一种便于扫描电镜观察的简易硅藻净化处理方法技术

本发明专利技术涉及一种便于扫描电镜观察的简易硅藻净化处理方法。该方法采用酒精梯度脱水后置于铝箔纸直接烘干的方法实现硅藻壳体的净化，操作简单、效率高、安全性高、耗时少、不对环境造成污染，能使硅藻壳体保有原有种属硅藻的形貌和微观结构并且易于观察。本发明专利技术的有益效果是：该方法通过采用梯度酒精高速离心去除硅藻壳周围的杂质组分，净化效果好，且不易破坏原有种属硅藻的形貌。在较短时间烘干后的硅藻有效地吸附在铝箔纸上；操作简单、耗时少、效率高、安全性高、不对环境造成污染，能使硅藻壳体保有原有种属硅藻的形貌和微观结构的特点。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及。该方法采用酒精梯度脱水后置于铝箔纸直接烘干的方法实现硅藻壳体的净化，操作简单、效率高、安全性高、耗时少、不对环境造成污染，能使硅藻壳体保有原有种属硅藻的形貌和微观结构并且易于观察。本专利技术的有益效果是：该方法通过采用梯度酒精高速离心去除硅藻壳周围的杂质组分，净化效果好，且不易破坏原有种属硅藻的形貌。在较短时间烘干后的硅藻有效地吸附在铝箔纸上；操作简单、耗时少、效率高、安全性高、不对环境造成污染，能使硅藻壳体保有原有种属硅藻的形貌和微观结构的特点。【专利说明】—种便于扫描电镜观察的简易硅藻净化处理方法
本专利技术涉及微藻的净化处理技术，具体地涉及水体硅藻的净化处理技术，更具体地涉及ー种便于扫描电镜观察的简易硅藻浄化处理方法。
技术介绍
硅藻是ー类具有色素体的单细胞植物，全世界约有16000多种，体长在Iiim到200 u m之间，根据生存模式分为浮游和底栖两大类，而根据形状可分为中心硅藻纲和羽纹硅藻纲两大类。硅藻分布极其广泛，在条件适宜的情况下，只要有水的地方，一般都有硅藻的踪迹。因为硅藻种类多、数量大，被称为海洋的“草原”，其为地球提供大约20%的氧气，并且可作为许多海洋生物的饵料。硅藻的细胞壁由无定形ニ氧化硅和有机质(主要是多肽和蛋白质)构成，故得名“硅藻”。硅藻细胞壁因种类和生存条件的不同，表现出精致而丰富的多级微纳米孔隙和微结构，且具有良好的机械强度、巨大的比表面积和多种光学特性。对硅藻部分、个体、种群和群体等不同层次的研究已经在各领域展开，从而使硅藻在仿生合成、微纳米器件、古气候研究、生物监测等方面有很好的应用前景。活体硅藻相比较硅藻土 (硅藻化石)，具有种类丰富、形体完整、可纯化培养等优势，但是由于活体硅藻来源于不同水体，浄化和观察比较困难。在现有的文献检索中发现，常用的硅藻净化或提纯方法都比较复杂，涉及到H2O2AlCl清洗、加热、过滤、重液提取、冻干等步骤。尽管这些方法可达到较高的浄化要求，有机质去除干净，硅藻形态保持完好，但是仅用于硅藻的电镜观察和藻种鉴别，以上方法不仅操作繁琐、耗时较长，而且涉及较多的化学试剂。若能使硅藻壳体保有原有种属硅藻的形貌和微观结构的前提下，实现硅藻的快速浄化，为硅藻的微观形貌记录和藻种鉴别提供极大帮助。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的弊病，提供一种便于扫描电镜观察的简易硅藻浄化处理方法，该方法采用酒精梯度脱水后置于铝箔纸直接烘干的方法实现硅藻壳体的净化，操作简单、效率高、安全性高、耗时少、不对环境造成污染，能使硅藻壳体保有原有种属硅藻的形貌和微观结构并且易于观察。为了实现上述目的，本专利技术的技术方案为:，包括以下步骤: (1)用移液枪或胶头滴管取5-15mL藻液放入离心管,在3000r/min-4000r/min转速下离心3-5min，去除上清液，得到硅藻浓缩液A ; (2)向硅藻浓缩液A中添加质量分数为159-30%的低浓度酒精至离心管2/3处，在3000r/min-4000r/min转速下离心3-5min,去除上清液,得到娃藻浓缩液B ； (3)向硅藻浓缩液B中添加质量分数为40%飞0%的中浓度酒精至离心管2/3处，在3000r/min-4000r/min转速下离心3-5min,去除上清液,得到娃藻浓缩液C ； (4)向硅藻浓缩液C中添加质量分数为90-100%的高浓度酒精至离心管2/3处，在3000r/min-4000r/min转速下离心3-5min,去除上清液,得到娃藻浓缩液D ；(5)将装有娃藻浓缩液D的离心管震荡30s使娃藻充分分散,得到娃藻浓缩液E； (6)将硅藻浓缩液E倒在铝箔纸上，放入烘箱在90-130°C下烘l0-l5min，干燥后即可放入扫描电镜观察。通过在场发射扫描电子显微镜下的观察，采用本专利技术的方法分离提取出的硅藻保持原有种属硅藻的形貌，并且微观结构清晰，无明显的孔道堵塞现象。本专利技术的从硅藻中分离提取硅藻壳体方法的优点: 1、该方法通过采用梯度酒精高速离心去除硅藻壳周围的杂质组分，浄化效果好，且不易破坏原有种属硅藻的形貌。2、该方法将酒精溶液浸润的硅藻壳置于铝箔纸上，充分发挥了酒精蒸发速度快，硅藻吸附能力强的特点，在较短时间烘干后的硅藻有效地吸附在铝箔纸上。3、本专利技术具有操作简单、耗时少、效率高、安全性高、不对环境造成污染，能使硅藻壳体保有原有种属硅藻的形貌和微观结构的特点。4、本专利技术从不同水样中提取出不同形貌的硅藻壳体，为藻种观察与鉴别提供了快捷的通道，为微纳研究提供了新的素材，也将为人们探索硅藻的新性质和新用途提供极大帮助。【具体实施方式】为了详细说明本专利技术的方法的
技术实现思路
，以下结合实施方式作进ー步说明。实施例1: (1)用移液枪或胶头滴管取5mL藻液放入离心管,在3000r/min转速下离心3min,去除上清液，得到硅藻浓缩液A ; (2)向硅藻浓缩液A中添加质量分数为15%的低浓度酒精至离心管2/3处，在3000r/min转速下离心3min,去除上清液,得到娃藻浓缩液B ； (3)向硅藻浓缩液B中添加质量分数为40%的中浓度酒精至离心管2/3处，在3000r/min转速下离心3min,去除上清液,得到娃藻浓缩液C ； (4)向硅藻浓缩液C中添加质量分数为90%的高浓度酒精至离心管2/3处，在3000r/min转速下离心3min,去除上清液,得到娃藻浓缩液D ；(5)将装有娃藻浓缩液D的离心管震荡30s使娃藻充分分散,得到娃藻浓缩液E； (6)将硅藻浓缩液E倒在铝箔纸上，放入烘箱在90°C下烘lOmin，干燥后即可放入扫描电镜观察。实施例2: (1)用移液枪或胶头滴管取10mL藻液放入离心管,在3500r/min转速下离心4min,去除上清液，得到硅藻浓缩液A ;(2)向硅藻浓缩液A中添加质量分数为24%的低浓度酒精至离心管2/3处，在3500r/min转速下离心4min,去除上清液,得到娃藻浓缩液B ； (3)向硅藻浓缩液B中添加质量分数为50%的中浓度酒精至离心管2/3处，在3500r/min转速下离心4min,去除上清液,得到娃藻浓缩液C ； (4)向硅藻浓缩液C中添加质量分数为95%的高浓度酒精至离心管2/3处，在3500r/min转速下离心4min,去除上清液,得到娃藻浓缩液D ；(5)将装有娃藻浓缩液D的离心管震荡30s使娃藻充分分散,得到娃藻浓缩液E； (6)将硅藻浓缩液E倒在铝箔纸上，放入烘箱在110°C下烘13min，干燥后即可放入扫描电镜观察。实施例3: (1)用移液枪或胶头滴管取15mL藻液放入离心管,在4000r/min转速下离心5min,去除上清液，得到硅藻浓缩液A ; (2)向硅藻浓缩液A中添加质量分数为30%的低浓度酒精至离心管2/3处，在4000r/min转速下离心5min,去除上清液,得到娃藻浓缩液B ； (3)向硅藻浓缩液B中添加质量分数为60%的中浓度酒精至离心管2/3处，在4000r/min转速下离心5min,去除上清液,得到娃藻浓缩液C ； (4)向硅藻浓缩液C中添加质量分数为100%的高浓度酒精至离心管2/3处，在4000r/min转速下离心5min,去除上清液,得到娃藻浓缩液D ；(5)本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种便于扫描电镜观察的简易硅藻净化处理方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)用移液枪或胶头滴管取5~15mL藻液放入离心管，在3000r/min～4000r/min转速下离心3~5min，去除上清液，得到硅藻浓缩液A；(2)向硅藻浓缩液A中添加质量分数为15%~30%的低浓度酒精至离心管2/3处，在3000r/min～4000r/min转速下离心3~5min，去除上清液，得到硅藻浓缩液B；(3)向硅藻浓缩液B中添加质量分数为40%~60%的中浓度酒精至离心管2/3处，在3000r/min～4000r/min转速下离心3~5min，去除上清液，得到硅藻浓缩液C；(4)向硅藻浓缩液C中添加质量分数为90%~100%的高浓度酒精至离心管2/3处，在3000r/min～4000r/min转速下离心3~5min，去除上清液，得到硅藻浓缩液D；(5)将装有硅藻浓缩液D的离心管震荡30s使硅藻充分分散，得到硅藻浓缩液E；(6)将硅藻浓缩液E倒在铝箔纸上，放入烘箱在90~130°C下烘5~15min，干燥后即可放入扫描电镜观察。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：邓湘云，李健保，蒋文凯，张国庆，刘鹏伟，王丰喜，景亚妮，白成英，杨杰，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：