以减毒沙门氏菌为载体的口服肿瘤疫苗的制备及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种以减毒沙门氏菌为载体的口服肿瘤疫苗的制备及其应用，该疫苗的制备包括以下步骤：(1)首先通过分子生物学方法构建整合了微基因与自转运系统的重组疫苗载体；(2)将步骤(1)所述的重组疫苗载体电转化入减毒沙门氏菌SL7207中，构建出重组口服肿瘤疫苗。本发明专利技术首次将微基因与自转运系统整合到同一个载体上，通过电转化沙门氏菌获得了口服肿瘤疫苗，通过小鼠肿瘤模型，验证了该疫苗对肿瘤的免疫预防效果；从而可以将其应用在制备肿瘤的免疫预防药物领域中。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种以减毒沙门氏菌为载体的口服肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)?包含Melan?A抗原的AIDA?I表面展示原件的构建：通过PCR方法从大肠杆菌E393中扩增出AIDA?1表达元件的质粒pMK90，用KpnI和XbalI双酶切该质粒，回收载体大片段；设计特异性引物Seq?NO.1和SeqNO.2，以B16细胞的cDNA为模板，PCR扩增出Melan?A基因，分别用KpnI和XbalI双酶切，回收产物并将其与上述回收的载体大片段连接；将连接产物转化至DH10B的感受态细菌，挑菌并酶切鉴定获得阳性质粒；取该质粒进一步测序鉴定其编码基因序列，取测序鉴定正确的阳性质粒命名为pBMA...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵李祥，梅雨，刘海燕，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：