结合ABCA1多肽的抗体制造技术

本发明专利技术涉及结合天然ABCA1多肽的分离的抗体及其在检测组织样品中的ABCA1多肽中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合ABCA1多肽的抗体本专利技术涉及结合ABCAl多肽的抗体及其在检测ABCAl多肽的方法中的用途。ATP 结合盒转运蛋白 Al (ATP-binding cassette transporter Al,ABCA1)是依赖ATP的转运蛋白，其介导胆固醇和磷脂向胞外缺乏脂质的HDL颗粒的流出。人ABCAl多肽的氨基酸序列在Seq.1d.N0.1中给出。ABCAl是通过磷脂和载脂蛋白的新生HDL颗粒的装配所必不可少的。ABCAl充当从细胞到载脂蛋白的脂质流出的关键调节物，并且因此参与降低动脉粥样硬化的风险。ABCAl在影响血浆HDL水平方面是关键性的。在肝和小肠中有活性，产生大部分循环的HDL。编码ABCAl的基因的缺陷被证明是家族性低α脂蛋白血症(familial hypoalphalipoproteinemia, FHA)的一个遗传病因。市售的抗ABCAl抗体不适用于检测组织样品中的天然ABCAl多肽。因此，需要能够检测组织样品中的天然ABCAl多肽的抗ABCAl抗体。在第一方面，本专利技术涉及结合天然ABCAl多肽的分离的抗体。在一个具体实施方案中，所述ABCAl多肽是人ABCAl多肽。 在另一个具体实施方案中，所述抗-ABCAl抗体是单克隆抗体。在另一个具体实施方案中，所述抗体通过用表达ABCAl多肽(优选人ABCAl多肽)的全细胞免疫合适的动物来产生。在另一个具体实施方案中，所述抗体包含可获自选自由杂交瘤细胞系ABCA1-3/84 (DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系 ABCA1-3/125 (DSM ACC3110)和杂交瘤细胞系ABCA1-4/18 (DSM ACC3111)组成的组的杂交瘤细胞系的抗体的VH结构域的⑶R3，和可获自选自由杂交瘤细胞系ABCA1-3/84 (DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系ABCA1-3/125 (DSMACC3110)和杂交瘤细胞系ABCAl-4/18(DSM ACC3111)组成的组的杂交瘤细胞的抗体的VL结构域的⑶R3。在另一个一个具体实施方案中，所述抗体包含可获自选自由杂交瘤细胞系ABCA1-3/84 (DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系 ABCA1-3/125 (DSM ACC3110)和杂交瘤细胞系ABCA1-4/18 (DSM ACC3111)组成的组的杂交瘤细胞系的抗体的VH结构域的CDRl至CDR3，和可获自选自由杂交瘤细胞系ABCA1-3/84 (DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系ABCA1-3/125 (DSMACC3110)和杂交瘤细胞系ABCAl-4/18(DSM ACC3111)组成的组的杂交瘤细胞的抗体的VL结构域的⑶Rl至⑶R3。在另一个具体实施方案中，所述抗体包含可获自选自由ABCA1-3/84(DSMACC3109)、杂交瘤细胞系 ABCAl-3/125(DSM ACC3110)和杂交瘤细胞系 ABCA1-4/18 (DSMACC3111)组成的组的杂交瘤细胞系的抗体的VH结构域和VL结构域。在另一个具体实施方案中，所述抗体由选自由杂交瘤细胞系ABCA1_3/84(DSMACC3109)、杂交瘤细胞系 ABCAl-3/125(DSM ACC3110)和杂交瘤细胞系 ABCA1-4/18 (DSMACC3111)组成的组的杂交瘤细胞系产生。在另一方面，本专利技术涉及选自由杂交瘤细胞系ABCAl-3/84(DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系ABCAl-3/125(DSM ACC3110)和杂交瘤细胞系ABCA1-4/18 (DSMACC3111)组成的组的杂交瘤细胞系。在另一方面，本专利技术涉及分离的核酸，所述分离的核酸包含编码可获自选自由杂交瘤细胞系 ABCAl-3/84(DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系 ABCA1-3/125 (DSM ACC3110)和杂交瘤细胞系ABCAl-4/18(DSM ACC3111)组成的组的杂交瘤细胞系的抗体的VH结构域的序列。在另一方面中，本专利技术提供分离的核酸，所述分离的核酸包含编码可获自选自由杂交瘤细胞系 ABCAl-3/84(DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系 ABCA1-3/125 (DSM ACC3110)和杂交瘤细胞系ABCAl-4/18(DSM ACC3111)组成的组的杂交瘤细胞系的抗体的VL结构域的序列。在另一方面中，本专利技术提供分离的核酸，所述分离的核酸包含编码由选自由杂交瘤细胞系 ABCAl-3/84(DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系 ABCA1-3/125 (DSM ACC3110)和杂交瘤细胞系ABCA1-4/18 (DSM ACC3111)组成的组的杂交瘤细胞系产生的抗体的序列。在另一方面中，本专利技术提供包含本专利技术的核酸的载体和包含本专利技术的载体的宿主细胞。在另一方面中，本专利技术提供产生抗体的方法，所述方法包括培养本专利技术的宿主细胞以产生所述抗体。在另一方面中，本专利技术提供本专利技术的抗体在检测动物的组织样品中的ABCAl多肽中的用途。在本专利技术的用途的一个具体实施方案中，所述组织样品是全血。[0021 ] 在本专利技术的用途的一个具体实施方案中，所述动物是人受试者。在另一方面中，本专利技术提供检测动物的组织样品中的ABCAl多肽的方法，所述方法包括:`a)提供所述动物的组织样品，b)使用本专利技术的抗体检测步骤a)的样品中的ABCAl多肽。在一个具体实施方案中，所述组织样品是全血。在一个具体实施方案中，所述动物是人受试者。在一个具体实施方案，步骤b)中的对ABCAl多肽的检测通过流式细胞术进行。附图简述图1显示术语“染色指数”。蓝色:表达ABCAl的FLP293细胞系；白色:亲本细胞系 293。图2a:在FACS测定中使用商业的抗-ABCAl抗体Novus DyLight488在表达ABCAl的FLP293细胞系(FLP293/ABCA1细胞系)中检测ABCAl表面表达；染色指数为1.54 (荧光FLP293ABCA1细胞系/荧光FLP293亲本细胞系);蓝色:表达ABCAl的FLP293细胞系；白色:亲本细胞系293。抗体稀释:1:200图2b:在FACS测定中使用商业的抗-ABCAl抗体ab81950生物素在表达ABCAl的FLP293细胞系(FLP293/ABCA1细胞系)中检测ABCAl表面表达；染色指数为1.24(荧光FLP293ABCA1细胞系/荧光FLP293亲本细胞系);蓝色:表达ABCAl的FLP293细胞系；白色:亲本细胞系293。抗体稀释:1:200图2c:在FACS测定中使用商业的抗-ABCAl抗体Novus生物素在表达ABCAl的FLP293细胞系(FLP293/ABCA1细胞系)中检测ABCAl表面表达；染色指数为1.28(荧光FLP293ABCA1细胞系/荧光FLP293亲本细胞系);蓝色:表达ABCAl的FLP293细胞系；白色:亲本细胞系293。抗体稀释:1:200图2d:在FACS测定中使用商业的抗-ABCA1抗体abl8180在表达ABCAl的FLP293细胞系(FLP293/ABCA1细胞系)中检测ABCAl表面表达；染色指数为1.41 (荧光FLP293ABCA1细胞系/荧光FLP293亲本细胞系);蓝色:表达A本文档来自技高网...

【技术保护点】
结合ABCA1多肽的分离的抗体，其中所述抗体结合天然ABCA1多肽。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.06.15 EP 11169924.5;2011.07.20 EP 11174755.61.结合ABCAl多肽的分离的抗体，其中所述抗体结合天然ABCAl多肽。2.根据权利要求1所述的分离的抗体，其中所述ABCAl多肽是人ABCAl多肽。3.根据权利要求1或2所述的分离的抗体，其是单克隆抗体。4.根据权利要求1至3所述的分离的抗体，其中所述抗体通过用表达所述ABCAl多肽、优选人ABCAl多肽的全细胞免疫合适的动物产生。5.根据权利要求1至4所述的分离的抗体，其中所述抗体包含可获自选自由杂交瘤细胞系 ABCAl-3/84(DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系 ABCA1-3/125 (DSM ACC3110)和杂交瘤细胞系ABCAl-4/18(DSM ACC3111)组成的组的杂交瘤细胞系的抗体的VH结构域的⑶R3，和可获自选自由杂交瘤细胞系ABCA1-3/84(DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系ABCA1-3/125 (DSMACC3110)和杂交瘤细胞系ABCA1-4/18 (DSM ACC3111)组成的组的杂交瘤细胞的抗体的VL结构域的⑶R3。6.根据权利要求1至5所述的分离的抗体，其中所述抗体包含可获自选自由杂交瘤细胞系 ABCA1-3/84 (DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系 ABCA1-3/125 (DSM ACC3110)和杂交瘤细胞系ABCAl-4/18(DSM ACC3111)组成的组的杂交瘤细胞系的抗体的VH结构域的CDRl至CDR3，和可获自选自由杂交瘤细胞系ABCAl-3/84(DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系ABCAl-3/125(DSM ACC3110)和杂交瘤细胞系ABCA1-4/18 (DSM ACC3111)组成的组的杂交瘤细胞的抗体的VL结构域的⑶Rl至⑶R3。7.根据权利要求1至6所述的分离的抗体，其中所述抗体包含可获自选自由ABCA1-3/84 (DSM ACC3109)、杂交瘤细胞系 ABCA1-3/125 (DSM ACC3110)和杂交瘤细胞系ABCA1-4/18 (DSM ACC 3111)组成的组的杂交瘤细胞系的抗体的VH结构域和VL结构域。8.根据权利要求1至7所述的分离的抗体，其中所述抗体由选自由杂交瘤细胞系ABCA1-3/84(DSM AC...

【专利技术属性】
技术研发人员：芭芭拉·埃卡贝尔特，于格·马蒂勒，埃弗森·诺戈切克，伯恩哈德·赖斯，王海燕，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
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