本发明专利技术是一种无花果粗多糖的制备方法，其步骤如下：取无花果干若干剪碎，用95%乙醇回流去脂及色素，抽滤后残渣用70%乙醇回流去小分子杂质；然后取残渣，作为无花果多糖的提取原料；取残渣，用水作为溶剂在微波条件下提取后，抽滤，取滤液用旋转蒸发浓缩至100Ml，加95%乙醇后静置24h，离心后取沉淀，沉淀用Sevage法除去蛋白后，冷冻干燥，即得无花果粗多糖；提取时，残渣和水的料液比1：20-23；微波功率为550W，提取时间为13min，醇沉用乙醇量为提取液体积的3.50-3.60倍。本发明专利技术还公开了无花果粗多糖的纯化方法及用途。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术是一种无花果粗多糖的制备方法，其步骤如下：取无花果干若干剪碎，用95%乙醇回流去脂及色素，抽滤后残渣用70%乙醇回流去小分子杂质；然后取残渣，作为无花果多糖的提取原料；取残渣，用水作为溶剂在微波条件下提取后，抽滤，取滤液用旋转蒸发浓缩至100Ml，加95%乙醇后静置24h，离心后取沉淀，沉淀用Sevage法除去蛋白后，冷冻干燥，即得无花果粗多糖；提取时，残渣和水的料液比1：20-23；微波功率为550W，提取时间为13min，醇沉用乙醇量为提取液体积的3.50-3.60倍。本专利技术还公开了无花果粗多糖的纯化方法及用途。【专利说明】
本专利技术涉及一种多糖的制备方法，特别是一种无花果粗多糖的制备方法；本专利技术还涉及前述方法制得的无花果粗多糖的纯化方法；本专利技术还涉及无花果粗多糖或者无花果多糖纯品在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂中的用途。
技术介绍
无花果Ficus carica.L隶属桑科榕属，可食用部分是它的干燥花托，不仅味道甜美，还具有广泛的营养价值和药用价值。据报道，无花果可用于健胃清肠、消肿解毒，并可抑制肿瘤、提高机体免疫力。无花果富含多糖，多糖具有多种生理活性，如抗肿瘤、免疫调节、抗菌、抗氧化、抑制α-葡萄糖苷酶等。关于抗肿瘤等生物活性均可从文献中找到实验依据，但其抑制葡萄糖苷酶的作用却没有人研究，α -葡萄糖苷酶能催化α -1, 4-糖苷键水解，是小肠内麦芽糖、蔗糖等寡糖水解的酶，抑制α-葡萄糖苷酶的活性，可使葡萄糖的生成及吸收减缓，降低餐后血糖峰值。故α-葡萄糖苷酶抑制剂是一类新型的二型糖尿病用药，可用于餐后血糖调节，保持患者的餐后血糖平稳。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种方法简单合理、操作方便、得率高的无花果粗多糖的制备方法。本专利技术所要解决的 另一技术问题是提供了上述方法制备的无花果粗多糖的纯化方法。本专利技术所述方法制得的无花果粗多糖或者所述的纯化方法纯化得到的无花果多糖纯品可以用于制备α-葡萄糖苷酶抑制剂。本专利技术所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本专利技术是一种无花果粗多糖的制备方法，其特点是，其步骤如下:取无花果干若干剪碎，用95%乙醇回流去脂及色素，抽滤后残渣用70%乙醇回流去小分子杂质；然后取残渣，作为无花果多糖的提取原料；取残渣，用水作为溶剂在微波条件下提取后，抽滤，取滤液用旋转蒸发浓缩至100Μ1，加95%乙醇后静置24h,离心后取沉淀,沉淀用Sevage法除去蛋白后,冷冻干燥，即得无花果粗多糖；提取时，残渣和水的料液比1:20-23 ;微波功率为550W，提取时间为13min，醇沉用乙醇量为提取液体积的3.50-3.60倍。本专利技术所述的无花果粗多糖的制备方法中，最优选的技术特征是:提取时，残渣和水的料液比1:22.45 ;醇沉用乙醇量为提取液体积的3.55倍。本专利技术还公开了一种如以上技术方案所述方法制得的无花果粗多糖的纯化方法，其特点是，其步骤如下: (I)离子交换纤维素DEAE-52经蒸馏水充分溶胀后，用0.5 M的NaOH和0.5 M的HCl交替处理数次后再用蒸馏水反复洗涤，直至其PH至6进行装柱，采用2.0cm X 30 cm常压砂芯玻璃柱，装好的离子柱再用蒸馏水进行平衡24小时待用；(2)取无花果粗多糖以蒸馏水配制成质量浓度为1%的溶液；然后将无花果多糖溶液上已经平衡好的DEAE-52离子交换柱，上样体积为5 mL，用O-1M NaCl 200 mL以50 mL/h的流速过柱，用自动部分收集器以每管5mL的量进行收集，以苯酚一硫酸比色法测定每管的总糖浓度作洗脱曲线，根据洗脱曲线收集相同组份，于40°C减压浓缩并冷冻干燥得到无花果多糖； (3)Sephacryl S-300HR经蒸馏水轻柔洗涤数次、减压脱气后装柱，采用1.6 cm X 80cm柱，以蒸馏水平衡；将步骤(2)得到的无花果多糖溶于去离子水，配制浓度为15mg/mL的多糖溶液，上已经平衡好的Sephacryl S-300HR分子筛柱，上样量为2mL，用去离子水以6mL/h的流速进行洗脱；用分部收集器进行收集，用苯酚一硫酸比色法测每管的总糖浓度，再根据洗脱曲线合并相同组份，去盐透析后，40°C减压浓缩后冷冻干燥；如上操作反复进行纯化若干次冷冻干燥得到无花果多糖纯品。以下对本专利技术方法进行更为详细的描述。1.1材料与试剂 无花果干果购于连云港市海连路市场；α-葡萄糖苷酶(批号:EC3.2.1.20);4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG，批号:026K1516);阿卡波糖(批号:lot 16869);以上均购自Sigma公司；4_硝基苯酚(PNP，上海晶纯试剂有限公司)；硫酸、葡萄糖、苯酚、乙醇等均为国产分析纯。2 方法 2.1无花果粗多糖(CFCP)的制备及含量测定 2.1.1标准曲线 采用苯酚-硫酸法以葡萄糖为标准品，在490nm比色测定多糖提取液的吸光度，以吸光度(A)与溶液多糖质量浓度(c)进行线性回归，得回归方程为:A=14.568c-0.0082,r=0.9972。结果表明，葡萄糖在7.5-52.5 μ g/mL与吸光度线性关系良好。2.1.2 CFCP 提取 由于经典的水提取方法耗时，得率低等缺陷，在无花果多糖粗提过程中，采用微波法提取，为得到最大的多糖得率，采用了响应面法进行提取各因素的优化。采用了对无花果多糖得率影响较大的四个因素，即微波功率、微波时间、料液比和醇沉时加醇的体积倍数。提取前预处理:取无花果干若干剪碎，用95%乙醇回流去脂及色素，抽滤后残渣用70%乙醇回流去小分子杂质，然后取残渣，作为无花果多糖的提取原料。取残渣用水作为溶剂在微波条件下提取后，抽滤，取滤液用旋转蒸发浓缩至IOOmL左右，加若干倍体积95%乙醇后静置24h，离心后取沉淀，沉淀用Sevage法除去蛋白后，冷冻干燥，即得无花果粗多糖CFCP。并配制成一定浓度的CFCP溶液，待用。表I无花果多糖提取响应面分析因素与水平【权利要求】1.一种无花果粗多糖的制备方法，其特征在于，其步骤如下:取无花果干若干剪碎，用95%乙醇回流去脂及色素，抽滤后残渣用70%乙醇回流去小分子杂质；然后取残渣，作为无花果多糖的提取原料；取残渣，用水作为溶剂在微波条件下提取后，抽滤，取滤液用旋转蒸发浓缩至IOOMIJp 95%乙醇后静置24h，离心后取沉淀，沉淀用Sevage法除去蛋白后，冷冻干燥，即得无花果粗多糖；提取时，残渣和水的料液比1:20-23 ;微波功率为550W，提取时间为13min，醇沉用乙醇量为提取液体积的3.50-3.60倍。2.根据权利要求1所述的无花果粗多糖的制备方法，其特征在于:提取时，残渣和水的料液比1:22.45 ;醇沉用乙醇量为提取液体积的3.55倍。3.—种如权利要求1或2所述方法制得的无花果粗多糖的纯化方法，其特征在于，其步骤如下: (1)离子交换纤维素DEAE-52经蒸馏水充分溶胀后，用0.5 M的NaOH和0.5 M的HCl交替处理数次后再用蒸馏水反复洗涤，直至其PH至6进行装柱，采用2.0cm X 30 cm常压砂芯玻璃柱，装好的离子柱再用蒸馏水进行平衡24小时待用； (2)取无花果粗多糖以蒸馏水配制成质量浓度为1本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种无花果粗多糖的制备方法，其特征在于，其步骤如下：取无花果干若干剪碎，用95%乙醇回流去脂及色素，抽滤后残渣用70%乙醇回流去小分子杂质；然后取残渣，作为无花果多糖的提取原料；取残渣，用水作为溶剂在微波条件下提取后，抽滤，取滤液用旋转蒸发浓缩至100Ml，加95%乙醇后静置24h，离心后取沉淀，沉淀用Sevage法除去蛋白后，冷冻干燥，即得无花果粗多糖；提取时，残渣和水的料液比1：20?23；微波功率为550W，提取时间为13min，醇沉用乙醇量为提取液体积的3.50?3.60倍。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李盈蕾，陈建华，孙吉佑，詹永成，宋晓凯，
申请(专利权)人：淮海工学院，
类型：发明
国别省市：
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