用于北极海洋放线菌Streptomyces sp.生产大环四重内酯类化合物的培养基制造技术

本发明专利技术涉及用于北极海洋放线菌Streptomyces?sp.生产大环四重内酯类化合物的培养基。本发明专利技术培养基适于北极放线菌的生长，且可大大提高大环四重内酯类化合物Dinactin的产量。

【技术实现步骤摘要】
用于北极海洋放线菌Streptomycessp.生产大环四重内酯类化合物的培养基
本专利技术属于生物
，更具体地，本专利技术涉及用于北极海洋放线菌Streptomycessp.(更佳地是Streptomycessp.R-527F)生产大环四重内酯类化合物(更佳地是Dinactin)的培养基及其制备方法。
技术介绍
天然来源的放线菌能产生种类丰富的次级代谢产物，具有新颖独特结构和潜在生物活性的抗菌剂如链霉素、红霉素、四环素等都是由放线菌产生的。因此，放线菌作为天然药物资源先导化合物的优良资源被广泛研究。海洋微生物在新药开发、新型酶制剂研制等生物
具有广阔的前景。远洋和极地地区地域辽阔，覆盖了地球系统的低温、高盐、高压、寡营养、巨幅变化的光辐射等多种特殊环境，这些特殊环境造就了微生物在基因结构、遗传、适应、代谢及产物等方面的独特性和多样性，蕴涵着生命进化历程的丰富信息，是生物遗传和功能多样性非常丰富的资源宝藏。开展极地和极端药源微生物资源的挖掘、储备和功能研究，获得该资源
更多自主知识产权具有重要价值。统计表明，新发现的嗜冷菌77%的新种和83%的新属来自极地环境，因此极地地区是嗜冷菌等重要极端微生物资源的主要源地。北极海洋放线菌Streptomycessp.R-527F是由中国极地研究中心自北冰洋73°N以北海域沉积物中分离得到。在该菌株的发酵液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、白色念珠菌(Candidaalbicans)等均具有抑制活性，并从中分离得到多种大环四重内脂类化合物，其中Dinactin的生物活性较显著。然而，Streptomycessp.R-527F在原始培养基中生长大环四重内脂化合物的产量很低，成为各项药物活性评价研究的瓶颈。因此，通过系统地培养基优化及其培养环境、发酵工艺以期实现高产发酵是亟待解决的问题。因此开发一种促进北极海洋放线菌Streptomycessp.R-527F合成Dinactin的新型培养基是实现大规模高效发酵生产的重要基础。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供用于北极海洋放线菌Streptomycessp.生产大环四重内酯类化合物的培养基及其制备方法。在本专利技术的第一方面，提供一种北极海洋放线菌Streptomycessp.的培养基，所述培养基包括以下组分：(a)葡萄糖5-20g/L；(b)黄豆粉0.5-12g/L；(a)和(b)的组分溶于人工海水中；其中，所述的人工海水含有：在一个优选例中，所述的北极海洋放线菌Streptomycessp.是Streptomycessp.R-527F。在另一优选例中，所述培养基中，葡萄糖和黄豆粉的浓度是：(a)葡萄糖4-18g/L；(b)黄豆粉1-10g/L；所述的人工海水含有：在另一优选例中，所述培养基中，葡萄糖和黄豆粉的浓度是：(a)葡萄糖9-18g/L；(b)黄豆粉1-6g/L；所述的人工海水含有：在另一优选例中，所述培养基中，葡萄糖和黄豆粉的浓度是：(a)葡萄糖14.89g/L；(b)黄豆粉2.5g/L；所述的人工海水含有：其中，各组分在培养基中的含量按照重量份可在±10%(更佳地±5%)范围内浮动。在另一优选例中，所述培养基中，各组分配制于水(较佳地，所述的水是去离子水)中；和/或所述培养基的pH值5.0-5.5。在另一优选例中，所述的方法还包括：将混匀及调节pH值后的培养基在121℃，灭菌15-20min。在本专利技术的另一方面，提供所述的培养基的用途，用于培养北极海洋放线菌Streptomycessp.R-527F，生产大环四重内酯化合Dinactin。在本专利技术的另一方面，提供一种制备北极海洋放线菌Streptomycessp.的培养基的方法，所述方法包括：将前面任一所述的培养基的各组分在水中混匀，调节至pH值5.0-5.5。在本专利技术的另一方面，提供一种制备前面任一所述的北极海洋放线菌Streptomycessp.的培养基的方法，所述方法包括：(a)将所述氯化钠、硫酸钠、碳酸氢钠、溴化钾、硼酸、六水氯化镁、七水硫酸镁、一水硫酸锰、无水氯化钙逐一溶解，混合均匀；(b)将所述黄豆粉用少量温水溶解，搅拌均匀，溶于人工海水；(c)将葡萄糖溶于(b)的混合液中；(d)将(c)混合液与(a)混合液均匀混合，获得所述的培养基；其中，各组分的用量按照前面任一所述。在另一优选例中，所述方法还包括：将所述的培养基调节至pH值5.0-6.0。在另一优选例中，所述的方法还包括：将混匀及调节pH值后的培养基在121℃，灭菌15-20min。在本专利技术的另一方面，提供一种利用北极海洋放线菌Streptomycessp.生产大环四重内脂类化合物的方法，所述方法包括：利用前面任一所述的培养基培养北极海洋放线菌Streptomycessp.R-527F，从而生产大环四重内酯类化合物Dinactin。在一个优选例中，将北极海洋放线菌Streptomycessp.按照体积以3-10%的接种量接入前面任一所述的培养基，发酵培养5-8天，获得发酵液，其中含有大环四重内脂类化合物Dinactin。在本专利技术的另一方面，提供一种用于培养北极海洋放线菌Streptomycessp.的试剂盒，所述试剂盒中包括：前面任一所述的培养基。具体实施方式本专利技术人经过长期而深入的研究，研究开发了一种新的适合于培养北极海洋放线菌Streptomycessp.(更佳地是Streptomycessp.R-527F)使之高效生产大环四重内酯化合物(较佳地为Dinactin)的培养基配方。本专利技术的培养基，适合于北极海洋放线菌Streptomycessp.的生长，且可大大地提高Dinactin的产量。如本文所用，所述的“含有”，“具有”或“包括”包括了“包含”、“主要由……构成”、“基本上由……构成”、和“由……构成”；“主要由……构成”、“基本上由……构成”和“由……构成”属于“含有”、“具有”或“包括”的下位概念。术语“北极海洋放线菌Streptomycessp.的培养基”指含有葡萄糖、黄豆粉、氯化钠、硫酸钠、碳酸氢钠、溴化钾、硼酸、七水硫酸镁、六水氯化镁、七水硫酸镁、一水硫酸锰、无水氯化钙的组合物；或基本上由葡萄糖、黄豆粉、氯化钠、硫酸钠、碳酸氢钠、溴化钾、硼酸、七水硫酸镁、六水氯化镁、七水硫酸镁、一水硫酸锰、无水氯化钙组成的组合物。在组合物中，所述的葡萄糖、黄豆粉、氯化钠、硫酸钠、碳酸氢钠、溴化钾、硼酸、七水硫酸镁、六水氯化镁、七水硫酸镁、一水硫酸锰、无水氯化钙占培养基总重量的80-100%，较佳地占90-100%，更佳地占95-100%，如98%，99%。作为本专利技术的优选方式，用于配制本专利技术的北极海洋放线菌Streptomycessp.(更佳地是Streptomycessp.R-527F)培养基的各组分的用量如表1所示。表1在得知本专利技术的北极海洋放线菌Streptomycessp.(更佳地是Streptomycessp.R-527F)培养基所用的组分及其配方以后，本领域技术人员可方便地进行配制。本专利技术的培养基的应用的组分(原料)均为商业化的普通化学产品本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种北极海洋放线菌Streptomyces?sp.的培养基，其特征在于，所述培养基包括以下组分：(a)葡萄糖?????????????5?20g/L；(b)黄豆粉???????????0.5?12g/L；(a)和(b)的组分溶于人工海水中；其中，所述的人工海水含有：FDA0000400527770000011.jpg

【技术特征摘要】
1.一种北极海洋放线菌Streptomycessp.R-527F的培养基，其特征在于，所述培养基包括以下组分：(a)葡萄糖10.828-16.219g/L；(b)黄豆粉1.5-4.5g/L；(a)和(b)的组分溶于人工海水中；其中，所述的人工海水含有：2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述方法包括：分别称取葡萄糖、黄豆粉，溶于所述的人工海水中，使得它们在培养基中的终浓度分别为10.828-16.219g/L、1.5-4.5g/L。3.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基的pH值5.0-6.0。4.权利要求1-3任一所述的培养基的用途，用于培养北极海洋放线菌Streptomycessp.R-527F，生产大环四重内酯类化合物Dinactin。5.一种制备权利要求1-3任一所述的北极海洋放线菌Streptomycessp.R-527F的培养基的方法，其特征在于，所述方法包括：(a)将所述氯化钠、硫酸钠、碳酸氢钠、溴化钾、硼酸、六水氯化镁、七水硫酸镁、一水硫酸锰、无水氯化钙逐一溶解，混合均匀；(b)将所述黄豆粉...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡孟浩，周娇，周祥山，张元兴，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：