一种抑制人类免疫缺陷病毒的真菌提取物的制备方法技术

技术编号:9458558 阅读:110 留言:0更新日期:2013-12-18 20:45
一种抑制人类免疫缺陷病毒(HIV-1)的真菌提取物的制备方法,所依赖的菌株是炭团菌属真菌Q-s-4(Hypoxylon?sp.)。真菌Q-s-4经液体发酵培养,制备发酵产物的提取物。该方法可用于真菌Q-s-4的大规模工业化培养,并以发酵产物为原料,工业化生产发酵产物的提取物。利用该方法制备的提取物,具有显著抑制HIV-1整合酶的活性,并有抗菌活性,在治疗艾滋病和细菌感染的新药研发方面具有重要价值。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种制备保藏编号为CGMCC?No.6039的炭团菌属真菌Q?s?4(Hypoxylon?sp.)的发酵产物提取物的方法,包括步骤:(1)真菌的发酵培养将真菌Q?s?4自低温保藏的斜面试管菌种活化后,转接于含PDA培养基的平皿中,于25℃恒温培养5?12天,分别在菌落边缘打孔成菌片,并以小碎块接入液体培养基中进行发酵培养;液体培养基组成按重量百分含量计算为:麦麸1?5%,煮20?30分钟,取汁,葡萄糖1?4%,KH2PO40.1?0.4%,MgSO40.1?0.3%,pH自然;三角瓶或其他容器装液体培养基,装量为容器体积的30?60%;灭菌后接入真菌Q?s?4,22?26℃振荡暗培养12?30天,振荡转速90?130转/分钟;(2)真菌发酵产物的获得真菌Q?s?4经发酵培养后,用80?100目尼龙网过滤,分离菌丝体和发酵液;菌丝体用水冲洗干净,挤压除去大部分水分;发酵液40?60℃减压浓缩至原发酵液体积的10?20%;(3)真菌发酵产物提取物的制备①菌丝体用甲醇或95%乙醇超声提取2?3次,每次40?60分钟,每次提取用的溶剂体积为菌丝体重量的8?12倍;或菌丝体用甲醇、95%乙醇或丙酮渗漉提取,提取用的溶剂体积为菌丝体重量的12?15倍;所得提取液于40?60℃减压浓缩后干燥,得到菌丝体总提取物;②发酵液浓缩物加入95%乙醇或无水乙醇进行醇沉,所用溶剂体积为发酵液浓缩物体积的3?5.5倍,放置24h分层,收集上清液,于40?60℃减压浓缩后干燥,得到发酵液总提取物;③上述两种总提取物,分别分散于水中,依次以石油醚和乙酸乙酯萃取至溶剂层无色;合并各萃取液,于40?60℃减压浓缩后冷冻干燥,得到各总提取物的石油醚部位和乙酸乙酯部位。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:郭顺星梁寒峭陈晓梅张大为王春兰邢咏梅李春艳李兵
申请(专利权)人:中国医学科学院药用植物研究所
类型:发明
国别省市:

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