用于鉴定小麦面粉色泽相关基因的PCR体系制造技术

本发明专利技术公开了一种用于鉴定或辅助鉴定面粉色泽相关基因的PCR体系及其应用。本发明专利技术所提供的PCR体系中的引物对组为如下任一：1）引物对组A、引物对组B和引物对组C；2）引物对组A和引物对组C；3）引物对组C；引物对组A由引物对1（序列1和序列2）、引物对2（序列3和序列4）和引物对3（序列5和序列6）组成；引物对组B由引物对4（序列7和序列8）和引物对5（序列9和序列10）组成；引物对组C由引物对6（序列11和序列12）、引物对7（序列13和序列14）和引物对8（序列15和序列16）组成。这些引物对组各引物间不存在抑制和错配，实现同一温度一次PCR完成一组基因的鉴别，且结果可靠、特异性强。本发明专利技术为小麦色泽品质育种提供参考。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种用于鉴定或辅助鉴定面粉色泽相关基因的PCR体系及其应用。本专利技术所提供的PCR体系中的引物对组为如下任一：1）引物对组A、引物对组B和引物对组C；2）引物对组A和引物对组C；3）引物对组C；引物对组A由引物对1（序列1和序列2）、引物对2（序列3和序列4）和引物对3（序列5和序列6）组成；引物对组B由引物对4（序列7和序列8）和引物对5（序列9和序列10）组成；引物对组C由引物对6（序列11和序列12）、引物对7（序列13和序列14）和引物对8（序列15和序列16）组成。这些引物对组各引物间不存在抑制和错配，实现同一温度一次PCR完成一组基因的鉴别，且结果可靠、特异性强。本专利技术为小麦色泽品质育种提供参考。【专利说明】用于鉴定小麦面粉色泽相关基因的PCR体系
本专利技术涉及一种用于鉴定或辅助鉴定面粉色泽相关基因的PCR体系及其应用，特别涉及一种用于鉴定或辅助鉴定待测新疆冬小麦的面粉色泽相关基因如Psy-AUTaLox-Bl和Ppo-Dl的多重PCR引物对组、试剂盒及其应用。
技术介绍
小麦面制食品作为我国人民最重要的主食之一，为我国以面食为主地区的人民提供50-80%以上的能量来源。随着社会生活水平不断提高，人们对小麦面制品品质的要求越来越高，品质育种也越来越受到重视。中国作为小麦最大的生产国和消费国，每年仅用来生产面条的小麦量约占小麦总消费量的40%。而面条、馒头、饺子等我国传统的蒸煮类面制食品，色泽越白越受到我国消费者青睐。因此，在我国传统面制品的感官评价体系中，面制品的色泽占很大的比例，越白评分越高。然而，目前我国主栽小麦品种的面粉平均白度较低(74.8)，不能满足市场和消费者对面粉白度(80.0以上)的要求。在2005年前，大多数面粉厂为满足消费者对面粉白度的要求，向面粉中添加过氧化苯甲酰(ΒΡ0)。但BPO会破坏营养物质且对人类健康构成威胁，在国家最新修订的小麦粉标准中，已明确规定禁止使用ΒΡ0。因此制订育种目标，选育出自然白的小麦具有重要意义。同时，亮黄色的面粉也有一定的消费量，如黄碱面条、乌冬面、意大利面等也很受欢迎。因此，根据不同的加工目的，分别需要选育适合加工高白度或亮黄色面粉的小麦新品种。除了环境、增白剂、加工方式和栽培措施等外，小麦面粉及面制品颜色的形成主要受色素类物质和氧化还原酶类等遗传物质的影响。色素类物质主要包括黄色素(Yellowpigment, YP)和棕色素(Brown pigment),黄色素主要由类胡萝卜素(Carotenoid)和类黄酮(Flavonoid)组成,面粉中的氧化酶类主要包括多酹氧化酶(Polyphenol oxidase, ΡΡ0)、脂肪氧化酶(Lipoxygenase, L0X)和过氧化物酶(Peroxidase, POD)。YP 含量、LOX 及 PPO活性对面粉及面制品的色泽有重要影响。YP含量与面团黄度的相关系数高达0.8-0.9 ；L0X可催化多不饱和脂肪酸加氧形成过氧化物，反应所释放的氧自由基进一步氧化色素分子，使面粉变白；ΡΡ0在氧分子的参与下可催化单酚类物质最终变为氧合醌，生成褐色物质，决定面粉及面制品加工和贮存过程中色泽褐变的50-70%。当需要自然白小麦时，应选择含低YP含量基因型、高LOX活性基因型及低PPO活性基因型的小麦品种(系)。多重PCR是一种高效、低成本的检测方法，已成为研究的热点。虽然已经报道了数套与小麦面粉色泽基因相关的多重PCR体系，但仅涉及到PPO活性基因的Ppo-Al和Ppo-Dl位点，或PSY活性基因的Psy-Al位点，还未见到检测PSY活性基因的Psy-Bl位点、ZDS活性基因的TaZds-Al和TaZds-Dl位点，以及LOX活性基因TaLox-Bl位点的多重PCR体系的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于鉴定或辅助鉴定面粉色泽相关基因的PCR体系及其应用，特别涉及一种用于鉴定或辅助鉴定待测新疆冬小麦的面粉色泽相关基因如Psy-Al、TaLox-Bl和Ppo-Dl的多重PCR引物对组、试剂盒及其应用。本专利技术所提供的用于鉴定或辅助鉴定待测小麦拉面品质性状相关基因的多重PCR引物对组为如下al)或a2)或a3)的引物对组:a I)由引物对组A、引物对组B和引物对组C组成的引物对组；a2 )由引物对组A和引物对C组成的弓丨物对组；a3)引物对组C; 所述面粉色泽相关基因为Psy-Bl基因、TaZds-Al基因、TaZds-Dl基因、Ppo-Al基因、Psy-Al基因、TaLox-Bl基因和Ρρο-Dl基因。所述引物对组A由特异于所述Psy-Bl基因的两个引物对，和特异于所述TaZds-Al基因的一个引物对组成；具体的，所述特异于所述Psy-Bl基因的两个引物对分别为序列表中序列I和序列2所示的两条单链DNA组成的引物对1，以及序列3和序列4所示的两条单链DNA组成的引物对2 ;所述特异于所述TaZds-Al基因的一个引物对为序列表中序列5和序列6所示的两条单链DNA组成的引物对3 ；所述引物对组B由特异于所述TaZds-Dl基因的一个引物对，和特异于所述Ppo-Al基因的一个引物对组成；具体的，所述特异于所述TaZds-Dl基因的一个引物对为序列表中序列7和序列8所示的两条单链DNA组成的引物对4 ;所述特异于所述Ppo-Al基因的一个引物对为序列表中序列9和序列10所示的两条单链DNA组成的引物对5 ；所述引物对组C由特异于所述Psy-Al基因的一个引物对、特异于所述TaLox-Bl基因的一个引物对，和特异于所述Ppo-Dl基因的一个引物对组成；具体的，所述特异于所述Psy-Al基因的一个引物对为序列表中序列11和序列12所示的两条单链DNA组成的引物对6 ;所述特异于所述TaLox-Bl基因的一个引物对为序列表中序列13和序列14所示的两条单链DNA组成的引物对7 ;所述特异于所述Ppo-Dl基因的一个引物对为序列表中序列15和序列16所示的两条单链DNA组成的引物对8。其中，序列I由21个核苷酸组成；序列2由20个核苷酸组成；序列3由21个核苷酸组成；序列4由20个核苷酸组成；序列5由21个核苷酸组成；序列6由24个核苷酸组成；序列7由21个核苷酸组成；序列8由23个核苷酸组成；序列9由21个核苷酸组成；序列10由20个核苷酸组成；序列11由20个核苷酸组成；序列12由22个核苷酸组成；序列13由23个核苷酸组成；序列14由16个核苷酸组成；序列15由18个核苷酸组成；序列16由20个核苷酸组成。本专利技术中，所述Psy-Bl基因涉及三个等位基因，分别是Psy-Bla、Psy-Blb和Psy-Blc ;所述TaZds-Al基因涉及两个等位基因，分别是TaZds-Ala和TaZds-Alb ;所述TaZds-Dl基因涉及两个等位基因，分别是TaZds-Dla和TaZds-Dlb ;所述Ppo-Al基因涉及两个等位基因，分别是Ppo-Ala和Ppo-Alb ;所述Psy-Al基因涉及三个等位基因，分别是Psy-Ala,Psy-Alb和Psy-Alc ;所述TaLox-Bl基因涉及两个等位基因，分别是TaLox-Bla和TaLox-Blb ;所述Ppo-Dl本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于鉴定或辅助鉴定待测小麦面粉色泽相关基因的多重PCR引物对组，所述面粉色泽相关基因为Psy?B1基因、TaZds?A1基因、TaZds?D1基因、Ppo?A1基因、Psy?A1基因、TaLox?B1基因和Ppo?D1基因，其特征在于：所述多重PCR引物对组由引物对组A、引物对组B和引物对组C组成；所述引物对组A由特异于所述Psy?B1基因的两个引物对，和特异于所述TaZds?A1基因的一个引物对组成；所述引物对组B由特异于所述TaZds?D1基因的一个引物对，和特异于所述Ppo?A1基因的一个引物对组成；所述引物对组C由特异于所述Psy?A1基因的一个引物对、特异于所述TaLox?B1基因的一个引物对，和特异于所述Ppo?D1基因的一个引物对组成；所述引物对组A中，所述特异于所述Psy?B1基因的两个引物对分别为序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA组成的引物对1，以及序列3和序列4所示的两条单链DNA组成的引物对2；所述特异于所述TaZds?A1基因的一个引物对为序列表中序列5和序列6所示的两条单链DNA组成的引物对3；所述引物对组B中，所述特异于所述TaZds?D1基因的一个引物对为序列表中序列7和序列8所示的两条单链DNA组成的引物对4；所述特异于所述Ppo?A1基因的一个引物对为序列表中序列9和序列10所示的两条单链DNA组成的引物对5；所述引物对组C中，所述特异于所述Psy?A1基因的一个引物对为序列表中序列11和序列12所示的两条单链DNA组成的引物对6；所述特异于所述TaLox?B1基因的一个引物对为序列表中序列13和序列14所示的两条单链DNA组成的引物对7；所述特异于所述Ppo?D1基因的一个引物对为序列表中序列15和序列16所示的两条单链DNA组成的引物对8。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：穆培源，张晓科，相吉山，徐红军，张钰玉，桑伟，韩新年，聂迎彬，崔凤娟，邹波，
申请(专利权)人：新疆农垦科学院，
类型：发明
国别省市：