【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】以下的说明书说具体地描述了本专利技术及其实施方式。
本专利技术涉及用于增强植物的碳(C)、氮(N)、生物量和产量的表达构建体。另外，本专利技术提供了通过使用前述的表达构建体增强C和N水平并随之改进植物的生物量和产量的方法，所述构建体利用源自酶(磷酸烯醇丙酮酸羧化酶(以下称为“PEPCase”)，谷氨酰胺合成酶(以下称为“GS”)和天冬氨酸氨基转移酶(以下称为“AspAT”))之基因的共同过表达(co-overexpression)。特别地,本专利技术涉及编码所述蛋白的核酸序列在植物细胞中表达的转基因植物。更特别地，本专利技术涉及用实现在组成型启动子控制下的三个基因的共同过表达的遗传构建体转化植物，所述三个基因中一个基因PEPCase编码负责捕获CO2的酶，而另外两个编码参与N同化的酶(AspAT和GS)，其中N同化所需要的C骨架由PEPCase满足，其包括用AspAT+GS+PEPCase基因转化的植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)和此基因在植物中的表达，从而提高植物的C和N状态以及生物量和产量。专利技术背景和现有技术本专利技术涉及具有三个基因(即AspAT、GS和PEPCase)的共同过表达从而导致C、N含量、生物量和产量组分提高的经转化植物。PEPC酶(EC.4.1.1.31)是在植物中普遍存在的酶，在HC03_和Mg2+的存在下催化磷酸烯醇丙酮酸(以下称为“PEP”)的β-羧化，得到草酰乙酸(oxaloacetate)(以下称为“0ΑΑ”)和无机磷酸盐(inorganic phosphate)(以下称为“Pi”)，它主要具...
【技术保护点】
SEQ?ID?NO.7所示的用于AspAT、GS和PEPCase基因之共表达的表达构建体，其包含与至少一个控制序列和转录终止子序列相连的SEQ?ID?NO：1、SEQ?ID?NO：2和SEQ?ID?NO：3所示核苷酸序列，其中SEQ?ID?NO：1示出AspAT基因，SEQ?ID?NO：2示出GS基因以及SEQ?ID?NO：3示出PEPCase基因，所述表达构建体可用于使植物相对于野生型或未转化植物具有提高的碳、氮、生物量和产量。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.04.19 IN 1143/DEL/20111.SEQ ID N0.7所示的用于AspAT、GS和PEPCase基因之共表达的表达构建体，其包含与至少一个控制序列和转录终止子序列相连的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示核苷酸序列，其中SEQ ID NO:1示出AspAT基因，SEQ ID NO:2示出GS基因以及SEQID NO:3示出PEPCase基因，所述表达构建体可用于使植物相对于野生型或未转化植物具有提高的碳、氮、生物量和产量。2.权利要求1所述的表达构建体，其中所述控制序列如SEQID N0.4所示，所述转录终止子序列如SEQ ID N0.5所示。3.权利要求1所述的表达构建体，其中所述控制序列是选自以下的组成型启动子:CaMV35S启动子、核酮糖二磷酸羧化酶-加氧酶启动子、泛素启动子、肌动蛋白启动子。4.权利要求1所述的表达构建体，其中所使用的终止子优选选自Nos终止子和CaMV3' UTR。5.权利要求1所述的表达构建体，其中具有所述SEQID N0.7的多核苷酸在植物中过表达。6.用于制备权利要求1所述的表达构建体的方法，其中所述方法包括以下步骤: i)使用SEQID NO:10和SEQ ID NO:11所示引物扩增编码SEQ ID NO:1所示基因的cDNA序列，使用SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示引物扩增编码SEQ ID NO:2所示基因的cDNA序列，以及使用SEQ ID N0:12和SEQ ID NO:13所示引物扩增编码SEQ ID N0:3所示基因的cDNA序列； ii)将在步骤Q)中获得的SEQID NO:1、2和3的扩增产物独立地克隆入pGEM_T easy载体中；· iii)将来自步骤(ii)中获得之阳性克隆的质粒独立地与PCAMBIA1302—起消化，以及进一步将消化的基因产物与PCAMBIA1302连接并转化入大肠杆菌(E.coli)DH5a细胞中； iv)对来自步骤(iii)中获得之阳性菌落的质粒进行测序，确认AspAT::pCAMBIA1302 ；GS::pCAMBIA...
【专利技术属性】
技术研发人员：阿尼什·卡奇拉，苏伦德·库马尔·瓦茨，帕拉姆维尔·辛格·阿胡贾，桑贾伊·库马尔，
申请(专利权)人：科学与工业研究会，
类型：
国别省市：
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