一种提高黄瓜远缘杂交组培苗驯化成活率的方法技术

本发明专利技术涉及了一种提高黄瓜远缘杂交组培苗驯化成活率的方法，属于生物技术领域，主要用于黄瓜种属间杂交材料的扩繁保存和驯化成苗，为远缘杂交技术在黄瓜育种中的应用提供了一个技术保证。其步骤主要包括：胚拯救获取无菌苗、诱导分化不定芽、再生芽的伸长和生根培养、驯化移栽及在此过程中的特殊配制的培养基及外界环境条件的调控。本方法操作简便，对原材料及实验室设施要求较低，但成效极好，可使远缘杂交组培苗获得更强壮的功能根，且缩短了炼苗周期，提高了移栽成活率，不仅为黄瓜种属间杂交乃至甜瓜属内杂交提供了稳定高效的再生苗驯化体系，而且也可以用于甜瓜属珍惜野生种的保存和扩繁及普通黄瓜组培苗的移栽成苗。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种提高黄瓜远缘杂交组培苗驯化成活率的方法，主要包括：胚拯救获取无菌苗、诱导分化不定芽、再生芽的伸长和生根培养、驯化移栽及在此过程中的特殊配制的培养基及外界环境条件的调控。其特征在于：(1)胚培养：接种时种子要去囊，纵切去除1／2种皮，培养基为MS+0.2mg/L6?BA+60mg/L蔗糖，高浓度的蔗糖有利于杂种胚的萌动，出芽后及时转接到新鲜的MS培养基上继续培养；(2)丛生芽的诱导：切取无菌苗的顶芽或腋芽，培养基为MS+0.5mg/L6?BA+30g/L蔗糖，此时要降低蔗糖浓度为胚培养时的一半；(3)再生芽的伸长培养：将丛生不定芽接种到MS+2mg/L6?BA+30g/L蔗糖的培养基上，提高细胞分裂素的浓度，促进其生长；(4)再生芽的生根：将大于1cm的不定芽转接于1／2MS+0.2mg／L?IBA+30g／L蔗糖的培养基上，此时将激素6?BA换成IBA，促进其不定根的萌发；(5)驯化：选择生根后健壮的苗子，将瓶盖掀起适应3天后，洗净培养基，将其移栽入育苗穴盘或育苗钵中，基质要提前用加了低浓度生根剂的清水浇透，可以使苗子生长更快更健壮，成活率更高，转入简易周转箱后，在箱底部放一小烧杯清水保湿，上面再覆上一层薄膜(保鲜膜即可)，用镊子在膜上扎些小孔，密度要小可透气，防止苗子在密闭湿润的环境中染病，将整个周转箱置于白天湿度85％／温度25℃，夜晚湿度80％／温度20℃的光照培养箱中，保持一个稳定的外界条件；(6)定植：驯化5天后，可逐渐揭开薄膜，一周后就可以完全揭开，组培苗在光照培养箱(白天湿度75％／温度25℃，夜晚湿度70％／温度20℃)中再生长一周后，就可直接定植于试验田。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈劲枫，贾利，娄群峰，钱春桃，李季，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：