一种β-胡萝卜素降解酶的纯化方法技术

技术编号:9638904 阅读:144 留言:0更新日期:2014-02-06 15:59
本发明专利技术公开了一种β-胡萝卜素降解酶的纯化方法,该方法首先在改良查氏培养基中培养产β-胡萝卜素降解酶的葡萄球菌,培养24h,10000r?min-1离心20min取上清得到粗酶液,采用冷冻干燥将粗酶液浓缩,用于纯化。该方法采用蛋白纯化系统(AKTA?purifier100system)和高效制备液相(PHPLC)相结合的方式纯化β-胡萝卜素降解酶,并通过HPLC检测酶纯度,能快速的纯化得到纯度达95%的纯酶。该发明专利技术前处理较为简单易行,纯化过程稳定,重复性高,可得到大量纯酶,为其在工业上用于降解β-胡萝卜素产香奠定基础。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了,该方法首先在改良查氏培养基中培养产β-胡萝卜素降解酶的葡萄球菌,培养24h,10000r?min-1离心20min取上清得到粗酶液,采用冷冻干燥将粗酶液浓缩,用于纯化。该方法采用蛋白纯化系统(AKTA?purifier100system)和高效制备液相(PHPLC)相结合的方式纯化β-胡萝卜素降解酶,并通过HPLC检测酶纯度,能快速的纯化得到纯度达95%的纯酶。该专利技术前处理较为简单易行,纯化过程稳定,重复性高,可得到大量纯酶,为其在工业上用于降解β-胡萝卜素产香奠定基础。【专利说明】—种β-胡萝卜素降解酶的纯化方法
本专利技术属于食品生物
,涉及一种化合物的纯化方法,特别涉及。
技术介绍
香气是各类食品的重要特征之一,香气的种类、含量是衡量食品质量的重要依据,在很大程度上决定人们对食品的喜好。降异戊二烯化合物广泛存在于果酒、水果及烟草中,是对食品香气品质具有重要影响的化合物。降异戊二烯香气化合物一般含有13个碳原子,这一类香气化合物的典型代表是紫罗兰酮和大马酮,因其具有特殊的香气,在食品、发酵酒、香料、烟草等行业占有重要地位。类胡萝本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种β?胡萝卜素降解酶的纯化方法,其特征在于,该方法采用蛋白纯化系统和高效液相色谱法对β?胡萝卜素降解酶进行纯化,利用高效液相色谱法对其纯度进行鉴定,并算出该酶纯化每一步的酶活和比活力,具体按下列步骤操作:1)在改良查氏培养基中培养葡萄球菌,培养条件为:37℃,恒温培养24h;2)培养结束后,将发酵液于10000r?min?14℃离心20min,取上清得粗酶液,冷冻、干燥、浓缩粗酶液至规定的浓度,取浓缩液过0.22μm有机系滤膜,过滤液用于进一步纯化酶;3)纯化:纯化分三步:第一步是离子交换,上样于蛋白纯化系统,条件:强阴离子柱MONO?Q10/100GL,选择合适的缓冲液进行线性洗脱,选择三...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:樊明涛朱明明王树林
申请(专利权)人:西北农林科技大学
类型:发明
国别省市:

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