试剂盒及检测方法，属于生物技术领域。本发明专利技术针对显性白羽野生纯合子个体在PMEL17基因第10外显子存在的一个9bp插入这一特征，设计上游引物引入PvuⅡ酶切位点，是否存在插入序列与是否存在酶切位点之间是相互对应的关系。通过对待判定基因型的鸡进行翅静脉采血，提取基因组DNA，用引物对P进行PCR扩增；然后对PCR产物进行PvuⅡ37℃酶切过夜，电泳检测酶切产物；最后根据电泳结果判定鸡显性白羽位点的基因型。与SSCP和直接测序的方法相比，本发明专利技术建立的分子生物学方法操作简单、成本低、周期短，大大提高了该位点基因型判定的准确性，不需要特殊的仪器，易推广普及。

【技术实现步骤摘要】
—种用于检测鸡显性白羽位点基因型的引物、试剂盒及检测方法
本专利技术具体涉及一种用于检测鸡显性白羽位点基因型的引物，以及包含该引物的试剂盒及检测方法，属于生物
。
技术介绍
随着城市卫生的规范管理和环境控制要求的严格，大中城市农贸市场活禽销售量将逐渐减少，白条鸡和分割鸡形式上市的肉鸡产品份额将不断增加。对于冷鲜鸡市场来说，有色羽肉鸡常因屠宰后羽毛不容易脱干净而影响屠体的美观，所以显性白羽鸡在品种的培育中具有重要意义。白羽鸡从基因型上可以分为纯合显性白羽、杂合显性白羽和隐性白羽三种类型。我们在显性白羽鸡的育种中需要选育出纯合显性白羽基因型，来满足的育种需求。因此利用分子生物手段来诊断某个体在显性白羽位点的基因型，这对我们育种来说是非常重要和必要的。显性白羽基因座是影响鸡羽色形成的最重要基因座位之一，其座位上的显性等位基因I会阻碍羽毛黑色 素合成，从而使携带此基因型的个体全身羽毛呈现白色。目前已确认显性白等位基因是由于PMEL17基因第10外显子9bp插入造成的。即显性等位基因I是PMEL17基因第10外显子含9bp插入基因型，隐性等位基因i是PMEL17基因第10外显本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测鸡显性白羽位点基因型的引物，其特征在于：包括引物对P：上游引物P?F：5’?AGTGGCACCACGCTCACCGTGGGGCAGCT?3’；下游引物P?R：5’?GAGGGGGTGAGTGCTGTGTTCTC?3’。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测鸡显性白羽位点基因型的引物，其特征在于:包括引物对P:上游引物 P-F:5’ -AGTGGCACCACGCTCACCGTGGGGCAGCT-3，；下游引物 P-R:5’ -GAGGGGGTGAGTGCTGTGTTCTC-3’。2.一种用于检测鸡显性白羽位点基因型的试剂盒，其特征在于:主要包括引物对P:上游引物 P-F:5’ -AGTGGCACCACGCTCACCGTGGGGCAGCT-3，；下游引物 P-R:5’ -GAGGGGGTGAGTGCTGTGTTCTC-3’。3.根据权利要求2所述的用于检测鸡显性白羽位点基因型的试剂盒，其特征在于:还包括 2XTaq PCR MasterMix、灭菌超纯水，以及包含 600bp、500bp、400bp、300bp、200bp 和IOObp 的 DNA Marker。4.一种检测鸡显性白羽位点基因型的方法，其特征在于:包括以下步骤:(1)以包含PMEL17基因的待测鸡全基因组DNA为模板，以弓丨物对P为引物PCR扩增PMEL17基因第十外显子，得到扩增片段；所述的引物对P为:上游引物 P-F:5’ -AGTGGCACCACGCTCACCGTGGGGCAGCT-3，,下游引物 P-R:5’ -GAGGGGGTGAGTGCTGTGTTCTC-3’ ；(2)对扩增片段进行PvuII酶切，对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定鸡显性白羽位点的基因型。5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：康相涛，杨朋坤，闫峰宾，李国喜，田亚东，李转见，孙桂荣，王彦彬，刘小军，吕世杰，韩瑞丽，蒋瑞瑞，王丹丹，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：